B族鏈球菌顯色培養在產前篩查中的應用及孕婦妊娠結局預測價值

孫 雷,孫繼文,邵 坤

安徽省阜陽市婦女兒童醫院檢驗科，安徽阜陽 236000

B族鏈球菌(GBS)感染是現階段臨床中導致出現新生兒感染甚至死亡的重要原因[1]。新生兒GBS感染可分為早發型和晚發型，出生1周內出現稱為早發型，1周后至90 d內出現稱為晚發型[2]。有研究指出，腦膜炎、敗血癥、肺炎等多種嚴重性疾病均是新生兒GBS感染可能引發的并發癥[3]。此外，有報道指出孕婦產前亦可引發GBS感染，其主要癥狀包括早產、絨毛膜羊膜炎、死胎等，產后可能出現肺炎及敗血癥[4]。有文獻表明低體質量兒、羊膜早破、泌尿系統感染等均與孕晚期GBS感染密切相關，因而臨床中及時有效地檢出GBS感染具有十分重要的意義，而傳統的血平板分離鑒定法，其檢測耗時長、技術要求高、操作復雜，并且存在一定比例的假陽性，因而臨床中亟待尋找快捷有效的檢測GBS的方案[5]。顯色培養檢測GBS結果更為精確，操作更為便捷，有利于臨床推廣應用，近年來本院逐步推廣顯色培養檢測GBS，并取得了較高的臨床應用價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2018年1月至2020年3月在本院住院分娩并行顯色培養法檢測GBS的164例孕產婦作為研究對象，年齡23～44歲，平均(28.93±5.81)歲，初產婦92例，經產婦72例，孕周35～27周，平均(36.28±1.93)周。納入標準：(1)單胎宮內妊娠；(2)檢查前兩周內無抗菌藥物使用史；(3)B超檢查結果顯示胎兒存活；(4)知情且簽署知情同意書。排除標準：(1)合并心、肝、腎等重要臟器疾病；(2)合并出現腫瘤；(3)有妊娠期高血壓綜合征等妊娠期并發癥；(4)生殖道感染其他致病菌；(5)拒絕配合或主動申請退出本研究者。本研究經本院倫理委員會批準。

1.2方法 由產科醫師在無外陰消毒且不作清潔處理的情況下，使用無菌拭子采集所有孕婦陰道下1/3分泌物，并在取樣后60 min內送檢。將拭子插入培養基，于培養箱中以5% CO2、35 ℃培養18～24 h，若培養基呈胡蘿卜色則判定為GBS陽性，將未顯胡蘿卜色的培養基分別轉種于血平板和二分格平板，繼續在同等條件下培養18～24 h，血平板可疑菌落行儀器鑒定確認后判定為GBS陽性，二分格平板出現菌落β 溶血且呈胡蘿卜色則判定為GBS陽性，其余均判定為GBS陰性。

1.3觀察指標 依照GBS檢測結果將孕產婦分為GBS陽性組和GBS陰性組，詳細記錄所有孕婦妊娠結局和新生兒結局，包括胎膜早破、宮內感染、早產、產后出血、新生兒窒息、新生兒肺炎、新生兒上呼吸道感染、新生兒敗血癥等。

2 結 果

2.1GBS陽性與陰性孕婦一般資料調查結果 GBS陽性組孕產婦年齡、孕周及產次與GBS陰性組孕婦差異無統計學意義(P>0.05)，見表1。

表1 GBS陽性與陰性孕婦一般資料調查結果

2.2孕產婦妊娠結局調查結果 GBS陽性組孕婦不良妊娠結局率明顯高于GBS陰性組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 孕產婦妊娠結局調查結果(n)

2.3新生兒結局調查結果 本組研究結果顯示，GBS陽性組新生兒窒息、肺炎、敗血癥和上呼吸道感染等不良結局率明顯高于GBS陰性組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 新生兒結局調查結果(n)

2.4GBS感染與妊娠結局和新生兒感染的關系 GBS感染是導致孕婦不良妊娠結局和新生兒感染的獨立性危險因素(P<0.05)，見表4。

表4 GBS感染與妊娠結局和新生兒感染的關系

2.5GBS感染預測妊娠結局和新生兒感染的關系 使用GBS感染預測妊娠結局和新生兒感染時均具有較高特異度，且預測妊娠結局和新生兒感染時差異均有統計學意義(P<0.05)。見表5。

表5 GBS感染預測妊娠結局和新生兒感染的關系(%)

3 討 論

妊娠期婦女其陰道上皮細胞糖原水平異常上升，乳酸濃度顯著升高，產生適合耐酸微生物生長的環境而導致其大量繁殖，破壞陰道內微環境，妊娠期陰道黏膜損傷，機體免疫功能降低，病原菌入侵后機體的抵抗能力下降，增加陰道細菌感染概率[6]。GBS是臨床中較為常見的一種條件致病菌，在厭氧環境中存活，屬于無乳鏈球菌屬于革蘭陽性菌，且患者多合并念珠菌感染[7]。既往有研究發現圍生期母嬰感染與鏈球菌密切相關，且鏈球菌感染也極易導致嬰幼兒敗血癥、腦膜炎的發生[8]。GBS對絨毛膜組織有極強地穿透力和吸附力，GBS感染婦女易出現不良妊娠結局，GBS是妊娠期孕婦生殖道感染的主要致病菌之一，可能導致孕婦生殖道合并其他感染的概率顯著升高。有研究指出，GBS感染會導致早產、胎膜早破、孕婦感染、宮內胎兒生長受限、新生兒感染甚至宮內胎兒死亡等不良妊娠結局[9]。若GBS感染不及時進行合理、有效地治療，可能導致新生兒智力發育遲緩、視聽覺喪失等遠期后遺癥。孕婦攜帶GBS是目前臨床中導致新生兒晚發感染的重要因素之一[10]。感染GBS后，新生兒伴隨出現腦積水、智障、耳聾等神經系統后遺癥可能性顯著升高，對新生兒的生長發育及心理發育均造成嚴重不良影響[11]。因此臨床中應對GBS感染給予高度的重視，加強早期篩查，并采取合理方案進行干預[12]。

本研究采用顯色培養檢測對GBS進行檢測，檢測過程中通過增菌顯色培養基可直接對結果進行判定，若結果為陰性則繼續使用血平板和二分格平板對可疑菌落進行鑒定，可用過瓊脂誘導GBS轉化為β溶血型，提高GBS的檢出率[13-14]。GBS 運送增菌顯色培養基可有效縮短檢測時間，降低漏檢率，提高GBS 檢出率，成本更低且結果判讀更簡便，可有效提高圍產期婦女的GBS感染檢出率，起到高效輔助臨床的作用[15]。對研究結果深入探討發現，GBS陽性組不良妊娠結局率明顯高于GBS陰性組，GBS陽性組新生兒不良結局率明顯高于GBS陰性組。進一步分析發現，GBS感染是導致孕婦不良妊娠結局和新生兒感染的獨立性危險因素。結果提示不良妊娠結局和新生兒不良結局均與GBS 感染密切相關，分析認為妊娠期婦女免疫力降低，機體防御能力減弱，而GBS可逆行導致感染出現，經炎癥細胞吞噬處理后GBS可與細菌蛋白水解酶協同作用直接進行侵襲，降低胎膜張力并引起胎膜早破的發生。

生殖道中GBS定植后其對絨毛膜具有較強的穿透力和吸附作用，進而產生上行對胎膜造成感染，通過細菌產生的蛋白水解酶和炎癥細胞的吞噬作用直接進行侵襲[16]。此外，GBS感染后可能導致孕產婦出現胎膜局部張力減低，導致患者出現胎膜早破[17]。進一步分析發現，胎膜早破后會導致產道內GBS與新生兒接觸概率顯著增加，因而在影響新生兒GBS感染出現胎膜早破的獨立性危險因素。此外，新生兒GBS疾病與胎膜早破是陰道GBS定植發病的重要且常見的中介變量，但現階段胎膜早破與產道內GBS感染間的因果關系以及作用機制仍未被證實和揭示，有待持續追蹤分析。一般情況下，GBS感染后會導致孕婦出現陰道菌群失調，導致原有的生理平衡被打破，引起陰道菌群結構出現改變。此外，不良妊娠結局與陰道菌群平衡結構失衡密切相關[16]。但目前孕婦出現陰道菌群改變與新生兒GBS相關疾病的發生等是否存在必然聯系或獨立性影響因素仍未明確，且支原體、人乳頭瘤病毒、衣原體等陰道常見的病原體、正常菌群或致病菌等其他菌群是否與GBS密切相關也是近年來臨床研究的熱點問題之一。GBS可釋放前列腺素、細胞因子、蛋白水解酶等多種活性因子，刺激子宮收縮，并可能導致早產。此外，GBS穿膜能力較強，感染胎盤絨毛膜引起宮內感染、絨毛膜羊膜炎，降低胎兒儲備能力，降低胎兒機體免疫力，改變宮內微環境，誘發胎兒窘迫，增加剖宮產概率。此外，GBS感染還可能導致新生兒出現窒息、肺炎、感染等不良結局的出現，因而在臨床中應予以高度重視。孕婦生殖道內若出現GBS定植是影響妊娠期孕婦及新生兒不良預后的獨立性危險因素，并且可采集陰道分泌物對GBS情況進行檢測。

綜上所述，顯色培養可有效檢測GBS，且GBS感染是導致妊娠期婦女不良妊娠結局和新生兒感染的獨立性危險因素，在臨床中應予以足夠的重視。但本研究并未對新生兒進行長期追蹤以分析其遠期隨訪結局，有待后續追蹤分析。