復合乳酸菌發酵蚯蚓對豬生長性能、抗氧化功能的效果影響

劉依山，呂 蘭，郭藝偉，包永占★，王玉田，潘興亮，鄭瑞峰，田 莉

（1.河北農業大學動物醫學院 071000；2. 北京市畜牧總站 100107；3. 懷柔區農業農村局 101400）

蚯蚓產量大，易獲取，藥理作用多，應用前景廣，所含氨基酸有十八種之多，含70%左右，其中谷氨酸的含量最高，可達10%左右[1]，除蛋白質含量高外，蚯蚓含有具有抗病和促進動物生長多肽和可溶性的小分子蛋白，多種礦物質元素和維生素[2]，現減少或替代豆類等投資高的蛋白飼料的研究越來越多并取得了不錯的效果[3]，乳酸菌發酵，更可以使飼料色澤、香味得到改善；不易吸收的大分子蛋白可變成小分子多肽和氨基酸，使氨基酸含量升高，粗蛋白和粗脂肪含量升高，短鏈脂肪酸含量升高，提高飼料的利用率[4]。

發酵飼料產品中的代謝產物等非活菌成分，不易受到抗生素、消毒劑、酸化劑等具有殺菌活性物質的影響。蚯蚓中的有效物質能增強動物機體免疫功能和抗氧化功能等，乳酸菌能夠有效地分解蚯蚓中大分子物質，使抗營養因子含量減少，聯合乳酸菌抗菌性、增強免疫力和提高抗氧化的作用[5]，可以同時發揮乳酸菌和蚯蚓的應用價值。本試驗探索植物乳桿菌、乳酸片球菌、腸膜明串珠菌3株乳酸菌復合發酵蚯蚓物添加到豬基礎飼料中對豬生長性能、抗氧化功能的效果影響。

1 材料與方法

1.1 試驗材料

日本大平二號蚯蚓，北京艾克賽德生物工程有限公司；組織勻漿機，上海凈信實業發展有限公司；發酵罐，東莞市臻釀貿易有限公司；全自動血液分析儀，深圳邁瑞生物醫療股份有限公司；無水葡萄糖，上海麥克林生化科技有限公司；丙二醛 （MDA）、谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性、總抗氧化力（T-AOC）檢測試劑盒，南京建成生物工程研究所。

1.2 復合發酵蚯蚓液制備

將在北京市畜牧總站分離保存在-80℃的植物乳桿菌、乳酸片球菌、腸膜明串珠菌菌種進行復蘇，將植物乳桿菌、乳酸片球菌、腸膜明串珠菌菌液按5%∶3%∶2%比例加入含有3g無水葡萄糖100mL蒸餾水中，將洗腸后的日本大平二號蚯蚓肉體勻漿，進行60℃10min巴氏消毒，加入5g到發酵培養基。混勻之后，28℃密閉發酵48h，等比放大加入豬飼料中。

1.3 試驗動物

試驗于2021年8月9日～9月16日期間在北京市延慶區經濟示范園進行，將日齡、體重相近（約為40kg）的 20頭大長白育肥豬隨機分成4組，分別進行編號，每組1個處理，共4個處理，每個處理設5個重復。對照組飼喂基礎飼糧，3個試驗組分別在基礎日糧中加入1%、3%、5%的復合乳酸菌發酵蚯蚓液。試驗期內每天于 17: 00進行飼喂，預試期7d，正試期32d。

1.4 飼養管理

按組別進行分欄，按照豬場正常的飼養程序進行飼養。試驗前豬舍進行全面消毒，試驗豬進行常規免疫。根據日齡逐漸增加，飼料也逐漸增加。試驗豬自由飲水，每周清洗欄舍3次，保持欄舍和飼槽清潔，每日觀察記錄試驗豬的健康狀況。

1.5 檢測指標

1.5.1 生長指標

分別于試驗開始和結束日早晨 7: 00 開始空腹稱重，逐頭計算平均日增重，試驗期以欄為單位記錄每天的投料量和剩料量，以組為單位統計飼料消耗量及平均料肉比。

1.5.2 血常規指標

在試驗結束第33d時對豬進行前腔靜脈采血，利用全自動血液分析儀對豬全血進行指標檢測，并記錄數據。

1.5.3 抗氧化指標

在試驗結束第33d時進行采血，3000 r/min離心10min處理收集血清，按照以下各個試劑盒說明書進行測定血清中丙二醛 （MDA）含量，谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和總抗氧化力（T-AOC）。

1.6 統計

利用SPSS 19.0 軟件對試驗數據進行統計學分析，對比顯著性差異（P＜0.05），數據表示方式為平均值±平方差（?x±s），通過GraphPad Prism 5.0軟件對抗氧化指標結果進行制圖。

2 結果

2.1 復合乳酸菌發酵蚯蚓物對豬日增重料肉比的效果

在試驗的32d飼養期里，各組豬均未有發病記錄，健康情況良好。經單因素分析（結果見表1），添加3%、5%的試驗組平均日增重與對照組比呈極顯著差異 （ P＜0.01），其中添加5%試驗組效果最為明顯，對照組和1%、3%、5%試驗組平均日增重呈依次遞增的趨勢，只有添加5%復合乳酸菌發酵蚯蚓液的試驗組平均料重與對照組比呈顯著性差異（ P＜0.05），但對照組與1%、3%、5%試驗組的平均料重比依次為遞減趨勢。

表1 日增重料重比基本情況

2.2 復合乳酸菌發酵蚯蚓物對豬血常規指標的效果

結果見表2，對于大長白二元育肥豬血常規指標，隨著飼料中乳酸菌復合發酵蚯蚓物水平的增加，中性粒細胞與淋巴細胞比值呈線性下降（P＜0.05），淋巴細胞比率呈線性增加（P＜0.01），其他血常規指標對乳酸菌發酵蚯蚓物不同水平無響應。

表2 復合乳酸菌發酵蚯蚓物對豬血常規指標的效果

2.3 復合乳酸菌發酵蚯蚓物對豬抗氧化能力的效果

結果見表3，可知在試驗第33d時，添加1%、3%、5%復合乳酸菌發酵蚯蚓物的試驗組肉豬血清丙二醛MDA含量較對照組分別降低0.5 nmol/mL、0.55 nmol/mL和1.06 nmol/mL，均顯著低于對照組（P＜0.05）。試驗組豬血清中GSH-Px活力分別較對照組有明顯的提升趨勢，其中添加5%的試驗組與對照組比極顯著差異（P＜0.01）；肉豬血清SOD活性較對照組有略微升高的趨勢，但無顯著差異性（P＞0.05）；3個試驗組豬血清T-AOC總抗氧化能力較對照組均有提高，但添加5%的復合乳酸菌發酵蚯蚓物試驗組與對照組相比有顯著性差異（P＜0.05）。

表3 復合乳酸菌發酵蚯蚓物對豬抗氧化能力的效果

3 討論

生豬的生長性能反映生豬的生長速度、飼料利用率等重要指標，對豬場的養殖水平有著評價意義，生長性能的高低更決定著生豬產肉能力，以及養殖場的經濟效益[6]。在本試驗中，與對照組比，添加1%、3%、5%復合乳酸菌發酵蚯蚓物的試驗組大白豬日增重和料重比均有提升，且添加5%的發酵液效果差異極顯著（P＜0.01），平均日增重約達到0.918kg。徐麒麟[7]在飼料中添加蚯蚓提取物可以降低成華豬的料重比，并可以提高抗氧化能力，本試驗乳酸菌發酵蚯蚓產物與蚯蚓提取物相比，降低丙二醛 （MDA）含量幅度較大。李園園[8]等在安義瓦灰雞飼糧中添加蚯蚓發酵液的試驗中，蚯蚓發酵液可明顯改善雞的生長性能、肌肉品質，以添加量為5μL/g蚯蚓發酵液的效果最佳。王燕麗[9]在復合發酵蚯蚓蛋白飼料對肉豬生長性能的效果試驗中，表明發酵蚯蚓蛋白飼料確實能促進肉豬增重，并能降低飼料成本，蚯蚓蛋白替代70%的豆粕效果相對較好，其應用效果與本實驗一致。Rudabeh R[10]在飼糧中添加蚯蚓提取物對里海羅貝魚種血清免疫參數和生長性能的影響試驗中，蚯蚓提取物顯著提高了增重和比生長率、食物適口性指數和飼料轉化率（P＜0.05）。

中性粒細胞和淋巴細胞均是與機體免疫能力有關的[11]，根據添加1%、3%、5%試驗組的血常規指標檢測得出復合乳酸菌發酵蚯蚓物可以改善機體免疫能力，促進生長的功能。吳貴富[12]在飼料中添加富硒乳酸菌中藥制劑，提高育肥豬生長性能并改善了血液指標，乳酸菌可以促進動物機體生長性能和抗氧化功能。

正常動物體內會含有活性氧，過量的活性氧能通過氧化反應的形式，會造成各種功能障礙，嚴重會導致癌癥等疾病[13]，對于育肥豬來說，會影響其肉品質，降低機體中的氧自由基，利于機體減少發生疾病的可能，提高抗氧化能力為之重要。本試驗研究表明，添加1%、3%、5%試驗組豬血清中的谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）、超氧化物歧化酶（SOD）活性和總抗氧化能力（T-AOC）呈直線提升，其中5%丙二醛 （MDA）含量呈直線下降。相比試驗中對照組，添加5%試驗組豬血清中谷胱甘肽過氧化物酶（GSH-Px）有極顯著性差異（P＜0.01），總抗氧化能力（T-AOC）有顯著性差異（P＜0.05）。周億金[14]等在動物試驗中，得出結果是不同濃度的蚯蚓抗氧化提取物對成年小鼠血液的超氧化物歧化酶SOD、谷胱甘肽過氧化物酶GSH-Px、過氧化氫酶CAT活性的升高和丙二醛MDA含量的減少均有不同程度的影響，結果與本試驗一致。徐麒麟[15]等在飼喂蚯蚓提取液原液對家蠶中腸氧化損傷、總抗氧化能力及抗氧化酶含量影響的試驗中，得出結論蚯蚓提取液可降低家蠶中腸 LDH 含量、提高抗氧化酶基因的表達水平等抗氧化能力，也表明本試驗結論得出的蚯蚓有提高動物機體抗氧化能力的作用。蚯蚓的藥用價值廣泛，是成本較低的蛋白質資源，加上乳酸菌抗菌和增強免疫力等功能作用以及示范應用普遍，聯合作用下在未來還會有新的發現，會為養殖畜牧行業創造更多的可能性。

4 結論

在本試驗的研究下，飼糧中添加乳酸菌復合發酵蚯蚓物能夠促進育肥肉豬增重，同時能降低料重比，改善血液指標，提高育肥豬的抗氧化能力，從而增加飼養肉豬過程中的經濟效益，其添加5%的乳酸菌復合發酵蚯蚓對大長白育肥豬生長性能和抗氧化功能效果較好。