血管內皮生長因子在急性髓系白血病患者中的表達水平分析

馮硯平 王 楠 王偉佳 廣東省中山市人民醫院 528400

白血病是一類造血干細胞惡性克隆性疾病，是因患者的克隆性干細胞繁殖、分裂及凋亡通路受到阻礙，進而導致大部分惡性繁殖的白血病造血干細胞會集于患者骨髓及各種造血系統中[1-2]。急性髓細胞性白血病為白血病細胞分型中的一個種類，AML主要根據骨髓造血干細胞嚴重繁殖，其特點為骨髓和外周血中的原始細胞與稚嫩細胞異常增殖[3-4]。臨床表現為不同程度的貧血、口腔出血、胸悶痛、感染、乏力、發熱伴咳嗽、骨骼疼痛等。近幾年來，流行病學研究表明，在白血病系列中AML的患病率約為30%，0～6歲的幼小兒童群體也是高發人群，而且患病后惡性程度高于其他白血病類型，主要表現為存活期(5年左右)比其他類型的白血病患者低[5]。目前，治療AML的難度仍然極大，學者們對AML的重視度也越來越高，關于AML的發病機制也在持續的深入研究。大量研究證實，人體機體血管再生能力及細胞凋亡能力與AML患病具有相關性[6-7]。而VEGF為擁有象征性的可控制機體血管新生與細胞凋亡的蛋白質生物標志物，其表達水平變化可體現患者機體內的新生血管能力與細胞凋亡能力。因此，本文篩選我院收治的197例AML患者為觀察對象，分析VEGF在AML患者中的水平表達情況，期望能給白血病的發病機制提供新的調查方向，具體如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 篩選本院在2017年7月—2019年11月期間收治的197例AML患者作為研究組，男93例，女104例；年齡5～87歲，平均年齡(48.77±19.10)歲；急性白血病的FAB分型：M1型33例，M2型89例，M3型42例，M4型24例，M5型9例。納入標準：(1)根據急性髓系白血病治療的專家共識(第一部分)的判斷標準及臨床檢查診斷為AML者；(2)患者及家屬知情同意并簽署知情同意書；(3)經本院倫理委員會批準同意。排除標準：(1)檢查判斷不是AML者；(2)患者為孕婦或正處于乳期婦女；(3)合并器質性疾病、惡性腫瘤疾病者；(4)正處于有關藥物治療者。同時另抽取本院行健康體檢的60例受試者為參照組。其中男34例，女26例；年齡12～70歲，平均年齡(48.67±18.33)歲。對比研究組與對照組的一般資料，差異無統計學意義(P>0.05)。

1.2 檢測方法 將所有患者進行VEGF水平檢測，抽取每例患者的空腹靜脈血大約5ml，然后加入經過抗凝劑處理過的抗凝管中混合，使用TG12M型毛細管血液離心機(北京亞態科技有限公司)進行離心，轉速為3 000r/min，離心10min(半徑為13.5cm)，分離獲得血清后，將患者的血清用ELISA法展開檢測VEGF表達水平，ELISA檢測試劑盒在上海晶抗生物工程有限公司購買，根據試劑盒的操作說明進行測定血清。研究組根據標準化治療2個療程，1個療程為28d，再次抽取患者的空腹靜脈血進行VEGF水平檢測。

1.3 觀察指標 (1)統計兩組(研究組、參照組)入院時VEGF水平，然后進行比較。(2)研究組經過治療后，根據療效判斷標準進行評估療效，將不同的治療效果分為完全緩解組(n=78)、部分緩解組(n=86)、未緩解組(n=33)。對比三組VEGF水平。

1.4 療效判斷標準 完全緩解組：骨髓象細胞學檢查：原顆粒細胞Ⅰ型與Ⅱ型的總和≤5%，并且紅血球(RBC)與巨核細胞正常。血常規檢查：血紅蛋白(HGB)水平在11.0～15.0g/dl之間，血小板水平在(100～300)×109個/L之間，中性粒細胞在(1.80～6.30)×109/L之間，并且患者外周血分類不存在白血病細胞，無侵潤內臟器官造成的臨床癥狀和特征，患者可正常生活或靠近正常納入完全緩解組。部分緩解組：原幼稚細胞于5%～20%之間；或者臨床癥狀、特征及血常規檢查中有一項未達到以上要求納入部分緩解組。未緩解組：骨髓象細胞學檢查、血常規檢查、臨床癥狀和特征均未達到以上標準納入未緩解組。然后對比3組的VEGF水平。

2 結果

2.1 研究組、參照組治療前的VEGF水平對比 治療前，研究組VEGF水平為(328.79±47.32)pg/ml，明顯高于參照組的(131.11±21.70)pg/ml，差異有統計學意義(t=31.34，P<0.05)。

2.2 治療后研究組不同治療效果的VEGF水平對比 單因素方差分析總體VEGF水平差異均有統計學意義(P<0.05)。多重對比分析，研究組治療后，完全緩解組VEGF水平為(169.60±28.11)pg/ml，部分緩解組為(210.28±31.70)pg/ml，未緩解組為(299.81±36.22)pg/ml，三組比較差異有統計學意義(F=189.55，P<0.05)，而且完全緩解組VEGF水平低于部分緩解組，差異有統計學意義(P<0.05)。

3 討論

急性髓細胞白血病的惡性程度高于其他類型的白血病，發病急促，而且病情發展快速，給臨床治療造成極大的困難，致使學者們對AML進行更深入的調查研究，其發病機制也越來越清晰[8-9]。經過對人體的一部分生物標志物、生長因子進行研究測定，初步了解到AML患者機體內的造血干細胞異常凋亡的受阻過程，此外，再生血管持續增生提高了該細胞的營養供應，給其異常增殖帶來了有利條件，進而導致患者的造血系統受到損害[9-10]。隨不斷深入研究顯示，AML患者機體內的造血干細胞異常繁殖與凋亡時存在各種各樣的生物因子介入[11]。檢測VEGF是醫院評估AML患者新生血管產生的重要蛋白質生物標志物。所以，檢測AML患者的蛋白VEGF水平，針對AML的發病機制研究及判斷病情、預后具有重要意義[12]。

本研究通過對AML患者與健康受試者的VEGF水平檢測比較，結果顯示，研究組的VEGF水平明顯比參照組高，提示造成AML或許和患者機體內的VEGF水平相關。研究組通過標準化治療2個周期后，完全緩解組與部分緩解組的VEGF表達水平明顯低于未緩解組，而且完全緩解組VEGF水平低于部分緩解組，提示AML患者的VEGF表達水平變化和患者預后療效具有明顯的相關性。隨患者的病情改善，VEGF水平隨之下降。分析其原因是由于VEGF為一種具有高度特異性促血管內皮生長因子，經酪氨酸激酶受體達到目的，進一步提升血管通透性、細胞外基質性、血管內皮增生、遷移及血管產生[13]。VEGF表達水平上升，能夠激發白血病患者的惡性血液腫瘤細胞間接分裂加速反應，同時使造血干細胞進一步自我調節，給惡性造血干細胞異常增生持續提供增生時需要的營養，進而導致AML快速進展。依照上述研究成果，提示治療AML患者能夠使用VEGF抑制劑實施治療，以供廣大AML患者治療研究新方向[14]。

綜上所述，VEGF水平在AML患者中呈顯著性表達，隨患者的病情得到改善，VEGF水平表達持續下降，所以對AML的診斷、預后療效評價具有臨床應用的意義。