規模化豬場豬水皰性口炎的防治措施分析

宋玉梅

（昌樂縣畜牧業發展中心山東濰坊262410）

我國是全球最大的養豬國，肉豬出欄量穩居世界第一，幾乎占全球一半的市場份額。面對高額的豬肉消費市場，傳統養豬業已經遠遠滿足不了市場需求，只能走規模化養殖之路。尤其是進入21世紀以來，國內大量的規模化養殖場不斷涌現，年出欄量十萬頭以上的豬場比比皆是，并在近幾年達到高峰。在這種規模化養殖模式下，豬的飼養密度極高，一旦出現大規模的疫病暴發帶來的損失無疑是巨大的，因此疫病防控成為重中之重，尤其是高度傳染性疾病。本文所分析的豬水皰性口炎即是這種一類急性傳染病，本病是由水皰性口炎病毒引起，呈高度接觸性傳染。臨床上以舌、唇、口腔黏膜、乳頭和蹄冠等處發生水皰為主要特征。本病發病率和死亡率較低，但由于檢疫、貿易限制和降低飼料轉化率而導致經濟損失。本病在全球主要養豬國家都有出現，世界動物衛生組織（OIE）將本病列為必須通報疫病。鑒于國內近年來大規模的引種，更應該保持足夠的警惕和重視，做好防控。

1 病原

水皰性口炎病毒（vesicular stomatitis virus，VSV）為彈狀病毒科水皰病毒屬成員，病毒粒子為子彈狀或圓柱狀。病毒囊膜上均勻密布有長約10nm的纖突。VSV基因組為不分節段的單股負鏈RNA，長約11kb，分別編碼核蛋白（N），磷酸蛋白（P）、基質蛋白（M）、糖蛋白（G）及RNA聚合酶（L）等5種主要病毒蛋白。

根據中和試驗和補體結合試驗，本病毒分為2個血清型，其代表株分別為印第安納（Indiana，IN）型和新澤西（New Jersey，NJ）型。根據抗原交叉反應性，印第安納型又分為3個亞型，分別為IN1、IN2（Coral）和IN3（Ala-goas）。根據病毒核酸酶指紋圖譜和毒株間的進化關系，新澤西型至少分為3個亞型[1]。

本病毒在大多數脊椎動物、鳥類、爬行動物、魚類及昆蟲的細胞培養上可以生長。VSV感染脊椎動物細胞后，18～24h即可引起細胞快速萎縮，脫落，在動物的單層原代腎細胞產生不同大小的蝕斑。而感染昆蟲細胞則引起持續性感染，無細胞病變。

本病毒對理化因子的抵抗力與口蹄疫病毒（FMDV）相似，56℃30min、可見光、紫外線及脂溶劑（乙醚、氯仿）都能使其滅活。該病毒可在土壤中于4～6℃時存活若干天。0.05%結晶紫可使其失去感染性，不耐酸。

2 流行病學

患病動物和感染動物是傳染源，病毒主要存在于感染動物的鼻、口、舌、冠狀帶和乳頭。血液和尿液里沒有發現病毒，糞便中罕見，但唾液和水皰液中含有大量病毒。臨床癥狀出現后直到第10天，在上皮樣品和口咽液里還能發現病毒。病毒主要通過接觸損傷的呼吸道和消化道黏膜而傳染。雙翅目昆蟲可充當傳播媒介。本病主要侵害家豬和野豬。此外，牛、馬、鹿、刺猬、雪貂、豚鼠、倉鼠、小鼠、雞都易感染。綿羊、山羊、犬和兔不易感染該病，發病率和死亡率都較低。

VSV感染人類引起感冒樣癥狀，如發燒、肌痛和嚴重頭痛。

3 主要癥狀與病理變化

本病潛伏期一般2～5d不等。豬最初的癥狀為體溫升高（達40～41℃），倦怠、食欲不振和流涎增多。感染后3～4d口腔（主要是舌部）和鼻端先發生水皰，食欲減退，磨牙，流涎，水皰很易破裂。此期非常短，隨后表皮脫落留下糜爛和潰瘍，體溫也在幾天內恢復正常。隨之蹄冠和趾間發生水皰，不久破裂而形成痂塊，蹄冠水皰病灶擴大則可使蹄殼脫落。病程約2周，轉歸良好，病灶不留痕跡[2]。

組織病理學上，VSV水皰病變從棘層開始，伴有細胞間的水腫和微皰，接著棘層松解。在水皰早期，上皮細胞通過細胞間的橋粒連接在一起，形成網狀的結構。后來，出現感染的、死亡的角質化細胞和嚴重的炎癥細胞浸潤，大多是中性粒細胞。病變很少侵害到基底層，基底層上層分離，微皰合并，水皰液蓄積、充滿水皰。

4 診斷要點

4.1 一般診斷

由于本病多發生在夏季和秋初，有明顯的季節性，發病率和死亡率低，以及發病動物在舌面、鼻端和唇部上皮發生水皰，并伴隨食量減少和流涎，隨后蹄冠部、趾間發生水皰，以蹄冠部尤為嚴重，感染后的動物大約2周后轉歸良好。這些臨床特征可作為初步診斷本病的依據。

4.2 病原學診斷

1）病毒分離鑒定：①樣品采集，水皰液、水皰皮及水皰拭子是病原分離的最佳樣品。但是，在樣品采集過程中，要注意人員的安全，避免感染；②分離的細胞可采用Vero細胞、BHK-21細胞和IBRS-2細胞。本病毒能在這三種細胞中產生病變。接種后24h后將含細胞的玻片取出，做免疫熒光試驗。其他已接種的細胞繼續培養，觀察細胞病變，第7天時作免疫熒光檢測。細胞病變與熒光檢測均為陽性時方能判定病料含有病毒。其他類癥病毒，如口蹄疫病毒能在BHK-21細胞和IBRS-2細胞中產生病變，而SVD卻只能在IBRS-2細胞中出現細胞病變。病毒分離也可以用8～10日齡雞胚卵黃囊接種或用2～7日齡未斷乳的小鼠進行。

2）病毒中和試驗：按照常規，將病毒與標準血清作用后，接種細胞或動物，觀察細胞是否有病變或動物是否有癥狀。

3）ELISA檢測抗原：根據使用血清的特性，本法能檢測所有血清型的病毒，也可以進行病毒血清型的鑒定。

4）分子生物學診斷：已建立RT-PCR檢測VSV，也有利用多重RT-PCR快速鑒別豬口蹄疫病毒、豬水皰病毒和豬水皰性口炎病毒。RT-PCR技術不但能準確檢測VSV，還可區別VSV的兩種血清型。近年來，還有基因芯片和實時定量RT-PCR用于該病毒檢測的報道。

4.3 血清學診斷

1）補體結合試驗：可用于檢出動物感染4～5d產生的特異性抗體，能用于疫病的早期檢測。本法是國際貿易指定試驗之一。

2）血清中和試驗：待檢血清經56℃滅活30min，再與1,000個TC ID50的病毒混合，接種Ve ro細胞和IBRS-2細胞。如沒有出現病變，即可認為獲得保護，血清為陽性。本法也是國際貿易指定試驗。

3）ELISA：OIE推薦使用液相阻斷ELISA方法，用病毒糖蛋白為抗原，可降低非特異性反應。

5 防治措施

目前，我國還沒有該病的豬用疫苗，主要依靠綜合性預防措施，包括加強入境口岸及國內流通領域的檢疫以防止帶毒豬的流動，嚴格檢疫和淘汰帶毒豬，制定并執行科學合理的免疫程序，改善豬舍環境衛生及飼養管理，防止豬發生皮膚外傷導致感染，加強生物安全措施等。一旦發病，及時隔離病豬或可疑病豬，封鎖疫點，加強消毒，對病豬進行撲殺與無害化處理。用2%～4%氫氧化鈉溶液、10%石灰乳、0.2%～0.5%過氧乙酸等消毒液進行消毒。封鎖14d后，如果沒有新的病畜出現，通過終末消毒后，可按規定解除隔離封鎖。

6 診療注意事項

本病應該注意與豬口蹄疫、豬水皰病和豬水皰疹等疾病相區分。主要是從感染宿主動物的種類、接種細胞后發生病變的細胞種類以及引起實驗小鼠死亡的日齡進行區分。必要時，對部分重要基因進行PCR擴增和序列分析，可以達到確診的目的。█