9個桑樹品種的硒、類黃酮、1—DNJ含量的分析

彭云武,王榮輝,楚 渠, 梁嘉俊, 孟 剛, 凌 君

(1.安康學院 陜西省蠶桑重點實驗室,陜西 安康 725000;2.陜西省安康市蠶種場, 陜西 安康 725000)

硒是1957年德國科學家Schwarz證明為人和動物必需的微量元素之一[1]。安康市各種中藥材含硒[2,3]。查詢資料顯示安康是國內最大的天然富硒區[4,5]。1-脫氧野尻霉素(1-DNJ)是一種極性化合物 ，在醫療保健方面有著重大的應用價值[6,7,8]。類黃酮是一類多苯化合物，屬于植物次生代謝物。桑樹被國家衛生部確認為“藥食同源”植物。陜西石泉珍愛生態農業科技開發有限公司年生產桑葉粉、桑葉茶等產品達30 t，陜西福臻茶業有限公司年產桑葉茶50 t。目前已經有相關文獻報道了桑樹類黃酮、1-脫氧野尻霉素等含量的測定分析[9,10,11]，鑒于此，于2019年5月15日同時采取9個桑樹品種的頂桑芽葉和7～8位成熟片葉烘干分析其硒、類黃酮、1—DNJ的含量，為桑葉的綜合利用提供理論數據。

1 材料與方法

1.1 實驗材料

試驗桑樹品種有：908誘、陜桑305、荷葉白、強桑一號、農桑14、雙安-農桑8號、育71-1、金十、豐田2號。2019年5月15日結合春季大蠶期桑樹摘心技術處理分別采摘桑芽和芽端向下第7～8位的成熟新鮮葉片，洗掉灰塵等雜物，自然通風條件下晾干后放入預熱電熱鼓風干燥箱內85℃，烘干備用。

茶葉：紫陽縣煥古鎮茶葉，市場上購買。

土壤：在采摘紫陽縣雙安鎮林本河村雙安-農桑8號桑葉樣本時取桑樹位置地表下15 cm處的土壤，在安康學院恒口蠶?；厝∩@地表下15 cm處的土壤。

1.2 儀器藥品

電感耦合等離子體質譜儀 、原子熒光光度計、電子天平、電熱恒溫鼓風干燥箱、超聲波清洗機、可見分光光度計/酶標儀、自動控溫消化爐、高效液相色譜儀等。

濃硝酸(GR)、1%硝酸、60%乙醇、蒸餾水、鹽酸、乙腈 、醋酸 、甲醇、植物類硒測定試劑盒、1-DNJ試劑盒、植物類黃酮試劑盒。

1.3 試驗方法

1.3.1 硒的測定 植物硒元素含量的測定：采用硝酸消解，ICP-MS法測定植物硒元素含量[12]。稱取干試樣 0.5 g，消化，消化液定容至刻度備用，試液上機測定硒元素含量。

土壤硒元素含量的測定：采用硝酸-雙氧水-氫氟酸消解，ICP-MS法測定土壤硒元素含量[13]。稱取待測樣品0.2 g，消化，消化液定容搖勻，試液上機測定硒元素含量。

1.3.2 類黃酮的測定 樣本烘干粉碎，稱取0.02 g，加入提取液，提取2h，離心10 min，取上清液上樣到分光光度計/酶標儀，測定510 nm處吸光值。根據測定的數值計算桑葉中的類黃酮含量。

1.3.3 1-DNJ的測定 9個桑樹品種樣本的桑葉1-DNJ含量的測定所采樣品均采用反相高效液相色潽-紫外檢測法測定[14]。稱取0.1 g樣本，加入試劑三，過夜浸提，取離心上清液。取樣本上清液，加入試劑一和試劑二，反應30 min，加入試劑三定容至1 mL，加樣品在高效液相色潽儀進行測試。

1.4 數據統計分析

試驗測定的數據用DPS 15.10軟件分析。

2 結果與分析

2.1 9個不同桑樹品種和2份土壤硒的含量

從圖1可知，桑樹品種的硒含量桑芽比片葉低，只有雙安-農桑8號和908誘桑芽比片葉高；從桑芽與片葉的平均數看，桑樹品種之間硒含量依次為農桑14硒含量0.38 mg·kg-1、陜桑305硒含量0.33 mg·kg-1、育71-1硒含量0.27 mg·kg-1、強桑一號和荷葉白硒含量0.24 mg·kg-1、金十和豐田2號硒含量0.23 mg·kg-1、雙安-農桑8號硒含量0.71 mg·kg-1、908誘硒含量0.08 mg·kg-1、煥古炒青茶硒含量0.24 mg·kg-1、安康學院恒口蠶?；赝寥牢?.17 mg·kg-1、紫陽縣雙安鎮林本河村土壤硒含量0.25 mg·kg-1，結果顯示桑樹的硒含量品種之間存在差異，桑樹富硒能力較強。

圖1 試驗樣品的硒含量/(mg·kg-1)

2.2 不同桑樹品種的類黃酮含量

從圖2可知，桑樹品種的桑芽與片葉含類黃酮的量因品種不同有差異；從桑芽與片葉的平均數看，桑樹品種之間類黃酮含量依次為陜桑305號40.64 mg·g-1、強桑一號37.82 mg·g-1、豐田2號37.63 mg·g-1、荷葉白32.26 mg·g-1、金十28.73 mg·g-1、育71-1 28.05 mg·g-1、雙安-農桑8號26.19 mg·g-1、農桑14含量24.21 mg·g-1、908誘22.94 mg·g-1、煥古炒青茶含量86.77 mg·g-1。結果顯示桑樹的類黃酮含量品種之間存在差異，桑葉的類黃酮含量低于茶葉。

圖2 樣品中類黃酮含量/(mg·g-1干重)

2.3 不同桑樹品種的1-DNJ含量

從圖5可知，桑樹品種的桑芽比片葉1-DNJ含量高，只有強桑一號和908誘桑芽比片葉低；從桑芽與片葉的平均數看，桑樹品種之間的1-DNJ含量依次為908誘1.75 mg·g-1、農桑14 號1.25 mg·g-1、豐田2號1.07 mg·g-1、育71-1含量1.06 mg·g-1、強桑一號0.98 mg·g-1、金十0.95 mg·g-1、雙安-農桑8號0.85 mg·g-1、荷葉白0.76 mg·g-1、陜桑305含量0.59 mg·g-1、煥古炒青茶1-DNJ含量0.52 mg·g-1。結果顯示桑樹的1-DNJ含量品種之間存在差異，桑葉的1-DNJ含量高于茶葉。

圖3 1-DNJ空白標準圖譜

圖4 1-DNJ桑葉樣本圖譜

圖5 1-DNJ含量/(mg·g-1)

3 結論

(1)桑樹的桑芽硒含量比片葉含量低；桑樹品種的硒含量依次是農桑14號0.38 mg·kg-1﹥陜桑305硒含量0.33 mg·kg-1﹥育71-1硒含量0.27 mg·kg-1﹥強桑一號和荷葉白硒含量0.24 mg·kg-1﹥金十和豐田2號硒含量0.23 mg·kg-1﹥雙安-農桑8號硒含量0.71 mg·kg-1﹥908誘硒含量0.08 mg·kg-1。煥古炒青茶硒含量0.24 mg·kg-1，安康學院恒口蠶桑基地土壤硒含量0.17 mg·kg-1、紫陽縣雙安鎮林本河村土壤硒含量0.25 mg·kg-1。桑樹的硒含量品種之間存在差異，桑樹富硒能力較強。

(2)桑樹的桑芽類黃酮含量與片葉類黃酮含量因桑樹品種不同有差異；桑樹品種之間類黃酮含量依次為陜桑305號40.64 mg·g-1﹥強桑一號 37.82 mg·g-1﹥豐田2號37.63mg·g-1﹥荷葉白32.26 mg·g-1﹥金十28.73 mg·g-1﹥育71-1含量28.05 mg·g-1﹥雙安-農桑8號26.19 mg·g-1﹥農桑14號24.21 mg·g-1﹥908誘22.94 mg·g-1，煥古炒青茶86.77 mg·g-1。桑樹的類黃酮含量品種之間存在差異，桑葉的類黃酮含量低于茶葉。

(3)桑樹的桑芽1-DNJ含量比片葉高；桑樹品種的1-DNJ含量依次為908誘1.75 mg·g-1﹥農桑14號1.25 mg·g-1﹥豐田2號1.07 mg·g-1﹥育71-1含量1.06 mg·g-1﹥強桑一號0.98 mg·g-1﹥金十0.95 mg·g-1﹥雙安-農桑8號0.85 mg·g-1﹥荷葉白0.76 mg·g-1﹥陜桑305號0.59 mg·g-1，煥古炒青茶1-DNJ含量0.52 mg·g-1。桑樹的1-DNJ含量品種之間存在差異,該試驗結果驗證了安康地區桑樹品種中桑葉DNJ含量具有顯著差異的結論[11]，桑葉的1-DNJ含量高于茶葉。