APN/CD13抑制劑烏苯美司：一個(gè)抗腫瘤化療藥物分子伴侶

馬玉倩，邢曉燕，葛彬彬，李玉天，姜文妍，賈海永，徐文方，王學(xué)健

(1. 濰坊醫(yī)學(xué)院，山東 濰坊 261053；2. 青島海洋生物醫(yī)學(xué)研究所，山東 青島 266100)

近年來(lái)腫瘤發(fā)病率逐步上升，已成為一種常見(jiàn)疾病，嚴(yán)重?fù)p害人類健康。據(jù)中國(guó)國(guó)家癌癥中心數(shù)據(jù)顯示，我國(guó)每天有一萬(wàn)多人確診癌癥，相當(dāng)于平均每分鐘就有7個(gè)人患上癌癥。肺癌的發(fā)病率和死亡率均居首位，發(fā)病人數(shù)每年約有78.1萬(wàn)，胃癌、結(jié)直腸癌等癌癥的發(fā)病率也居高不下[1]。目前，針對(duì)腫瘤的治療手段已取得了巨大進(jìn)步，包括手術(shù)、全身放療及藥物治療等。雖然細(xì)胞毒類藥物毒性大，耐受性較差，但殺死腫瘤細(xì)胞作用明顯，因此依然是抗腫瘤治療中的“主力軍”。然而，如何增強(qiáng)該類藥物的療效、降低毒副作用，是目前面臨的重要問(wèn)題。

氨肽酶N(aminopeptidase N，APN，又稱CD13)，是Ⅱ型Zn2+依賴性的跨膜-金屬蛋白酶，廣泛分布在哺乳動(dòng)物的腎臟、小腸、肝臟及中樞神經(jīng)系統(tǒng)中，并且在多種腫瘤細(xì)胞中高表達(dá)，進(jìn)而促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖、轉(zhuǎn)移和血管生成[2]。CD13是半靜息態(tài)肝癌干細(xì)胞(liver cancer stem cells,LCSC)的生物標(biāo)記物，作為抑制LCSC的靶點(diǎn)可抑制肝癌引起的耐藥、復(fù)發(fā)、侵襲和轉(zhuǎn)移。因此，CD13+細(xì)胞有望在腫瘤干細(xì)胞靶向治療中發(fā)揮巨大作用[3]。與此同時(shí)，來(lái)自大阪大學(xué)的科學(xué)家們發(fā)現(xiàn)，與CD13低表達(dá)組相比，CD13高表達(dá)組患者復(fù)發(fā)率更早，存活時(shí)間更短，得出CD13富集與肝癌患者的早期復(fù)發(fā)和不良預(yù)后相關(guān)。因此，找到CD13抑制劑尤為重要。目前上市的唯一APN抑制劑—烏苯美司(Ubneimex)，也稱Bestatin，化學(xué)名為N-[(2S，3R)-3-氨基-2-羥基-4-苯丁酰]-L-亮氨酸，1987年在日本率先上市，常作為免疫增強(qiáng)劑治療白血病或其他抗癌藥的輔助用藥[4]。近幾年研究發(fā)現(xiàn)，烏苯美司對(duì)實(shí)體瘤的治療也有較好的應(yīng)用前景，可以在一定程度上抑制胃癌、非小細(xì)胞肺癌和非轉(zhuǎn)移性膀胱癌，并能夠延長(zhǎng)病人的生存期。

在臨床實(shí)踐中，聯(lián)合用藥通過(guò)發(fā)揮藥物的協(xié)同抗腫瘤作用能夠達(dá)到提高藥物療效或減輕藥物毒副作用的目的，逐漸成為腫瘤治療的研究熱點(diǎn)。有研究表明，烏苯美司可與細(xì)胞毒類藥物聯(lián)合用藥，有效抑制腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)，增強(qiáng)抗腫瘤的免疫功能，顯著提高患者長(zhǎng)期生存率。Hu等[5]通過(guò)檢索相關(guān)數(shù)據(jù)庫(kù)，將烏苯美司對(duì)惡性腫瘤患者生存率影響的隨機(jī)試驗(yàn)納入Meta分析，采用兩組間生存率比值(OR)和95%置信區(qū)間(95% CI)評(píng)價(jià)烏苯美司的療效。發(fā)現(xiàn)在烏苯美司組和對(duì)照組之間，1年OR為1.40 (95% CI =1.06-1.85)，2年OR為1.43 (95% CI =1.08-1.89)，3年OR為1.39 (95% CI =1.07-1.81)。結(jié)果表明，規(guī)范化聯(lián)合烏苯美司治療方案能提高惡性腫瘤患者的生存率。因此，細(xì)胞毒類藥物聯(lián)合烏苯美司的療法有望成為惡性腫瘤治療的新方案。

1 烏苯美司增強(qiáng)細(xì)胞毒類藥物抗腫瘤作用

烏苯美司是最早發(fā)現(xiàn)的APN抑制劑，有較好的抗腫瘤活性。細(xì)胞毒類藥物毒性大，耐受性較差，但殺死腫瘤細(xì)胞作用明顯。因此將烏苯美司與細(xì)胞毒類藥物聯(lián)合使用有著安全性高、耐受性好、毒副作用低、增強(qiáng)抗腫瘤作用的優(yōu)勢(shì)(Tab 1)。

1.1 對(duì)肝癌的研究肝細(xì)胞性肝癌(hepatocellular carcinoma,HCC)是常見(jiàn)的肝原發(fā)惡性腫瘤，由于其治療易復(fù)發(fā)、易轉(zhuǎn)移，目前還未有特效藥物可治愈。黃小鷹[6]等醫(yī)師采用華蟾素+烏苯美司的臨床方案治療中、晚期原發(fā)性肝癌患者，發(fā)現(xiàn)治療緩解率明顯提高，天冬氨酸轉(zhuǎn)氨酶(AST)、總膽紅素(TBIL)、谷氨酸轉(zhuǎn)氨酶(ALT)水平急劇下降，藥物不良反應(yīng)發(fā)生率低。烏苯美司具有誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡的效果，華蟾素本身具有抑制細(xì)小血管生長(zhǎng)及供血的作用，兩者聯(lián)合后，可持續(xù)誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞發(fā)生凋亡，阻止腫瘤出現(xiàn)血管異生，抑制腫瘤持續(xù)生長(zhǎng)。并且聯(lián)合之后可緩解患者治療過(guò)程中多種不適，增強(qiáng)治療依從性。有研究者進(jìn)一步研究烏苯美司聯(lián)合化療藥物治療肝癌的作用機(jī)制，Yamashita等[7]研究了烏苯美司與常規(guī)化療藥物氟尿嘧啶(5-FU)、順鉑(CDDP)、阿霉素(DXR)和索拉非尼(SOR)聯(lián)合應(yīng)用的抗腫瘤作用，研究發(fā)現(xiàn)普通肝癌細(xì)胞單用化療藥處理后，CD13表達(dá)上調(diào)，合用CD13抑制劑Ubenimex后，G0/G1期的細(xì)胞比例降低，細(xì)胞凋亡和細(xì)胞內(nèi)活性氧(ROS)水平上調(diào)，進(jìn)而增加細(xì)胞對(duì)化療藥的敏感性。

1.2 對(duì)肺癌的作用研究肺癌是常見(jiàn)的惡性腫瘤之一，其發(fā)病率和死亡率明顯上升，對(duì)人類的健康和生命構(gòu)成較大威脅。烏苯美司具有明顯的抗腫瘤作用和增強(qiáng)免疫作用，烏苯美司聯(lián)合用藥可明顯改善患者的免疫功能，用做患者的輔助用藥。麻青等[8]基于紫杉醇與順鉑的常規(guī)化療方案上聯(lián)合使用烏苯美司，CD4+、CD4+/CD8+和自然殺傷(NK)細(xì)胞在治療后顯著高于對(duì)照組，但CD8+水平明顯低于對(duì)照組，且聯(lián)合用藥組的肺癌患者Ⅲ-Ⅳ級(jí)白細(xì)胞減少，部分毒副反應(yīng)發(fā)生率明顯低于對(duì)照組，因此可得出聯(lián)合用藥組能明顯提高化療效果，改善患者免疫功能，并減少部分毒副作用發(fā)生的結(jié)論。

1.3 對(duì)胃癌的研究胃癌單一藥物化療的緩解率低，而聯(lián)合化療后可提高緩解率、延長(zhǎng)生存期。烏苯美司作為一種新型的抗腫瘤藥物，近年來(lái)在晚期治療和術(shù)后胃癌方面取得了一定的療效，使得胃癌的化療有明顯的改善。趙偉峰等[9]分析96例符合入組標(biāo)準(zhǔn)的胃癌晚期患者的臨床資料，依據(jù)用藥方案的不同分為兩組：對(duì)照組SOX(奧沙利鉑+替吉奧)和觀察組(奧沙利鉑+替吉奧+烏苯美司)。比較兩組療效及不良反應(yīng)發(fā)生情況，發(fā)現(xiàn)治療后兩組有效率分別為68.75%和47.92%；對(duì)于治療后6個(gè)月、12個(gè)月觀察組生存率分別為93.75%、81.25%，高于對(duì)照組77.08%、56.25%。除此之外，兩組就白細(xì)胞下降、血小板下降、肝功能異常、惡心嘔吐發(fā)生率進(jìn)行比較，觀察組顯著低于對(duì)照組；因此證明，烏苯美司聯(lián)合奧沙利鉑+替吉奧方案證實(shí)在晚期胃癌的治療是極好的，提高了患者遠(yuǎn)期生存率，降低不良反應(yīng)的發(fā)生。朱斌等[10]將60例胃癌患者，隨機(jī)分為對(duì)照組(XELOX方案：奧沙利鉑+卡培他濱)和觀察組(烏苯美司聯(lián)合XELOX方案)進(jìn)行臨床后評(píng)價(jià)及不良反應(yīng)檢測(cè)。發(fā)現(xiàn)觀察組治療后CD4+/CD8+及NK細(xì)胞比例高于治療前及對(duì)照組；但兩組治療后CD4+和CD8+細(xì)胞比例比較差異無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。觀察組治療后不良反應(yīng)發(fā)生率為30.00%顯著低于對(duì)照組的53.33%。因此，與單用XELOX方案輔助化療比較，烏苯美司聯(lián)合XELOX方案治療胃癌更能改善機(jī)體免疫功能，減輕化療不良反應(yīng)。

1.4 對(duì)多發(fā)性骨髓瘤的作用研究多發(fā)性骨髓瘤是一種漿細(xì)胞惡性增殖性疾病，約占血液系統(tǒng)惡性腫瘤的10%，由于單克隆漿細(xì)胞惡性增生、廣泛浸潤(rùn)并分泌大量單克隆抗體從而引起骨質(zhì)破壞、貧血、高鈣血癥、高粘滯綜合癥及腎功能不全等一系列臨床表現(xiàn)。黃鵬程等[11]隨機(jī)將多發(fā)性骨髓瘤患者分成觀察組(烏苯美司+沙利度胺)和對(duì)照組(沙利度胺)治療。發(fā)現(xiàn)觀察組有效率(93.75%)明顯高于對(duì)照組(70.97%)；觀察組的血清IgG、IgA、骨髓瘤細(xì)胞水平在治療后均低于治療后對(duì)照組水平，而血紅蛋白水平高于對(duì)照組。張家友等[12]隨機(jī)將多發(fā)性骨髓瘤患者分成A組[沙利度胺+馬法蘭+強(qiáng)的松(TMP)方案]和B組(烏苯美司聯(lián)合TMP方案)，結(jié)果表明治療后B組IgG、IgA、骨髓瘤細(xì)胞及骨髓抑制發(fā)生率均明顯低于A組；B組治療效果(86.67%)和生存期(16.45±0.71月)明顯好高于A組治療效果(63.33%)和生存期(14.35±0.47月)。因此，在TMP化療治療多發(fā)性骨髓瘤過(guò)程中聯(lián)合使用烏苯美司，可以提高患者的緩解程度和生存率，減少骨髓抑制的發(fā)生。

1.5 增敏放療放療是腫瘤治療中不可或缺的手段之一，據(jù)統(tǒng)計(jì)有超過(guò)60%的腫瘤患者需要進(jìn)行放療。因此，如何實(shí)現(xiàn)放療的最大效能，放射增敏劑的加入是尤為重要的。放療增敏劑是一種化學(xué)物質(zhì)或藥物，當(dāng)與放射治療同時(shí)使用時(shí)能提高射線的生物效應(yīng)。并且可以殺死較多的的腫瘤細(xì)胞，但對(duì)正常細(xì)胞損傷較少。烏苯美司可作為增敏劑用于放療，提高治療效果。Tsukamoto等[13]用烏苯美司處理Hela細(xì)胞觀察到集落形成率明顯減少，說(shuō)明細(xì)胞增殖能力有所下降，并且在小鼠荷瘤的體內(nèi)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn)接受放療和烏苯美司聯(lián)合治療的小鼠的腫瘤體積明顯比單獨(dú)放療組小，提示烏苯美司可增強(qiáng)宮頸癌細(xì)胞對(duì)放射的敏感性。

2 烏苯美司聯(lián)合用藥逆轉(zhuǎn)耐藥機(jī)制

化學(xué)療法是治療惡性腫瘤的重要方法，常用于腫瘤化療的藥物包括烷化劑類、金屬鉑類、抗代謝類藥物等。但是，腫瘤細(xì)胞對(duì)多種化學(xué)藥物產(chǎn)生交叉耐藥性-多藥耐藥(MDR)是造成腫瘤化療失敗的主要原因。因此逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞多藥耐藥已成為提高腫瘤耐藥的關(guān)鍵方向，烏苯美司可通過(guò)以下機(jī)制達(dá)到逆轉(zhuǎn)耐藥的目的。

2.1 靶向腫瘤干細(xì)胞腫瘤干細(xì)胞(CSCs)具有干細(xì)胞自我更新、多向分化潛能、化療耐藥及無(wú)限增殖等特性，是腫瘤發(fā)展和復(fù)發(fā)的的根源所在。Sun等[14]在HCC中發(fā)現(xiàn)了CD13特異性表達(dá)的腫瘤干細(xì)胞群體。研究人員用流式細(xì)胞術(shù)檢測(cè)化療后的肝癌細(xì)胞中CD13+CSCs的百分比增多，經(jīng)驗(yàn)證CD13+CSCs依賴于酪氨酸的代謝，而酪氨酸代謝還產(chǎn)生核乙酰輔酶A用來(lái)乙?；头€(wěn)定關(guān)鍵轉(zhuǎn)錄因子Foxd3，進(jìn)而使得CD13+CSCs細(xì)胞增多并對(duì)化療藥物產(chǎn)生抗性。因此，若想要防止肝癌復(fù)發(fā)，可靶向消除CD13+細(xì)胞。Haraguchi等[15]發(fā)現(xiàn)CD13抑制劑烏苯美司可抑制休眠的CSCs的自我更新和致瘤能力，并且在異種移植的小鼠中發(fā)現(xiàn)烏苯美司與傳統(tǒng)化療藥物5-FU的聯(lián)合使用比5-FU單獨(dú)用藥的腫瘤體積顯著縮小，并認(rèn)為烏苯美司可靶向作用于腫瘤干細(xì)胞進(jìn)而提高肝癌的治療效果。Sun等[16]在小鼠體內(nèi)移植模型中，發(fā)現(xiàn)5-FU單獨(dú)用藥后CD13+細(xì)胞存活，CD13表達(dá)上調(diào)，但與CD13抑制劑聯(lián)合處理有助于CD13+細(xì)胞和肝CSCs徹底清除?？梢?jiàn)氨肽酶抑制劑烏苯美司靶向作用于腫瘤干細(xì)胞，提高治療效果。

2.2 抑制腫瘤細(xì)胞自噬自噬是一種通過(guò)溶酶體在細(xì)胞內(nèi)部降解功能失調(diào)的細(xì)胞組分的過(guò)程，通過(guò)介導(dǎo)胞內(nèi)蛋白降解和胞漿成分再循環(huán)利用而維持細(xì)胞穩(wěn)態(tài)。據(jù)推測(cè)，自噬是長(zhǎng)期細(xì)胞毒素治療后癌細(xì)胞存活和最終復(fù)發(fā)的最重要機(jī)制之一，尤其是在獲得耐藥性的過(guò)程中，治療藥物可以殺死大部分細(xì)胞，但是保護(hù)性自噬能夠使腫瘤細(xì)胞耐受惡劣的生存環(huán)境，促進(jìn)腫瘤細(xì)胞存活。一旦生長(zhǎng)條件有利，這些細(xì)胞可以恢復(fù)活性使癌癥復(fù)發(fā)。由于自噬使細(xì)胞產(chǎn)生對(duì)抗癌藥物的抗性并使細(xì)胞在毒性應(yīng)激的情況下殘留下來(lái)，故在有抗性的癌細(xì)胞中抑制自噬可能是根除癌癥的有效辦法。

Liu等[17]在對(duì)索拉非尼耐藥的腎癌細(xì)胞中發(fā)現(xiàn)自噬與索拉菲尼耐藥有關(guān)，烏苯美司通過(guò)抑制自噬的Akt信號(hào)通路，恢復(fù)耐藥細(xì)胞株對(duì)索拉非尼的敏感性。使用自噬抑制劑后可逆轉(zhuǎn)腫瘤細(xì)胞中由自噬引起的耐藥，增強(qiáng)化療藥對(duì)腫瘤的細(xì)胞毒性，恢復(fù)細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感性。Zhao Y[18]等人進(jìn)一步證明了的過(guò)表達(dá)CD13能夠激活P38/Hsp27/CREB信號(hào)通路，增強(qiáng)CREB介導(dǎo)的ATG7轉(zhuǎn)錄，促進(jìn)肝癌細(xì)胞發(fā)生自噬，誘導(dǎo)肝癌細(xì)胞耐藥。Guo等[19]研究者發(fā)現(xiàn)CD13在胃癌(GC)細(xì)胞中的表達(dá)與CDDP耐藥呈正相關(guān)。與此同時(shí)，上皮膜蛋白3 (EMP3)是CD13下游的一個(gè)公認(rèn)靶點(diǎn)，是CD13在磷酸肌醇3-激酶/蛋白激酶B (PI3K/AKT)通路中發(fā)揮作用的修飾因子。CD13抑制劑烏苯美司通過(guò)抑制GC細(xì)胞自噬和上皮-間充質(zhì)轉(zhuǎn)化(EMT)從而抑制CD13/EMP3/PI3K/AKT/NF-κB通路來(lái)克服GC細(xì)胞對(duì)CDDP的耐藥?？傻贸鰹醣矫浪究梢阅孓D(zhuǎn)CDDP的耐藥性，并增強(qiáng)GC細(xì)胞對(duì)CDDP的敏感性。因此，烏苯美司和化療藥物的聯(lián)合應(yīng)用通過(guò)抑制腫瘤細(xì)胞自噬已成為克服腫瘤耐藥的一種潛在策略。

2.3 誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡細(xì)胞凋亡是指基因?yàn)榫S持內(nèi)環(huán)境穩(wěn)定而控制的細(xì)胞主動(dòng)死亡。當(dāng)機(jī)體處于穩(wěn)態(tài)時(shí)，人體細(xì)胞正常繁殖、自然死亡，但當(dāng)出現(xiàn)異常時(shí)，會(huì)導(dǎo)致發(fā)育異?；蚰[瘤的發(fā)生。凋亡是多基因控制的過(guò)程，由BCL-2家族、癌基因c-myc、抑癌基因p53等參與。一些抗腫瘤藥物如烏苯美司可通過(guò)誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡發(fā)揮出抑制腫瘤的作用。

Guo等[20]證明烏苯美司抑制原癌基因Pim-3的表達(dá)，同時(shí)使得 BCL-2和BCL-XL蛋白表達(dá)下降，增強(qiáng)腫瘤細(xì)胞凋亡。此外，烏苯美司還降低MDR相關(guān)蛋白 P-gp、MRP3和MRP2的表達(dá)，增強(qiáng)順鉑在細(xì)胞內(nèi)的積累，這表明烏苯美司通過(guò)對(duì)Pim-3的作用從而逆轉(zhuǎn)MDR進(jìn)而提高肝癌細(xì)胞對(duì)化療藥物的敏感。此外，Guo等[21]還發(fā)現(xiàn)烏苯美司也可通過(guò)下調(diào)CD13、Bcl-XL、BCL-2和Survivin的表達(dá)，增加Bax的表達(dá)，激活Caspase-3介導(dǎo)的凋亡級(jí)聯(lián)，進(jìn)而逆轉(zhuǎn)胃癌細(xì)胞的多藥耐藥。并且，烏苯美司可通過(guò)抑制PI3K/AKT/mTOR通路的磷酸化來(lái)增加5-FU和奧沙利鉑在細(xì)胞內(nèi)的積累，從而下調(diào)P-gp和MRP1等膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)。因此，烏苯美司通過(guò)激活Caspase-3介導(dǎo)的細(xì)胞凋亡并抑制膜轉(zhuǎn)運(yùn)有關(guān)蛋白的表達(dá)來(lái)逆轉(zhuǎn)胃癌細(xì)胞的MDR(Fig 1)。Azimi等[22]發(fā)現(xiàn)CD13在對(duì)BRAF抑制劑耐藥的黑色素瘤細(xì)胞中表達(dá)增加，酪氨酸激酶-腎上腺素受體A2(EphA2)和肝細(xì)胞生長(zhǎng)因子受體(MET)的水平也增加，并可導(dǎo)致EphA2去磷酸化，進(jìn)而誘導(dǎo)黑色素瘤細(xì)胞的生長(zhǎng)停滯和凋亡。Wan等[23]研究發(fā)現(xiàn)聯(lián)合應(yīng)用烏苯美司和5FU可通過(guò)下調(diào)P-gp的mRNA和蛋白表達(dá)，抑制多藥耐藥A549(人非小細(xì)胞肺癌)細(xì)胞株在裸鼠體內(nèi)的生長(zhǎng)，并且5FU和烏苯美司聯(lián)合作用后可明顯促進(jìn)A549/ADR細(xì)胞的凋亡，增加5-FU和烏苯美司在細(xì)胞內(nèi)的蓄積，增強(qiáng)抗腫瘤活性。除此之外，有研究發(fā)現(xiàn)烏苯美司可作為一種有效的垂體輔助治療藥物，誘導(dǎo)腦垂體瘤細(xì)胞凋亡和自噬細(xì)胞死亡，使得腫瘤細(xì)胞存活率低。

Fig 1 Ubenimide inhibited the expression of PIM-3 protein, thus reducing the expression of Bcl-2 and Bcl-XL and increasing the apoptosis of tumor cells

2.4 促進(jìn)宿主免疫調(diào)節(jié)烏苯美司作為一種免疫調(diào)節(jié)劑，通過(guò)增強(qiáng)T和B淋巴細(xì)胞的功能使DNA合成增加，增強(qiáng)自然殺傷細(xì)胞(NK)的殺傷活力。同時(shí)，還增加集落刺激因子的合成，刺激骨髓細(xì)胞的再生及分化，起到調(diào)節(jié)、增強(qiáng)、興奮和恢復(fù)機(jī)體免疫功能的作用。例如楊春霞等[24]將接受化療的惡性腫瘤患者隨機(jī)分為對(duì)照組和烏苯美司聯(lián)合組，兩組分別治療3個(gè)月，比較各免疫指標(biāo)和血清炎癥因子的變化。結(jié)果發(fā)現(xiàn)聯(lián)合組IL-10水平顯著高于對(duì)照組，人腫瘤壞死因子α(TNF-α)和C反應(yīng)蛋白(CRP)水平顯著低于對(duì)照組。CRP是一種由肝細(xì)胞分泌的急性時(shí)相反應(yīng)蛋白，其水平越高表示炎癥反應(yīng)和病情越嚴(yán)重，說(shuō)明烏苯美司聯(lián)合組可有效降低炎癥的發(fā)生幾率，改善身體狀況。另外，聯(lián)合組KPS(體質(zhì)功能狀態(tài))評(píng)分和體質(zhì)量改善率、穩(wěn)定率顯著優(yōu)于對(duì)照組，因此烏苯美司可有效改善患者體能狀態(tài)，從而改善患者的生活質(zhì)量。采用烏苯美司治療腫瘤患者，不僅可以增強(qiáng)患者機(jī)體免疫力、改善機(jī)體炎癥狀態(tài)，還可提高患者生活質(zhì)量，可用于輔助治療，有效保證化療進(jìn)程。劉耿淳等[25]探究烏苯美司與替吉奧聯(lián)合放療治療中晚期直腸癌的臨床療效，將患者隨機(jī)分為兩組，兩組患者均給予替吉奧膠囊及放療治療，研究組在上述治療基礎(chǔ)上給予烏苯美司輔助治療。治療后，研究組的生活質(zhì)量評(píng)分與Kamofsky評(píng)分高于參照組；研究組的腎功能損傷、肝功能損傷、胃腸道反應(yīng)、周圍神經(jīng)毒性及骨髓抑制發(fā)生率低于參照組。綜上所述，烏苯美司與替吉奧聯(lián)合治療中晚期直腸癌可提高近期療效，改善免疫功能和生活質(zhì)量，且安全性較高。

2.5 臨床試驗(yàn)進(jìn)展NGR-hTNF是將天冬酰胺-甘氨酸-精氨酸(NGR)的多肽與TNF-α的N末端共軛結(jié)合的偶聯(lián)分子。NGR會(huì)與氨肽酶N(CD13)特異性亞型相互作用進(jìn)而與腫瘤新生血管相結(jié)合，該藥物可使腫瘤的間質(zhì)壓力降低，增加化療藥物的穿透力。NGR-hTNF與順鉑聯(lián)合治療實(shí)體瘤，已進(jìn)入臨床試驗(yàn)階段(編號(hào)：NCT00483093)，但實(shí)驗(yàn)結(jié)果還未公布。除此之外，NGR-hTNF聯(lián)合阿霉素治療軟組織肉瘤和對(duì)鉑類藥物耐藥的卵巢癌均已進(jìn)入Ⅱ期臨床研究(編號(hào)：NCT00484341)。現(xiàn)有靶向治療氨肽酶的臨床應(yīng)用藥物如：馬法蘭(Melphalan)是一種口服的化療藥物，常用于治療多發(fā)性骨髓瘤、乳腺癌、真性紅細(xì)胞增多癥等疾病。Oncopeptides醫(yī)藥公司將馬法蘭與靶向氨肽酶的多肽偶聯(lián)合成制得肽-藥物偶聯(lián)物 Melflufen。該藥物有極強(qiáng)的親脂性能迅速被腫瘤細(xì)胞攝入，由于氨肽酶在眾多腫瘤細(xì)胞中過(guò)表達(dá)，Melflufen一旦進(jìn)入胞內(nèi)，Melflufen的偶聯(lián)肽會(huì)立即被氨肽酶裂解，釋放出馬法蘭，并被截留在細(xì)胞內(nèi)，引起Melflufen的進(jìn)一步流入和裂解，進(jìn)而靶向治療，增強(qiáng)治療效果。在體外實(shí)驗(yàn)中，研究人員發(fā)現(xiàn)Melflufen能顯著提高馬法蘭的胞內(nèi)的濃度，殺傷骨髓瘤細(xì)胞的能力是馬法蘭單獨(dú)用藥的50倍。

3 結(jié)論與展望

氨肽酶抑制劑烏苯美司競(jìng)爭(zhēng)性抑制腫瘤細(xì)胞表面氨基肽酶APN及P-gp和MRP1等膜轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白的表達(dá)，可誘導(dǎo)腫瘤細(xì)胞凋亡，增加細(xì)胞內(nèi)藥物的積累。還通過(guò)抑制自噬的Akt信號(hào)通路，使對(duì)抗癌藥物產(chǎn)生抗性的癌細(xì)胞重獲敏感性，增強(qiáng)化療藥對(duì)腫瘤的細(xì)胞毒性作用。除此之外還可靶向作用于腫瘤干細(xì)胞，促進(jìn)宿主免疫調(diào)節(jié)，增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能。還有不少靶向治療氨肽酶的偶聯(lián)藥物也在臨床試驗(yàn)中，并取得較好的療效評(píng)價(jià)。因此，烏苯美司有著多重抗癌作用。細(xì)胞毒類藥物毒性大，耐受性較差，但殺死腫瘤細(xì)胞作用明顯。由于毒副作用較強(qiáng)，其應(yīng)用受到了一定的限制。將烏苯美司與多種細(xì)胞毒類藥物聯(lián)合用藥發(fā)現(xiàn)可增強(qiáng)抗腫瘤作用，減少不良反應(yīng)的發(fā)生。因此，在未來(lái)的臨床治療中，烏苯美司在聯(lián)合用藥方面有著巨大的潛力。