基于健康體檢人群檢驗大數據建立血清尿素、肌酐參考區間*

李雪文，王藝婷，何冰，徐攀洋，許建成（吉林大學第一醫院檢驗科，長春130021）

血清尿素、肌酐是腎臟功能檢查的重要指標，準確的參考區間對相關疾病的早期診治具有重要意義。目前我國行標WS／T 404.5—2015［1］使用直接法建立了血清尿素、肌酐參考區間。美國臨床和實驗室標準協會（Clinical and Laboratory Standards Institute，CLSI）和國際臨床化學聯合會（International Federation of Clinical Chemistry and Labortory Medicine，IFCC）將直接法作為建立參考區間的“金標準”［2］。然而直接法過程復雜、耗時長、需大量人力物力。近年來間接法［3］憑借成本低、操作簡便的優勢被廣泛使用［4-6］。本研究基于本院實驗室信息管理系統（LIS）中數據，運用間接法建立適于本院的血清尿素、肌酐參考區間，并與行標中參考區間比較，探討間接法建立參考區間的可行性。

1 對象與方法

1.1 研究對象 2019年1月至12月吉林大學第一醫院體檢中心體檢者，年齡20～79歲，符合WS／T 404.5—2015體格檢查要求：（1）自覺健康；（2）無急性或慢性疾病；（3）6月內未進行手術，4個月內未獻血、輸血或大量失血；（4）女性未處于妊娠或哺乳期；（5）近期無劇烈運動或重體力勞動；（6）無營養不良、素食、酗酒、嗜煙。實驗室排除標準：（1）丙氨酸氨基轉移酶＞80 U／L；（2）總膽固醇≥6.22 mmol／L；（3）三酰甘油≥2.26 mmol／L；（4）空腹血糖≥7.0 mmol／L；（5）尿酸＞475μmol／L；（6）血紅蛋白：男性＜120 g／L；女性＜110 g／L；（7）HBsAg陽性、抗HCV陽性、抗HIV陽性；（8）尿液檢查：尿蛋白、尿糖任一項陽性。

1.2 主要儀器與試劑 7600-210全自動生化分析儀（日立公司）；尿酸、肌酐試劑及標準品（四川邁克公司），質控品（伯樂公司）。

1.3 標本采集與檢測 于7：30至9：30采集肘靜脈血4 mL于真空采血管中，剔除溶血、黃疸等不合格標本，常溫送至檢驗科，1 200×g離心10 min，檢測尿酸、肌酐。7600-210全自動生化分析儀每年均參加國家衛生健康委臨床檢驗中心室間質評，2019—2020年均進行精密度、分析測量范圍、臨床可報告范圍、攜帶污染等檢測系統性能驗證，且符合實驗室ISO15189質量體系要求。

1.4 統計學方法 本研究使用SPSS22.0、LMS chartmaker Light 2.54、Excel 2007軟件。偏度－峰度值檢驗數據正態性；自然對數將非正態數據轉換為正態或近似正態分布；“Stem-and-Leaf＆Box Plots”剔除離群值；Z檢驗分析性別間差異，Z＞Z*為差異有統計學意義；Kruskal-Wallis H檢驗分析各年齡組間差異，P＜0.05為差異有統計學意義；偏度系數－中位數－變異系數（LMS）法擬合連續百分位數曲線分析血清尿素、肌酐隨年齡的變化趨勢；非參數法計算P2.5、P97.5，作為參考區間上下限。

1.5 適用性驗證及比較 選取2020年1月至12月吉林大學第一醫院健康體檢者作為參考個體，年齡范圍為20～79歲。體檢者血清尿素、肌酐檢測結果剔除離群值后按本研究建立的參考區間分組，將檢測值范圍與本研究參考區間進行比較。若≥95%檢測值包含在本研究參考區間之內，則證明本研究建立的參考區間適用于本院人群。將已建立的參考區間與行標WS／T 404.5—2015進行比較。

2 結果

2.1 血清尿素、肌酐參考區間的建立 數據經偏度－峰度值檢驗呈偏態分布，運用自然對數轉換為近似正態分布。正態轉換及剔除前后數據見表1。最終納入79 025例體檢者，其中男性40 891例，女性38 134例，年齡范圍為20～79歲。10歲為一年齡組將數據分為6組。血清尿素、肌酐性別間差異有統計學意義（Z＞Z*）。血清尿素男性與女性LMS曲線50歲起呈明顯上升趨勢，見圖1。血清肌酐男性與女性LMS曲線60歲起呈明顯上升趨勢，見圖2。20～49歲與50～79歲間血清尿素差異有統計學意義（P＜0.05），20～59歲與60～79歲間血清肌酐差異有統計學意義（P＜0.05）。分組建立血清尿素、肌酐參考區間，見表2。血清尿素在50歲前后存在差異，與行標WS／T 404.5—2015中不同。血清肌酐參考區間與行標差異不大。

表1 血清尿素、肌酐正態轉換及剔除前后數據對比

表2 參考區間的比較

圖1 血清尿素連續百分位數曲線

圖2 血清肌酐連續百分位數曲線

2.2 適用性驗證及比較 剔除離群值后進行區間驗證的健康參考個體共57 675例，其中男性29 808例，女性27 867例，年齡范圍為20～79歲。按區間分組后，各組均有＞95%的檢測值落在本研究參考區間內，見表3。

表3 參考區間的驗證

3 討論

我國行標已運用直接法建立血清尿素、肌酐的參考區間，然而由于民族、地理環境的差異等，行標中的參考區間可能并不適用于本醫院就診人群。由于直接法建立參考區間成本過于高昂，且耗時過長，本研究選用成本低，操作簡便的間接法建立血清尿素、肌酐參考區間。

3.1 參考區間的建立 行標WS／T 402—2012［7］中推薦Dixon法剔除離群值，但本研究數據量較大，易產生離群值的掩蓋效應。因此本研究選用“Stem-and-Leaf＆Box Plots”剔除離群值，將≥3倍四分位數間距的數值視為離群值。各年齡段性別間兩兩比較選用Z檢驗的方法，此方法前提是數據呈正態或近似分布，偏態數據會造成檢驗誤差。

3.2 適用性驗證及比較 本研究運用2020年數據進行參考區間的驗證，且將標準定為95%，此方法樣本量足夠大，可信度高。血清尿素、肌酐均存在性別差異，這與行標以及國外研究［8-9］一致。隨著年齡增長，血清尿素、肌酐存在一定的變化趨勢，這可能是隨著人體衰老，腎功能下降的原因［10］。本研究所建立參考區間與行標存在較小差異，這可能是因為本研究基于健康體檢人群檢驗大數據建立參考區間非國際推薦方法，與行標中直接法不同而導致，也不排除由人群或地區的差異所致。

本研究的局限性在于研究對象為20歲以上人群，針對兒童這一群體有待進一步研究。

綜上所述，本研究通過間接法建立的參考區間準確可靠，適用于本醫院，與行標中直接法建立的參考區間相比差異不顯著。間接法建立參考區間耗時短、成本低、準確度高，值得推廣。