系統(tǒng)性紅斑狼瘡病人外周血CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞水平的臨床檢驗意義

文 /秦妮芳

在臨床中，對于系統(tǒng)性紅斑狼瘡（SLE）而言，其是十分普遍的免疫性疾病，生成自身抗體、各個炎癥細(xì)胞發(fā)生浸潤等均是其有關(guān)的病理變化，免疫性異常是引發(fā)SLE最為關(guān)鍵的原因[1]。SLE患者具有許多免疫調(diào)節(jié)機(jī)制方面的異常，而其中，由自然殺傷細(xì)胞（NK）所生成的固有免疫最為普遍。在NK細(xì)胞的表面具有許多非特異性抗原受體，能夠辨別并殺傷各類病毒感染細(xì)胞；其極有可能可以引導(dǎo)免疫耐受缺失而引發(fā)組織病理損害，進(jìn)而參與到SLE發(fā)生的這一整個過程中。所以，分析并研究NK細(xì)胞所發(fā)生的改變，加之其與SLE發(fā)生、進(jìn)展間所具有的關(guān)聯(lián)性是十分關(guān)鍵的[2]。本研究特選取本院88例SLE患者，分析并研究外周血CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞的應(yīng)用效果與價值。

1 對象及方法

1.1 對象

摘選2018年3月-2020年4月期間，我院接收的SLE病例88例，同時，在同一段時間中，摘選我院的健康體檢者54例，把其作為對照組，對其就外周血CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞進(jìn)行檢測。對照組：男、女依次是31例、23例；年齡范圍于19歲-64歲，平均（36.80±5.11）歲。SLE組：男、女依次是23例、65例；年齡范圍于21歲-66歲，平均（43.16±6.02）歲；參照SLE疾病活動性指數(shù)（SLEDAI）評分，獲活動組（共33例）、非活動組（共55例）；參照腎功能檢測評判腎臟受累，獲狼瘡性腎炎（LN）組（共27例）、非LN組（共61例）。對比2組的一般資料后差異無統(tǒng)計學(xué)意義，（P＞0.05）。

1.2 方法

患者在住院后，對其各項資料進(jìn)行收集，同時，輔助其就尿常規(guī)、血常規(guī)等進(jìn)行檢測，借助SLEDAI對其病情進(jìn)行評估。同時，對患者的外周靜脈血液進(jìn)行采集，共3mL，放至EDTA-K2型抗凝管，在進(jìn)行搖勻后，處于室溫下進(jìn)行儲存，并借助流式細(xì)胞儀（型號即BD FACS Calibur）與有關(guān)的試劑對CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞總數(shù)、比例等進(jìn)行檢測。把50μL的全血標(biāo)本放至BD Trucount型絕對計數(shù)管，并標(biāo)識成管1、管2，對細(xì)胞總數(shù)進(jìn)行調(diào)節(jié)，即1×107/mL，在管1加20uLCD4-APC、CD45-PerCP、CD3-FITC、CD8-PE，在管2加20uLCD（16+56）-PE、CD3FITC、CD45-PerCP、CD19-APC，在進(jìn)行混勻后，處于20℃-25℃中，進(jìn)行15min的避光反應(yīng)，兩管加10倍稀釋后的BD Multitest IMK kit型溶血素，共450μL，在進(jìn)行搖勻后，應(yīng)用以上各項條件進(jìn)行15min的孵育，之后，對樣本進(jìn)行上機(jī)檢測，并應(yīng)用BD Multiset型軟件獲得有關(guān)的數(shù)據(jù)，對其CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞、總百分率進(jìn)行檢測。

1.3 觀察指標(biāo)

檢測后，比較所得的CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞、總百分率、SLEDAI評分、24h尿蛋白定量。

1.4 數(shù)據(jù)分析處理

將本文數(shù)據(jù)一律輸入SPSS22.0這個軟件中統(tǒng)計處理，CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞、總百分率、SLEDAI評分、24h尿蛋白定量一律用（）來表示，組間差異性選擇t檢驗，當(dāng)P＜0.05時說明組間對比有意義。

2 結(jié)果

2.1 SLE組與對照組CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞

SLE組的CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞、總百分率依次是（163.69±42.04）個/μL、（9.56±1.25）%，較之于對照組依次是（355.38±81.75）個/μL、（13.80±1.17）%低，P＜0.05。

2.2 活動組與非活動組CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞

活動組的CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞、總百分率依次是（130.45±29.87）個/μL、（8.14±1.08）%，較之于非活動組依次是（177.93±7.16）個/μL、（9.79±1.52）%低，而其SLEDAI評分、24h 尿蛋白定量依次是（6.45±1.30）分、（1.46±0.02）g/天，較之于非活動組依次是（3.28±1.89）分、（0.63±0.09）g/天高，P＜0.05。

2.3 LN組與非LN組CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞

LN組的CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞、總百分率依次是（109.06±22.74）個/μL、（7.95±1.03）%，較之于非LN組依次是（183.58±47.09）個 /μL、（9.27±1.68）% 低，而其 SLEDAI評分、24h尿蛋白定量依次是（7.46±1.97）分、（1.58±0.04）g/天，較之于非LN組依次是（2.72±1.03）分（、0.17±0.01）g/天高，P＜0.05。

3 討論

SLE患者會出現(xiàn)免疫調(diào)節(jié)失衡，大多都會累及到免疫系統(tǒng)，在臨床中對各類自身抗體進(jìn)行分析與研究后，T淋巴細(xì)胞、B淋巴細(xì)胞等對于SLE所具有的作用已經(jīng)得到明確，而其中，B淋巴細(xì)胞所生成的自身抗體是引發(fā)SLE最為核心的因素，而T淋巴細(xì)胞能夠全方位地發(fā)揮出免疫調(diào)節(jié)功能，對B細(xì)胞帶來刺激，讓其發(fā)生活化、增殖等，同時，其還參與到細(xì)胞免疫[3]。對于NK細(xì)胞而言，其與SLE 間也緊密相連；其十分關(guān)鍵的生理功能是自然防御、免疫調(diào)節(jié)，是第三大類淋巴細(xì)胞譜系，可以借助主要組織相容性復(fù)合體Ⅰ類（MHC-Ⅰ）分子對各個靶細(xì)胞進(jìn)行辨別、清除；同時，NK細(xì)胞對于許多感染性疾病、免疫性疾病均發(fā)揮出了十分關(guān)鍵的作用。

在本次研究中，對SLE患者就CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞進(jìn)行檢測，SLE組的CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞、總百分率較之于對照組低。P＜0.05；分析其原因，即：NK細(xì)胞會朝靶器官發(fā)生聚集，并使得機(jī)體對自身抗體無法進(jìn)行抑制，這是由于處于活動期中的SLE患者機(jī)體中具有更多的自身抗體、循環(huán)免疫復(fù)合物，所以，NK細(xì)胞免疫調(diào)節(jié)對于SLE發(fā)揮出了十分關(guān)鍵的作用[4]。對于SLEDAI評分而言，其是參照患者的各項表現(xiàn)與癥狀、實驗室檢測對病情進(jìn)行評判，進(jìn)而給選取激素、免疫抑制劑等給予更多的參照[5]。在本次研究中，活動組的CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞、總百分率較之于非活動組低，而其SLEDAI評分較之于非活動組高，P＜0.05；由此證明，在對NK細(xì)胞進(jìn)行檢測后，能夠?qū)LE患者的病情進(jìn)行評估；同時，活動組的24h尿蛋白定量較之于非活動組高，P＜0.05；由此證明，處于活動期中的SLE患者會出現(xiàn)十分嚴(yán)重的腎臟損害。在SLE患者的病情逐步出現(xiàn)進(jìn)展后，會使得許多器官受到損傷，而其中，LN是十分普遍的并發(fā)癥，其極有可能與各類免疫復(fù)合物在腎小球濾過膜中發(fā)生沉積、各類干擾素有所上升間緊密相連[6]。另外，SLE患者發(fā)生腎功能受損的總程度與淋巴細(xì)胞浸潤間緊密相連，在CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞得到激活后，會釋放出許多干擾素、細(xì)胞毒顆粒，進(jìn)而引發(fā)了腎功能損害。在本次研究中，LN組的CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞、總百分率較之于非LN組低，而其SLEDAI評分、24h尿蛋白定量較之于非LN組高，P＜0.05；由此證明，在NK細(xì)胞逐步下降后， SLE患者會出現(xiàn)愈加嚴(yán)重的腎功能損害。有研究人員指出，對于MRL/lpr狼瘡樣小鼠而言，在其腎臟中，具有許多NK細(xì)胞、干擾素等，引發(fā)了腎臟組織損傷，且在病情愈加嚴(yán)重后，干擾素有所增多，而NK細(xì)胞有所下降，這是由于細(xì)胞因子會使得NK細(xì)胞發(fā)生凋亡，所以，在對NK細(xì)胞進(jìn)行檢測后，對于評判SLE患者所出現(xiàn)的腎功能損害是十分關(guān)鍵的，臨床中需要更為關(guān)注到。對于NK細(xì)胞而言，其在適應(yīng)性免疫調(diào)節(jié)中也具有十分關(guān)鍵的地位，且SLE是與許多免疫功能性異常間緊密相連的，所以，臨床中需要更為關(guān)注對NK細(xì)胞與T淋巴細(xì)胞、自身抗體、細(xì)胞因子等所具有的關(guān)聯(lián)性進(jìn)行分析與研究，以確定NK細(xì)胞對于SLE所具有的作用。

綜上所述，SLE患者具有更少的外周血CD3~-CD16~+CD56~+NK細(xì)胞，在全方位掌握其具體的情況后，能夠給評判患者的病情、腎功能損害等給予更多的參照。