分子標(biāo)記技術(shù)在黃鱔育種中的應(yīng)用

陳從武 裴夢(mèng)婷 易提林 袁漢文 楊代勤

摘要：通過對(duì)幾種分子標(biāo)記技術(shù)的介紹，總結(jié)了分子標(biāo)記技術(shù)在黃鱔（Monopterusalbus）的遺傳多樣性分析、親緣關(guān)系研究、性別鑒定等方面的研究應(yīng)用成果。

關(guān)鍵詞：分子標(biāo)記;黃鱔（Monopterusalbus）;遺傳多樣性;育種

中圖分類號(hào)：S917

黃鱔（Monopterusalbus）也稱鱔魚，廣泛分布于亞洲東部和南部，常年生活在水生植物密集的池塘湖泊或岸邊洞穴淤泥中[1]。不同于其他魚類，黃鱔有獨(dú)特的性反轉(zhuǎn)現(xiàn)象，即產(chǎn)卵前為雌性而后卵巢退化變成雄性。相對(duì)于其他淡水魚類，如鯉魚（Cyprinuscarpio）[2]、草魚（Ctenopharyngodonidella）[3]動(dòng)輒數(shù)十萬(wàn)產(chǎn)卵量來(lái)說，鱔魚懷卵量?jī)H有200～800粒，且體表無(wú)鱗難以應(yīng)對(duì)惡劣環(huán)境，所以種質(zhì)資源貧乏，由于近年來(lái)持續(xù)的環(huán)境污染和人為的過度捕撈，使得黃鱔資源到了急需保護(hù)的地步[4]。所以采取有效措施高效繁育黃鱔苗種與良種選育對(duì)黃鱔養(yǎng)殖業(yè)的可持續(xù)健康發(fā)展與種質(zhì)資源保護(hù)具有重要意義。

傳統(tǒng)的育種方法難以快速提高育種效率。隨著近年來(lái)生物技術(shù)的不斷發(fā)展，生物學(xué)前沿技術(shù)在黃鱔育種工作中得到應(yīng)用[5]，為黃鱔育種產(chǎn)業(yè)發(fā)展增添了新的動(dòng)力，其中最值得稱道的當(dāng)屬分子標(biāo)記技術(shù)。當(dāng)前，分子標(biāo)記已廣泛應(yīng)用于生物的基因定位、物種起源、親緣關(guān)系、遺傳育種等方面[6-9]。本文就分子標(biāo)記的種類、特點(diǎn)以及在黃鱔育種中的應(yīng)用作簡(jiǎn)要的概述，希望能夠?qū)ο嚓P(guān)領(lǐng)域研究起到推動(dòng)作用。

1分子標(biāo)記和分子標(biāo)記輔助育種技術(shù)

1.1分子標(biāo)記的概念及特點(diǎn)

分子標(biāo)記的基礎(chǔ)是以個(gè)體間核苷酸序列的變異作為特定的遺傳標(biāo)記，直觀地從DNA水平反映出生物的多樣性[10]。與常用的形態(tài)標(biāo)記、生物化學(xué)標(biāo)記、細(xì)胞標(biāo)記相較而言，分子標(biāo)記具有以下優(yōu)點(diǎn)[11]：在生物體發(fā)育的任何階段或是采集受試生物任何部位的組織，都可用來(lái)標(biāo)記分析;標(biāo)記的層次更深刻，反映的是來(lái)自DNA的差異;標(biāo)記類型多為共顯性，可以有效地選擇出隱性性狀;檢測(cè)手段簡(jiǎn)單、高效、快速。

1.2分子標(biāo)記的種類

隨著分子標(biāo)記技術(shù)的不斷完善和發(fā)展，如今已被廣泛應(yīng)用的分子標(biāo)記已有數(shù)十種[12]，主要可分為：（1）以分子雜交為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記，主要有數(shù)目可變串聯(lián)重復(fù)序列（VariableNumberofTandemRepeats，VNTR）和限制性內(nèi)切酶片段長(zhǎng)度多態(tài)性（RestrictionFragmentLengthPolymorphism，RFLP）兩種;（2）以PCR技術(shù)為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記，主要包括DNA擴(kuò)增指紋印跡（DNAAmplificationFingerprinting，DAF）、任意引物PCR（ArbitrarilyPrimedPolymeraseChainReaction，AP-PCR）、隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RandomAmplifiedPolymorphismDNA，RAPD）、簡(jiǎn)單重復(fù)序列（SimpleSequenceRepeat，SSR）、單引物擴(kuò)增反應(yīng)（SinglePrimerAmplificationReaction，SPAR）、DNA單鏈構(gòu)象多態(tài)性（SingleStrandConformationPolymorphism，SSCP）、序列特異性擴(kuò)增區(qū)（Sequence-characterizedAmplifiedRegion，SCAR）、雙脫氧化指紋法（DideoxyFingerprints，ddF）和序列標(biāo)志位點(diǎn)（SequenceTaggedSites，STS）技術(shù)等;（3）以限制性酶切和PCR技術(shù)為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記，主要有擴(kuò)增片段長(zhǎng)度多態(tài)性（AmplifiedFragmentLengthPolymorphism，AFLP）和酶切擴(kuò)增多態(tài)性序列（CleavedAmplifiedPolymorphismSequences，CAPS）;（4）以DNA芯片技術(shù)為基礎(chǔ)的分子標(biāo)記，主要是核苷酸多態(tài)性（SingleNucleotidePolymorphism，SNP）分子標(biāo)記;（5）線粒體DNA標(biāo)記，主要包括D-loop基因、Cytb基因以及一些其他的線粒體基因標(biāo)記。表1對(duì)上述部分標(biāo)記方法的操作原理、特性、成本等方面進(jìn)行了說明。

1.3分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)

分子標(biāo)記輔助選擇（Marker-assistedselection，MAS）是利用與目的基因緊密連鎖的分子標(biāo)記，來(lái)輔助選擇出具有目標(biāo)性狀的基因，從而獲得所需性狀個(gè)體，以此達(dá)到高效選育目的[14]。MAS既可以標(biāo)記選擇目標(biāo)基因，又可以標(biāo)記選擇目標(biāo)基因以外的全基因組，它是將分子標(biāo)記技術(shù)用于提高育種效率的一種方式[15]。

1.3.1分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)在育種領(lǐng)域的優(yōu)越性大量理論實(shí)踐研究表明，相對(duì)于傳統(tǒng)育種技術(shù)而言，MAS有顯著優(yōu)越性，可以在動(dòng)植物生長(zhǎng)發(fā)育的任何階段進(jìn)行MAS，并且不會(huì)因?yàn)榄h(huán)境因素不同以及基因是否表達(dá)而對(duì)結(jié)果產(chǎn)生影響;純合和雜合基因型可以用共顯性標(biāo)記進(jìn)行區(qū)分，所以能在分離世代的早期對(duì)純合基因型進(jìn)行輔助選擇;一些表型難以鑒別的性狀（如抗病性、抗寒性等）也可輔助選擇;還能夠?qū)⒖刂撇煌誀畹膬?yōu)良基因聚合在一起以達(dá)到定向選育的目的[16]。

1.3.2影響分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)的主要因素MAS雖然能夠提高選擇效率，但因其研究設(shè)計(jì)內(nèi)容廣泛，其效率受到很多其他因素的影響，如性狀的遺傳力、基因與標(biāo)記間的連鎖程度、世代的影響、分子標(biāo)記的數(shù)目和類型、控制性狀基因的數(shù)目等[13]。

2分子標(biāo)記在黃鱔育種中的應(yīng)用

2.1RAPD標(biāo)記在黃鱔育種中的應(yīng)用

RAPD即隨機(jī)擴(kuò)增多態(tài)性DNA（RandomamplifiedpolymorphicDNA，RAPD），RAPD在黃鱔育種中的應(yīng)用主要表現(xiàn)在其遺傳多樣性方面。一般來(lái)說，遺傳多樣性越高的物種對(duì)環(huán)境變化的適應(yīng)能力通常越強(qiáng)，也更容易擴(kuò)展其分布范圍[17]。黃鱔屬無(wú)鱗魚，相較于其他魚類而言缺少先天的鱗片保護(hù)，難以適應(yīng)劇烈的環(huán)境變化，所以研究黃鱔的遺傳多樣性對(duì)其至關(guān)重要。其次對(duì)遺傳多樣性的研究還可以用來(lái)掌握生物群體的遺傳結(jié)構(gòu)，對(duì)物種的演變歷史及進(jìn)化趨勢(shì)進(jìn)行推測(cè)，討論品種瀕危程度，為采取有效措施提供合理化建議[18]。

大量研究顯示，在形態(tài)特征[19]、蛋白質(zhì)[1，20]、染色體[21]水平上，黃鱔都具有較高的遺傳多樣性。劉良國(guó)等[22]對(duì)洞庭湖區(qū)三種體色黃鱔群體進(jìn)行RAPD分析計(jì)算得出，黃鱔群體內(nèi)和群體間的遺傳距離大小在0.038217至0.134074間，整體來(lái)看并不高，這說明該地區(qū)黃鱔遺傳多樣性較低。導(dǎo)致出現(xiàn)這一結(jié)果的原因，一方面是由于洞庭湖區(qū)的黃鱔屬可能只有唯一的一個(gè)種，受到的遺傳漸滲較低;另一方面，可能是由于長(zhǎng)期的近親繁殖導(dǎo)致了純度較高個(gè)體的出現(xiàn)，因此需要對(duì)該地區(qū)黃鱔種質(zhì)資源進(jìn)行保護(hù)。周先文[23]采用RAPD分子標(biāo)記對(duì)兩種不同體色黃鱔群體進(jìn)行分析，結(jié)果顯示黃色群體比灰色群體具有更加豐富的遺傳多樣性，這可能與黃色群體搶食速度和生長(zhǎng)速度都大于灰色群體有關(guān)，所以能在惡劣環(huán)境中更好地存活下來(lái)，因此在選育時(shí)可以重點(diǎn)對(duì)黃色群體進(jìn)行資源開發(fā)。李芝琴等[24]利用RAPD研究表明，在遺傳相似度方面，鄱陽(yáng)湖黃鱔低于湖南黃鱔[25]和廣東黃鱔[26]，但是與其他大部分魚類如鯽魚（Carassiusauratusauratus）[27]、鮈鯽（Gobiocyprisrarus）[28]相比這三個(gè)地區(qū)黃鱔遺傳相似度均略低，說明這些區(qū)域的黃鱔遺傳多樣性較為豐富，特別是鄱陽(yáng)湖黃鱔，具有顯著的遺傳改良潛力。運(yùn)用RAPD標(biāo)記可以從DNA水平對(duì)黃鱔個(gè)體或群體遺傳多樣性進(jìn)行直觀的分析，不僅對(duì)黃鱔的系統(tǒng)地位與遺傳變異的研究具有重要價(jià)值，而且可以為黃鱔苗種高效繁育與良種選育提供重要資料。

2.2SSR標(biāo)記在黃鱔育種中的應(yīng)用

SSR即簡(jiǎn)單重復(fù)序列（SimpleSequenceRepeat，SSR），也稱微衛(wèi)星標(biāo)記（Microsatellitemarkers），有數(shù)量豐富、容易檢測(cè)、重復(fù)性好、呈共顯性遺傳等優(yōu)點(diǎn)[29]。周宇芳等[30]利用SSR標(biāo)記對(duì)分布于浙江、江蘇、安徽、湖北4個(gè)地區(qū)的黃鱔野生群體進(jìn)行分析，結(jié)果顯示種群內(nèi)等位基因數(shù)（A）和有效等位基因數(shù)（Ne）在安徽群體中最多（11.00，8.29），浙江群體內(nèi)最少（7.25，5.55）;平均觀測(cè)雜合度（Ho）湖北群體（0.709）最高，浙江群體最低（0.589）;平均期望雜合度（He）安徽群體（0.918）最高，浙江群體最低（0.813）;平均多態(tài)信息含量（PIC）安徽群體（0.864）最高，浙江群體最低（0.736）。說明安徽群體的遺傳多樣性最為豐富，湖北群體和江蘇群體其次，而浙江群體相對(duì)較低。究其原因，是因?yàn)檎憬S鱔市場(chǎng)需求量大，人工養(yǎng)鱔規(guī)模小，除省外采購(gòu)?fù)飧嘁蕾囉诒镜匾吧东@從而導(dǎo)致資源匱乏，這也是浙江本地野生鱔魚價(jià)格奇高的原因所在，所以應(yīng)加強(qiáng)浙江野生黃鱔種質(zhì)資源的合理利用和保護(hù)。遺傳分化系數(shù)（FST）和Nei's遺傳距離顯示浙江群體和湖北群體間的遺傳距離最大，因此可以在生產(chǎn)上用這兩地黃鱔群體進(jìn)行雜交育種以期獲得最大的雜種優(yōu)勢(shì)。周華興等[31]利用SSR標(biāo)記方法對(duì)長(zhǎng)江沿岸6個(gè)地點(diǎn)野生黃鱔（3個(gè)干流，3個(gè)支流）進(jìn)行研究，結(jié)果表明3個(gè)支流樣本是中等分化的。這與其線粒體標(biāo)記得到的高度分化結(jié)果不同，這種不一致可能是其獨(dú)特的性反轉(zhuǎn)造成的。性反轉(zhuǎn)前黃鱔是雌性的，并且為種群遺傳庫(kù)提供線粒體和核DNA，產(chǎn)卵后黃鱔變成雄性，雄性黃鱔體型比雌性更大，更強(qiáng)壯，因此雄性可能遷移更遠(yuǎn)，存活率更高，這為雄性偏向性傳播提供了可能。由于線粒體母系遺傳[32]，雄性黃鱔只向種群遺傳庫(kù)提供核DNA，因此，雄性偏向性傳播可能會(huì)導(dǎo)致標(biāo)記之間種群結(jié)構(gòu)的差異。在黃鱔整個(gè)生命歷程中，雄性階段比雌性階段要長(zhǎng)得多，這可能導(dǎo)致線粒體和核數(shù)據(jù)之間的遺傳頻率不同，造成了由于標(biāo)記方法的不同而產(chǎn)生結(jié)果的差異。

2.3線粒體DNA標(biāo)記在黃鱔育種中的應(yīng)用

不同于其他細(xì)胞器，線粒體內(nèi)有自身遺傳物質(zhì)[33]，即線粒體DNA（MitochondrialDNA，mtDNA），相比于核基因，優(yōu)點(diǎn)在于其自身幾乎不發(fā)生重組現(xiàn)象，且結(jié)構(gòu)單一，突變率較高，進(jìn)化速度快[34]，所以在分析群體遺傳分化、種群進(jìn)化、親緣關(guān)系中被廣泛應(yīng)用[35]。主要包括D-loop基因、Cytb基因以及一些其他的線粒體基因標(biāo)記。凌俊等[36]將三種體色黃鱔用線粒體Cytb基因標(biāo)記，結(jié)果顯示在遺傳多樣性方面青斑鱔最高（Hd：0.9457，Pi：0.00601），深黃斑鱔次之（Hd：0.9153，Pi：0.00426），青黃斑鱔最低（Hd：0.7517，Pi：0.00211）。三種體色黃鱔的遺傳多樣性雖有少許差異但均處在較高水平，在資源自我恢復(fù)方面顯示出了較大潛力，出現(xiàn)的少許差異可能與三種體色黃鱔在自然界中的分布情況有關(guān)，青黃斑鱔在野外分布廣泛，一地一次采樣足夠使用，所以容易出現(xiàn)采集到的樣品親緣關(guān)系較近;而另外兩種在野外相對(duì)密度較小，樣品通常來(lái)自多個(gè)地方，因此展現(xiàn)出來(lái)的遺傳多樣性也更為豐富。雖然野生深黃斑鱔分布密度低，但在生長(zhǎng)速度[37]、繁殖力[38]方面都有顯著優(yōu)勢(shì)，深受養(yǎng)殖戶和育種工作者的喜愛，為了黃鱔產(chǎn)業(yè)的可持續(xù)發(fā)展要采取有效措施對(duì)該品種進(jìn)行保護(hù)并做合理的開發(fā)利用。胡玉婷等[39-40]采用線粒體Cytb標(biāo)記研究了安徽境內(nèi)長(zhǎng)江流域和淮河流域黃鱔的遺傳多樣性，結(jié)果分別為Hd：0.932，Pi：0.01904和Pi：0.01882，Hd：0.787，顯示出較高水平的遺傳多樣性，體現(xiàn)了安徽兩大水系野生黃鱔群體有豐富的遺傳多樣性，對(duì)黃鱔種質(zhì)資源的保護(hù)及恢復(fù)具有積極意義。蔡欣等[41]通過對(duì)四川綿陽(yáng)地區(qū)部分野生黃鱔mtDNAD-loop序列多態(tài)性分析得出綿陽(yáng)野生黃鱔群體內(nèi)不同個(gè)體之間的遺傳距離并不高，兩兩組合之間的平均遺傳距離為0.0033或0.0066，這可能是由于綿陽(yáng)地區(qū)80%以上為山區(qū)或丘陵地帶，導(dǎo)致該地區(qū)黃鱔與外界基因交流機(jī)會(huì)少，野生黃鱔類群?jiǎn)我唬霈F(xiàn)了純度較高的個(gè)體有關(guān)。梁宏偉等[42]以mtDNACOI基因序列作為標(biāo)記，分析了來(lái)源于湖北、江西、安徽、湖南、重慶和山東6個(gè)地理種群共187條野生黃鱔的遺傳多樣性，在646bp片段中出現(xiàn)了61個(gè)變異位點(diǎn)，所有個(gè)體共有38種單倍型。群體的單倍型多樣性為0.886，核苷酸多樣性為0.01094。總體來(lái)說這6個(gè)群體遺傳多樣性高，但重慶群體遺傳多樣性較低，單倍型多樣性為0-204，遠(yuǎn)遠(yuǎn)低于群體單倍型多樣性，核苷酸多樣性也和總體不在一個(gè)數(shù)量級(jí)，這可能是重慶市整體位于四川盆地，與外部有天然的地理屏障相隔有關(guān)。然而，所有單倍型并沒有因地理群體的不同而獨(dú)立存在，遺傳距離也沒有與地理距離出現(xiàn)絕對(duì)的依存關(guān)系。關(guān)于不同地理種群黃鱔之間的系統(tǒng)進(jìn)化關(guān)系還有待于進(jìn)一步研究，增加樣本豐富度，再結(jié)合江河流域分布、苗種流向、銷售流通、人工放流等因素進(jìn)行綜合分析。

2.4其他分子標(biāo)記技術(shù)在黃鱔育種中的應(yīng)用

在黃鱔親緣關(guān)系和種質(zhì)鑒定方面，鄭浩亮[43]利用SNP技術(shù)標(biāo)記分析不同地區(qū)黃鱔遺傳多樣性與親緣關(guān)系，對(duì)8個(gè)不同地區(qū)野生黃鱔進(jìn)行雜交，得到河南固始和巢湖雜交F1代鱔苗生長(zhǎng)速度最快，8周時(shí)間由4.23cm增長(zhǎng)到12.66cm，體重達(dá)到1.9780g，因此可以利用河南固始和安徽巢湖黃鱔雜交后代進(jìn)行規(guī)模化養(yǎng)殖推廣。吳秀林[44]運(yùn)用SRAP標(biāo)記對(duì)3種體色黃鱔進(jìn)行研究，結(jié)果顯示深黃大斑鱔（A）、淺黃細(xì)斑鱔（B）、青灰鱔（C）三個(gè)群體Nei'S基因多樣性分別為0.2781、0.3011、0.3126，Shannon'S多樣信息指數(shù)依次為0.4065、0.4373、0.4505。3個(gè)群體間的Nei'S無(wú)偏遺傳距離為0.0410～0.0887，遺傳相似度為0.9151～0.9598;A與C群體間遺傳距離最大（0.0887），有較遠(yuǎn)的親緣關(guān)系，與B群體間遺傳距離最小（0.0410），親緣關(guān)系相對(duì)較近，與凌俊等[37]研究結(jié)果相近。胡彬等[45]利用cDNA-SRAP（相關(guān)序列擴(kuò)增多態(tài)性）標(biāo)記發(fā)現(xiàn)黃鱔體外黏液中的雌雄表達(dá)差異片段1在不同性別黃鱔體外黏液中都有表達(dá)，表達(dá)量在雄性中明顯高于雌性，這不僅對(duì)黃鱔性反轉(zhuǎn)的研究提供了更多方向，也為活體鑒定黃鱔性別增加了準(zhǔn)確性，對(duì)定向選擇繁殖力更高的雌性黃鱔個(gè)體有一定的指導(dǎo)意義。楊太有等[46]利用ISSR標(biāo)記對(duì)黃河流域黃鱔親緣關(guān)系進(jìn)行分析，結(jié)果顯示河南群體和山東群體親緣關(guān)系最近而且都與陜西群體親緣關(guān)系相近，可共同聚為一大類;內(nèi)蒙古群體與甘肅群體有較近的親緣關(guān)系可作為另一大類;親緣關(guān)系最遠(yuǎn)的為內(nèi)蒙古群體和山東群體。從以上結(jié)果可以看出黃河流域黃鱔的親緣關(guān)系與地理距離的遠(yuǎn)近有一定的依存關(guān)系。

3展望

近年來(lái)DNA分子標(biāo)記技術(shù)在生物遺傳育種中得到廣泛應(yīng)用，隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，越來(lái)越多操作簡(jiǎn)單、成本低廉、信息量大的標(biāo)記技術(shù)被開發(fā)出來(lái)。分子標(biāo)記成為了當(dāng)今黃鱔育種中必不可少的一部分，在定向培育黃鱔優(yōu)良品系方面展現(xiàn)出了極大潛力，但還有許多需要完善的地方。首先，現(xiàn)階段的基因定位工作進(jìn)度有待提高，可被利用的分子標(biāo)記基因存在連鎖不緊密或尚未被定位的現(xiàn)象;即使在已經(jīng)精確定位的基因中，能夠被隨時(shí)利用的標(biāo)記仍不充足，并且不能保證能在群體雙親間表現(xiàn)出多態(tài)性。此外，在改良數(shù)量性狀方面，分子標(biāo)記的應(yīng)用并沒有像最初想象得那么廣泛，主要是因?yàn)辄S鱔基因發(fā)掘的不足，不同方面的遺傳信息處于待整合狀態(tài)。

針對(duì)上述存在的問題，在今后的黃鱔育種工作中要盡可能保證既是遺傳研究群體，又是育種群體，從而確保基因定位與育種工作的同時(shí)開展;積極尋找與目的基因緊密連鎖的分子標(biāo)記;各研究機(jī)構(gòu)組織要構(gòu)建信息共享網(wǎng)絡(luò)，將大量處于零散狀態(tài)的遺傳信息整合起來(lái)方便育種工作者的研究利用。隨著分子生物學(xué)新成果和新技術(shù)的不斷涌現(xiàn)，以及生物信息學(xué)、基因組學(xué)等研究的進(jìn)一步發(fā)展，分子標(biāo)記技術(shù)將在遺傳多樣性、親緣關(guān)系、遺傳圖譜的構(gòu)建、目的基因的分離與克隆、種質(zhì)鑒定、疾病防治等方面為黃鱔苗種高效繁育與良種選育開辟了一個(gè)新的時(shí)代。

參考文獻(xiàn)：

[1]

張繁榮，雷剛.幾種不同體色黃鱔的酯酶同工酶的分析[J].江漢大學(xué)學(xué)報(bào)，2000，17（6）：8-11.

[2]吳再平，程亮，劉丹.興國(guó)紅鯉魚在東北地區(qū)的繁育試驗(yàn)[J].畜牧獸醫(yī)科學(xué)（電子版），2019，55（19）：20-21.

[3]肖偉，郭磊，張鋒，等.寧夏地區(qū)草魚自繁晚苗培育及兩年養(yǎng)成技術(shù)模式探索[J].水產(chǎn)養(yǎng)殖，2019（8）：3-5.

[4]曾尚偉.分析黃鱔規(guī)模化人工繁殖技術(shù)研究與應(yīng)用推廣[J].農(nóng)業(yè)開發(fā)與裝備，2019（3）：219-220.

[5]方平.黃鱔促性腺激素釋放激素的cDNA克隆與序列分析[D].重慶：西南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2005.

[6]袁鷹，王程，韓俊，等.一個(gè)大豆矮稈性狀基因的分子標(biāo)記定位[J].北京農(nóng)學(xué)院學(xué)報(bào)，2019，34（3）：25-29.

[7]HAMEEDUKA，ABDELAZIZK，SHERIFNE.Geneticdiversityofgrapevine（VitisviniferaL.）cultivarsinAl-MadinahAl-Munawarabasedonmolecularmarkersandmorphologicaltraits[J].BangladeshJournalofPlantTaxonomy，2020，27（1）：113-127.

[8]BETTINIS，LAZZARIM，F(xiàn)RANCESCHINIV.Molecularmarkersinthestudyofnon-modelvertebrates：Theirsignificantcontributionstothecurrentknowledgeoftetrapodglialcellsandfisholfactoryneurons.[J].Resultsandproblemsincelldifferentiation，2019（68）：355-377.

[9]謝元澄，李欣原，蘇勝?gòu)?基于黃河鯉新品系IGF2b基因SNPs獲取體系的建立及在該品系選育中的應(yīng)用[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2019，26（4）：686-694.

[10]薛紅.大豆四向重組自交系群體株高發(fā)育動(dòng)態(tài)播期效應(yīng)的QTL分析[D].哈爾濱：東北農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018.

[11]劉洋.分子標(biāo)記技術(shù)淺談[J].科技信息，2009（14）：82-82.

[12]郝炯，渠云芳.DNA分子標(biāo)記在作物育種中的應(yīng)用[J].山西農(nóng)業(yè)科學(xué)，2009，37（3）：81-85.

[13]吳昊，陳濤，姚姝，等.分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)及其在水稻定向改良上的應(yīng)用研究進(jìn)展[J].江蘇農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014，42（2）：22-27.

[14]程思源.分子標(biāo)記輔助構(gòu)建小葉基因在黃瓜不同遺傳背景下的近等基因系[D].鄭州：河南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2018.

[15]DUDLEYJW.Molecularmarkersinplantimprovement：manipulationofgenesaffectingquantitativetraits[J].CropScience，1994，34（1）：322-322.

[16]張文龍，陳志偉，楊文鵬，等.分子標(biāo)記輔助選擇技術(shù)及其在作物育種上的應(yīng)用研究[J].種子，2008，27（4）：39-43.

[17]徐愛遐.芥菜型油菜（Brassicajuncea）遺傳多樣性及其黃籽與芥酸性狀的分子標(biāo)記[D].咸陽(yáng)：西北農(nóng)林科技大學(xué)，2008.

[18]李智軍.三個(gè)馬品種的STR群體遺傳分析[D].烏魯木齊：新疆農(nóng)業(yè)大學(xué)，2013.

[19]王彥.不同體色黃鱔子代體色變化及某些生物學(xué)特性的初步研究[D].武漢：華中農(nóng)業(yè)大學(xué)，2008.

[20]楊發(fā)群，周秋白，張燕萍，等.鄱陽(yáng)湖地區(qū)3種體色黃鱔酯酶同工酶的遺傳差異分析[J].經(jīng)濟(jì)動(dòng)物學(xué)報(bào)，2005（2）：110-113.

[21]劉良國(guó)，席在星，鄭荷，等.兩種不同體色黃鱔的染色體組型[J].水產(chǎn)科學(xué)，2006，25（6）：287-290.

[22]劉良國(guó)，王文彬，曾伯平，等.三種體色黃鱔的RAPD分析[J].水產(chǎn)科學(xué)，2005，24（1）：22-25.

[23]周先文.兩種體色黃鱔群體的生長(zhǎng)差異及RAPD分析[D].長(zhǎng)沙：湖南農(nóng)業(yè)大學(xué)，2009.

[24]李芝琴，趙大顯，歐陽(yáng)珊，等.5種不同體色黃鱔RAPD的初步分析[J].南昌大學(xué)學(xué)報(bào)（理科版），2011，35（1）：90-94.

[25]尹紹武，李建中，周工健，等.黃鱔野生群體和養(yǎng)殖群體遺傳結(jié)構(gòu)的RAPD分析[J].應(yīng)用與環(huán)境生物學(xué)報(bào)，2005，11（3）：328-332.

[26]魯雙慶.黃鱔DNA多態(tài)性分析及Cu2+、AE對(duì)黃鱔生理生化的影響[D].廣州：中山大學(xué)，2002.

[27]宋平，周偉，潘云峰，等.普通鯽魚的RAPD標(biāo)記及其遺傳多樣性[J].武漢大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2000，46（6）：721-725.

[28]王劍偉，王偉，崔迎松.野生和近交稀有鮈鯽的遺傳多樣性[J].生物多樣性，2000，8（3）：241-247.

[29]楊夢(mèng)婷，黃洲，干建平，等.SSR分子標(biāo)記的研究進(jìn)展[J].杭州師范大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版），2019，18（4）：429-436.

[30]周宇芳，胡杭嬌，張龍韜，等.長(zhǎng)江中下游黃鱔遺傳多樣性的微衛(wèi)星分析[J].生物技術(shù)通報(bào)，2011（11）：187-192.

[31]ZHOUHX，HUYT，JIANGH，etal.PopulationgeneticsofswampeelintheYangtzeRiver：comparativeanalysesbetweenmitochondrialandmicrosatellitedataprovidenovelinsights[J].PeerJ，2020（8）：e8415.

[32]楊玉慧，李義明.分子生態(tài)學(xué)研究與動(dòng)物多樣性保護(hù)[J].生物多樣性，2001（3）：284-293.

[33]張尊月，李坪，唐莉，等.線粒體和胚胎發(fā)育關(guān)系的研究進(jìn)展[J].昆明醫(yī)科大學(xué)學(xué)報(bào)，2019，40（1）：118-122.

[34]BROWNWM，WILSONGAC.RapidevolutionofanimalmitochondrialDNA[J].Evolution，2012，76（4）：1967-1971.

[35]楊子拓，劉麗.線粒體分子標(biāo)記技術(shù)在水產(chǎn)養(yǎng)殖行業(yè)的應(yīng)用[J].廣東農(nóng)業(yè)科學(xué)，2014（22）：135-140.

[36]凌俊，江河，胡玉婷，等.三種體色黃鱔群體遺傳多樣性分析[J].水產(chǎn)學(xué)雜志，2016，29（4）：6-10.

[37]陳芳，楊代勤，蘇應(yīng)兵.3種不同體色黃鱔生長(zhǎng)速度的比較[J].長(zhǎng)江大學(xué)學(xué)報(bào)：自然科學(xué)版，2009，6（3）：1673-1409.

[38]楊代勤，陳芳，阮國(guó)良，等.3個(gè)品系黃鱔的繁殖力比較研究[J].水生態(tài)學(xué)雜志，2009，2（4）：133-135.

[39]胡玉婷，江河，胡王，等.安徽長(zhǎng)江流域黃鱔六個(gè)地理種群的遺傳變異研究[J].四川動(dòng)物，2015，34（1）：21-28.

[40]胡玉婷，江河，潘庭雙，等.安徽淮河水系黃鱔群體遺傳多樣性及其遺傳結(jié)構(gòu)[J].安徽農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2016，43（4）：529-535.

[41]蔡欣，張海容.綿陽(yáng)地區(qū)部分野生黃鱔mtDNAD-loop多態(tài)性分析[J].中國(guó)農(nóng)學(xué)通報(bào)，2011，27（1）：424-427.

[42]梁宏偉，孟彥，羅相忠，等.基于線粒體COI基因的6個(gè)黃鱔群體遺傳多樣性[J].中國(guó)水產(chǎn)科學(xué)，2018（4）：837-846.

[43]鄭浩亮.黃鱔不同地理群體的分子遺傳差異及雜交F1代生長(zhǎng)性能的比較研究[D].荊州：長(zhǎng)江大學(xué)，2019.

[44]吳秀林.不同體色黃鱔生長(zhǎng)性能、營(yíng)養(yǎng)價(jià)值評(píng)價(jià)及遺傳多樣性研究[D].南京：南京農(nóng)業(yè)大學(xué)，2016.

[45]胡彬，曹哲明，丁煒東，等.黃鱔粘液雌雄差異的cDNA-SRAP分析[J].華中農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報(bào)，2017，36（3）：74-78.

[46]楊太有，溫樹紅，郝艷軍，等.黃河流域黃鱔自然群體遺傳多樣性和遺傳結(jié)構(gòu)的研究[J].水生生物學(xué)報(bào)，2011（3）：532-537.

ApplicationofmolecularmarkertechnologiesinMonopterusalbus

CHENCongwu1，2，PEIMengting3，YITilin1，CHENFang1，YUANHanwen1，YANGDaiqin1，2

（1.CollegeofAnimalScience，YangtzeUniversity，Jingzhou434025，China;2.HubeiProvinceMonopterusalbusTechnologyResearchCenter，Jingzhou434025，China;3.JingzhouVocationalandTechnicalCollege，Jingzhou434020，China）

Abstract：Throughtheintroductionofseveralmolecularmarkertechnologies，theresearchandapplicationresultsofmolecularmarkertechnologyweresummarizedingeneticdiversityanalysis，kinshipresearch，sexidentificationandotheraspectsofMonopterusalbus.

Keywords：molecularmarker;Monopterusalbus;geneticdiversity;breeding

（收稿日期：2021-07-02;修回日期：2021-10-05）