陰道分泌物檢測方法的研究進展

李治清

（武鳴區婦幼保健院，廣西 南寧，530199）

陰道炎/陰道病是婦科常見病、多發病，近年來，隨著生活壓力不斷增加，女性陰道病患病率也隨之上升，因女性的特殊生理結構，極易遭受病原微生物的感染，常見包括細菌、病菌、霉菌、衣原體、支原體等感染，促使外陰引起灼痛、瘙癢等臨床癥狀，嚴重時可造成不孕不育，對患者及其家庭帶來極大程度的影響[1]。陰道病誘發因素較多，且極易復發，故盡早診斷、治療至關重要。目前針對陰道病患者，臨床多對患者陰道分泌物進行檢測。陰道分泌物主要是女性生殖系統分泌的液體，因正常婦女陰道中存在乳酸桿菌可酵解而引起乳酸，陰道內pH 值保持在3.8～4.4 之間，在此環境可有效抑制細菌生長、繁殖，以此達到自凈功能，一旦機體防御機能遭受破壞，則極易引發病原菌感染，故對陰道分泌物進行檢測至關重要[2-3]。陰道分泌物存在多種實驗室檢測技術，本文主要介紹各檢測技術的方式與特點，以便選擇有效、精準的方式檢測、診斷疾病。

1.直接涂片法

陰道分泌物最常見、最傳統的檢測方式是濕片懸滴法與改進后效果更為顯著的甲苯胺藍鹽水、稀堿、加熱三步法，以及超高倍鏡檢測法[4]。上述檢測方式具有操作簡便、經濟、精準等優點，在一張涂片上能夠同時進行真菌、滴蟲、白細胞等多項常規檢測，適用于基層醫療單位與初診、體檢篩查等，檢測溫度環境一般為25～42℃[5]。但該檢測方式存在一定的局限性，對醫師要求較高，受標本、檢測次數等多種因素影響，可能獲得不同的結果；同一患者因不同醫師取材，也可能獲取不同結果，故采取上述檢測方式也存在一定的漏檢率、誤診率[6]。

2.染色法

染色法檢測靈敏度較直接涂片法高，具有能夠在1 張涂片上同時實施多項檢測，且不受保溫措施限制，污染程度較小，具有準確、操作方式簡便、檢出率高等優點。其中包括革蘭染色、白帶多功能染色（BTR）、多項檢測迅速染色技術（CTB）等。

2.1 革蘭染色

革蘭染色檢測具有操作方式簡便、用時短、費用低等優點，在臨床已得到廣泛應用。多項研究顯示，革蘭染色法能夠顯著提升陰道分泌物真菌檢測的檢出率，效果較佳。在對真菌進行檢驗過程中，革蘭染色法還可對淋球菌、加德納菌等致病菌進行檢測，具有一定的敏感性[7]。肖征、章京楠、曹正[8]等人研究顯示，對120 例陰道炎患者給予革蘭氏染色法檢測，結果顯示，其檢測靈敏度、特異性、準確率分別為87.07%、100.00%、87.50%。

2.2 BTR

BTR 主要是依據白帶病原具有不同的形態特點，利用具有多種功能的染色液作染色檢查的一種實用性較強的形態學檢測技術。BTR 染色液主要由R1、R2 液組成，染白帶涂片，能夠在一張涂片上同時進行淋球菌、霉菌、滴蟲等多項檢測，具有操作方式簡便、染色形態清晰與檢出率高等優點，可為臨床診斷、治療等提供可靠的依據[9]。

2.3 CTB

CTB 染液主要是由R1、R2 組成，因其染色液的效能可使病原體形態特點更為清晰顯示出，可實施多項檢查，同時還可進行陰道鱗狀細胞分類計數，對卵巢功能進行檢測，具有操作方式簡便，迅速、檢出率高等優點[10]。

3.培養法

培養法是診斷細菌性陰道病、滴蟲性陰道炎的“金標準”，具有一定的高敏感性與高特異性，需要特定的試驗環境與材料。其中包括普通細菌培養法、快速培養法、念珠菌顯色培養基法（CA）等。楊潔、陳海迎、鄭建瓊[11]等人研究顯示，對961 例孕婦采取陰道下段1/3 處及肛門分泌物實施細菌培養檢測，結果顯示，細菌培養法檢測的靈敏度、特異度、約登指數、陰性似然比分別為0.32、1.00、0.32、0.6。而快速培養法檢測時間僅需2.5h，也存在一定的靈敏度、特異度。CA 自20 世紀90年代由法國研究者進行開發，CA 的原理主要是依據酶底物法，經過顯色來區別不同念珠菌，在25～28℃環境中培養24～48h 后，白色念珠菌可呈現出藍綠色；熱帶念珠菌呈現藍灰色或鐵藍色；光滑念珠菌呈現紫色；其他念珠菌顯示白色，細菌被抑制。CA優點是能夠直接使用陰道分泌物標本，僅需24～48h 培養即可診斷外陰陰道念珠菌病（VVC），同時鑒別引起VVC 常見念珠菌[12]。

4.分子生物學

近年來，隨著分子生物學逐漸發展，微生物的分類鑒定從表型特征鑒定深化為基因特征鑒定。其中基于16SrRNA 基因聚合酶反應（PCR）擴增是臨床檢測陰道微生物最常見、主要方式[13]。曹敬榮、高世超、陳典典[14]等人研究顯示，對12 株菌株使用PCR 擴增其16SrRNA 基因，測序后實施BLAST 比對鑒定菌種，結果顯示，12 株菌經PCR 擴增均可獲得陽性條帶，均鑒定到種。由上述得出，分子生物學方式檢測促使檢測到的陰道微生物種類更為全面、更準確，檢出率相比其他檢測方式高。借助分子生物學方式能夠研究不同微生物對陰道微生物作用，并掌握各生殖道感染性病癥，進而為臨床診斷、治療提供有效理論依據。

5.小結

陰道分泌物檢測是臨床診斷婦科疾病的，主要方式之一，陰道分泌物檢測方式較多，不同方式存在不同的特點。其中直接涂片、染色法作為臨床傳統檢測方式，具有直觀以及經濟等特點，常在臨床譽為“金標準”，但操作方式較為復雜、時間較長。培養法具有較高的靈敏度、特異性；分子生物學作為目前臨床研究的重點內容，具有鑒定準確、設備昂貴、檢測費用高等特點，故僅具有科研與確診意義。因此在臨日后臨床研究中，可進一步增加樣本數、引用客觀性指標以及延長研究時間等，以深入研究陰道分泌物檢測方式。