玖玟枳椇純露對CCl4致小鼠急性肝損傷的預防作用

谷崇高 周亞偉

[摘? ? ? ? ? ?要]? 目的：采用腹腔注射0.12 %的四氯化碳玉米油溶液0.1 mL/10g，造成小鼠急性肝損傷模型，觀察玖玟枳椇純露對四氯化碳致小鼠急性肝損傷的預防作用。方法：60只小鼠隨機分組，分為空白組、模型組、雙環醇片組（200 mg/kg）及玖玟枳椇純露高劑量組（6 g生藥/kg）、中劑量組（3 g生藥/kg）、低劑量組（1.5 g生藥/kg），每組10只，0.2 mL/10g灌胃給藥雙環醇，0.3 mL/10 g灌胃給藥玖玟枳椇純露，每天一次，連續6天，第6天給藥后的8 h進行建模，腹腔注射0.12 %四氯化碳玉米油溶液0.1 mL/10g，建模后禁食15 h，再給藥一次，藥后1 h取血，分離血清測定ALT和AST。結果：與空白組比較，模型組小鼠血清ALT和AST顯著升高。與模型組比較，雙環醇片組和玖玟枳椇純露高劑量組小鼠血清中ALT和AST顯著降低，有效。結論：玖玟枳椇純露具有預防四氯化碳引起小鼠急性肝損傷的作用。

[關? ? 鍵? ?詞]? 玖玟枳椇純露;實驗;預防作用

[中圖分類號]? G642? ? ? ? ? ? ? ? ? ? [文獻標志碼]? A? ? ? ? ? ? ? ? ? [文章編號]? 2096-0603（2021）42-0235-02

一、實驗材料

（一）藥物與試劑

玖玟枳椇純露，規格：10g生藥/50mL，批號：20181125，有效期至：20201125，廠家：山西保仁堂生物科技有限責任公司。

CCl4，規格：500 mL，批號：20181102，有效期至：無，廠家：北京化學試劑廠。

雙環醇片，規格：25 mg/片×18片，批號：20190514，有效期至：2022.04，廠家：北京協和藥廠。

谷草轉氨酶（AST）試劑盒，規格：R1：60 mL×4，R2：60 mL×2，批號：20191127，有效期至：20201126，廠家：中生北控生物科技股份有限公司。

谷丙轉氨酶（ALT）試劑盒，規格：R1：60 mL×4，R2：60 mL×2，批號：20191016，有效期至：20201015，廠家：中生北控生物科技股份有限公司。

（二）實驗動物

昆明種小鼠60只，SPF級，雌雄各半，體重18～22 g。購自斯貝福（北京）生物科技有限公司，許可證號：SCXK（京）2019-0010。

（三）實驗儀器

半自動生化儀，型號：威圖300，廠家：荷蘭威圖公司。

離心機，型號：TDL-5-A，廠家：上海安亭科學儀器廠。

電子天平，型號：DT-500A，廠家：中國輕工業總公司常熟市衡器廠。

分析天平，型號：FAE100，廠家：梅特勒-托利多儀器（上海）有限公司。

二、實驗方法

（一）藥物劑量設置依據

玖玟枳椇純露劑量設置依據

根據藥品說明書，人的臨床用量：2瓶/日，即100 mL/日。計算出人臨床劑量為：20 g生藥/70 kg=0.3 g生藥/kg。

根據《中藥新藥研究指南》中規定，小鼠劑量為人臨床量的5～20倍。所以小鼠采用人臨床劑量的20倍，10倍，5倍設置為高，中，低劑量組，因此，高劑量為0.3 g生藥/kg×20=6 g生藥/kg，中劑量為3 g生藥/kg，低劑量為1.5 g生藥/kg。

（二）實驗方法

取清潔級昆明種小鼠60只，雌雄各半，體重18～22 g，隨機分為空白對照組、模型對照（CCl4）組、雙環醇片（200 mg/kg）組、玖玟枳椇純露高（6 g生藥/kg）、中（3 g生藥/kg）、低（1.5 g生藥/kg）劑量組，共6組，每組10只。每天按照0.2 mL/10 g灌胃相應受試物，空白組和模型組灌胃相應體積蒸餾水。給藥第6天給藥后8 h，除空白對照組外，其余各組小鼠按0.1 mL/10 g體積腹腔注射0.12 %的CCl4玉米油溶液造模，空白組給相應體積生理鹽水，造模后禁食不禁水，造模后15 h進行末次給藥，給藥后1 h后眼眶取血，血液靜置30 min，在3000 r/min離心15 min，取上清測定血清ALT、AST酶的含量。

（三）測定方法

1.試劑準備

雙液體試劑，使用前室溫穩定30min。

2.檢測步驟

（1）基本操作步驟：（如下表1）

（2）用威圖300半自動生化儀測定：開機→清洗→試劑空白→校準→質控→樣品檢測。

（3）校準：建議使用試劑盒配套的校準品，使用線性法校準，校準周期為2天。

（4）檢測結果的計算：生化分析儀會自動給出檢測結果。

（四）統計學方法

數據以均數±標準差（x±SD）表示，方差齊性檢驗運用F檢驗，組間比較運用t檢驗或方差分析。

與空白組比較，模型組小鼠血清中ALT顯著升高，與模型組比較，雙環醇片組小鼠血清中ALT顯著降低。與模型組比較，玖玟枳椇純露高、中、低劑量組小鼠血清中ALT顯著降低。

與空白組比較，模型組小鼠血清中AST顯著升高，與模型組比較，雙環醇片組小鼠血清中AST顯著降低。與模型組比較，玖玟枳椇純露高、中、低劑量組小鼠血清中AST顯著降低。

三、結論

玖玟枳椇純露具有預防四氯化碳引起小鼠急性肝損傷的作用。

參考文獻：

[1]邢彥超，鄭彧，劉刈，等.大棗多糖與柴胡疏肝散聯用對四氯化碳所致小鼠急性肝損傷治療作用[J].遼寧中醫藥大學學報，2016（11）：29-31.

[2]胡恒龍，馬連虎.D-氨基半乳糖誘導肝損傷的過氧化機理和鋅的保護作用[J].中國藥理學與毒理學雜志，1993，7（2）：81-86.

[3]黎旸，李瑾翡，蔣忠軍，等.CCl4致小鼠急性肝損傷模型的研究[J].熱帶醫學雜志，2010，10（6）.

[4]張倩，游云.聯苯雙酯的藥理作用機制研究綜述[J].中國藥物評價，2017（4）.

[5]胡鳳嬌，宋文杰，王張，等.四氯化碳致小鼠急性肝損傷模型造模要素及中醫藥防治的數據挖掘研究[J].中藥與臨床，2018，9（5）：38-41+48.

[6]時濤，王曉玲，陳振德，等.枳椇子化學成分及其藥理活性研究進展[J].中藥材，2006，29（5）：510-513.

[7]徐博，田晶，馬寧，等.肝損傷動物模型的研究進展[J].中國當代醫藥，2019（14）.

◎編輯 張 慧