腸易激綜合征患者血清PRDX1、IL－17A表達(dá)與腸道癥狀的相關(guān)性

雍海江，袁春輝，蘇國忠

吳忠市人民醫(yī)院 1消化內(nèi)科，2急診醫(yī)學(xué)科（寧夏吳忠751100）

腸易激綜合征（irritable bowel syndrome，IBS）是臨床常見的一種胃腸道功能性疾病，以腹脹、腹痛、排便習(xí)慣／大便性狀改變?yōu)橹饕R床表現(xiàn)，其病程較長，可間歇性或持續(xù)性發(fā)作，直接影響患者生活質(zhì)量［1］。目前，IBS發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，但專家學(xué)者認(rèn)為胃腸道動力紊亂、炎癥反應(yīng)、氧化應(yīng)激與IBS發(fā)生發(fā)展關(guān)系密切［2］。過氧化物氧化還原蛋白1（peroxiredoxin 1，PRDX1）屬于過氧化物氧化還原酶蛋白家族成員之一，其在IBS中表達(dá)水平明顯上調(diào)，其可能參與并影響IBS疾病發(fā)展進(jìn)程，PRDX1有望成為診治IBS的炎癥標(biāo)志物［3］。此外，白細(xì)胞介素－17A（interleukin－17A，IL－17A）是IL－17成員之一，Amani等［4］研究發(fā)現(xiàn)IL－17在IBS患者中呈高表達(dá)，經(jīng)維生素D治療后，IL－17水平明顯降低，IL－17可能在IBS發(fā)病過程中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用。但PRDX1、IL－17A在IBS患者血清中的表達(dá)水平與腸道癥狀的關(guān)系研究較少。基于此，本研究通過檢查PRDX1、IL－17A在IBS患者血清中的水平，分析兩者與IBS癥狀嚴(yán)重程度量表（IBS symptom severity scale，IBS－SSS）相關(guān)性，以期為早期診治IBS提供臨床參考依據(jù)。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019年1月至2020年12月本院診治的IBS患者116例為IBS組，體質(zhì)指數(shù)（bodymass index，BMI）為18.74～26.76 kg／m2；并以同時間段內(nèi)本院健康查體者120例為對照組，BMI為18.62～26.44 kg／m2。與對照組相比，IBS組患者胃腸道感染史比例明顯升高（P＜0.05），男女比例、年齡、BMI、吸煙史、酗酒史比例差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。見表1。

表1 兩組一般資料比較 例

診斷標(biāo)準(zhǔn)：參考羅馬Ⅲ診斷標(biāo)準(zhǔn)［5］判定IBS。納入標(biāo)準(zhǔn)：（1）所有患者符合IBS診斷標(biāo)準(zhǔn)；（2）所有患者臨床資料完整；（3）所有患者自愿參與本項(xiàng)研究者。排除標(biāo)準(zhǔn)：（1）合并消化系統(tǒng)潰瘍／感染、炎癥性腸病、糖尿病內(nèi)臟神經(jīng)病變、惡性腫瘤、肝膽胰疾病者；（2）合并甲狀腺功能性疾病者；（3）合并精神病者；（4）患有慢性疾病史需要長期接受藥物治療者；（5）近3個月內(nèi)行腹腔／腸道手術(shù)者。

1.2 試劑與儀器 人PRDX1酶聯(lián)免疫吸附劑測定（enzyme linked immunosorbent assay，ELISA）試劑盒（貨號：CSB－EL018653HU－1）購自上海恒斐生物科技有限公司；人IL－17A ELISA試劑盒（貨號：PK－EL－62716）購自江蘇普諾生生物科技有限公司。人白細(xì)胞介素－10（interleukin－10，IL－10）ELISA試劑盒（貨號：QN－PS0066）購自上海喬羽生物科技有限公司。紫外分光光度計(jì)（型號：DU－730）購自上海普迪生物技術(shù)有限公司。

1.3 方法

1.3.1 樣本收集 收集所有研究對象清晨空腹肘靜脈血4～6 mL，自然凝集，3 550×g離心10 min，收集上清液，分裝，保存于－80℃冰箱中，待檢。

1.3.2 ELISA法檢測血清PRDX1、IL－17A、IL－10水平 取出適量凍存血清樣本，解凍，嚴(yán)格按照PRDX1、IL－17A、IL－10 ELISA試劑盒說明書檢測兩組受試者血清PRDX1、IL－17A、IL－10水平。

1.3.3 檢測血清MDA水平 取出適量凍存血清樣本，解凍，采用硫代巴比妥酸法測定丙二醛（malondialdehyde，MDA）水平。

1.3.4 IBS－SSS評分 IBS－SSS考察患者排便情況、腹痛頻率、腹脹程度、腹痛程度、疾病對生活的影響5個方面，總分為0～500分，分值越大表示腸道癥狀越重［6］。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 利用SPSS 24.0統(tǒng)計(jì)軟件，符合正態(tài)分布的計(jì)量數(shù)據(jù)采用均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，組間比較行t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以“例”表示，組間比較采用χ2檢驗(yàn)；采用Pearson法分析IBS患者血清PRDX1、IL－17A水平、IBS－SSS評分與IL－10、MDA關(guān)系及PRDX1、IL－17A表達(dá)水平與IBS－SSS評分相關(guān)性；以logistic回歸分析IBS發(fā)生的影響因素。以P＜0.05表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組血清PRDX1、IL－17A、IL－10、MDA、IBSSSS評分表達(dá)水平比較 與對照組相比，IBS組患者血清PRDX1、IL－17A、MDA水平明顯升高（P＜0.05），IL－10水平明顯降低（P＜0.05）。IBS組患者IIBS－SSS評分為（345.36±112.58）分。見表2。

表2 兩組血清PRDX1、IL－17A、IBS－SSS、IL－10、MDA評分水平比較 ±s

表2 兩組血清PRDX1、IL－17A、IBS－SSS、IL－10、MDA評分水平比較 ±s

項(xiàng)目 例數(shù) PRDX1（ng／mL） IL－17A（ng／L） IBS－SSS評分（分） IL－10（ng／L） MDA（nmol／L）對照組 120 3.43±1.02 36.07±8.31 － 3.58±1.06 1.76±0.51 IBS組 116 6.02±1.94 58.48±11.27 345.36±112.58 2.85±0.72 4.49±1.25 t值 12.897 17.427 － 6.168 22.099 P值＜0.001 ＜0.001 － ＜0.001 ＜0.001

2.2 IBS患者血清PRDX1、IL－17A水平、IBSSSS評分與IL－10、MDA相關(guān)性 Pearson法分析顯示，IBS患者血清IL－17A水平、IBS－SSS評分與IL－10呈負(fù)相關(guān)（r＝－0.367、－0.536，P＜0.05）；IBS患者血清PRDX1水平、IBS－SSS評分與MDA呈正相關(guān)（r＝0.374、0.503，P＜0.05）。見表3。

表3 IBS患者血清PRDX1、IL－17A水平、IBS－SSS評分與 IL－10、MDA的關(guān)系

2.3 IBS患者血清PRDX1、IL－17A表達(dá)水平與IBS－SSS評分相關(guān)性 Pearson法分析顯示，IBS患者血清PRDX1、IL－17A表達(dá)水平與IBS－SSS評分均呈正相關(guān)（r＝0.562、0.584，P均＜0.05）。見圖1、2。

圖1 IBS患者血清PRDX1水平與IBS－SSS評分的關(guān)系

2.4 影響IBS的logistic回歸分析 以胃腸道感染史、血清PRDX1、IL－17A水平、IBS－SSS評分、IL－10、MDA為自變量，以IBS是否發(fā)生為因變量，行l(wèi)ogistic回歸分析，結(jié)果顯示PRDX1、IL－17A、IBS－SSS評分、MDA為IBS發(fā)生的危險(xiǎn)因素（P均＜0.05）。見表4。

圖2 IBS患者血清IL－17A水平與IBS－SSS評分的關(guān)系

表4 logistic回歸分析IBS發(fā)生的影響因素

3 討論

IBS雖是良性非器質(zhì)性疾病，但發(fā)病率較高，對患者家庭和社會造成經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)［7］。因此，尋找IBS發(fā)病的有關(guān)因素，及時調(diào)控相關(guān)指標(biāo)，對提高患者生活質(zhì)量具有積極意義。

PRDX1是一種過氧化物還原酶，在活性氧清除、細(xì)胞增殖、分化、凋亡及炎癥反應(yīng)過程中發(fā)揮重要調(diào)節(jié)作用［8］。有關(guān)研究表明，PRDX1在慢性炎癥導(dǎo)致的結(jié)直腸癌中表達(dá)水平明顯上調(diào)，其可能調(diào)節(jié)腫瘤壞死因子－α、白細(xì)胞介素－6等促炎因子及部分活化的核因子－κBp65表達(dá)水平，進(jìn)而在結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展中發(fā)揮促炎作用，PRDX1具有作為診治結(jié)直腸癌的潛在靶標(biāo)［9］。既往研究顯示，PRDX1在需要體外膜氧合的心源性休克患者中表達(dá)失調(diào)，與炎性細(xì)胞因子具有一定相關(guān)性，PRDX1在炎癥反應(yīng)中起關(guān)鍵調(diào)節(jié)作用，其可能與全身性炎癥反應(yīng)綜合征發(fā)生發(fā)展及不良預(yù)后有關(guān)，PRDX1有可能是治療缺血／再灌注損傷的生物學(xué)指標(biāo)［10］。以上研究表明，異常表達(dá)的PRDX1與炎癥類疾病密切相關(guān)。此外，Horie等［11］利用蛋白質(zhì)組學(xué)及免疫組化法分析PRDX1在活動性和非活動性潰瘍性結(jié)腸炎患者中的表達(dá)情況，結(jié)果顯示PRDX1在活動性潰瘍性結(jié)腸炎患者黏膜中的表達(dá)水平較高，且PRDX1表達(dá)水平隨著潰瘍性結(jié)腸炎患者上皮細(xì)胞炎癥程度增加而升高，PRDX1可用于評估潰瘍性結(jié)腸炎病情及其相關(guān)腫瘤發(fā)生的嚴(yán)重性。本研究中IBS組患者血清PRDX1水平明顯高于對照組，提示PRDX1可能參與并影響IBS發(fā)病過程。推測PRDX1可能通過調(diào)節(jié)炎癥因子表達(dá)，從而在IBS的炎癥反應(yīng)過程中起促進(jìn)作用［12］。

IL－17A主要是由Th17細(xì)胞分泌的特異性促炎性細(xì)胞因子，其可促使炎癥細(xì)胞釋放細(xì)胞因子、趨化因子及抗菌肽，促進(jìn)中性粒細(xì)胞聚集及增殖，連接適應(yīng)性免疫及固有免疫，在自身免疫性、腫瘤等疾病進(jìn)展及宿主防御中發(fā)揮關(guān)鍵作用［13］。有關(guān)研究顯示，雙重氧化酶2（dual oxidase 2，DUOX2）誘導(dǎo)產(chǎn)生的H2O2在慢性炎癥及宿主防御中具有關(guān)鍵作用，IL－17A與白細(xì)胞介素－4結(jié)合，協(xié)同增加DUOX2在結(jié)腸癌細(xì)胞中的表達(dá)，從而可能在胃腸道惡性腫瘤炎癥反應(yīng)及DNA損傷中起一定作用［14］。既往研究顯示，幽門螺桿菌是消化性潰瘍疾病及慢性活動性胃炎的主要致病因素，IL－17A表達(dá)上調(diào)與幽門螺桿菌感染有關(guān)，IL－17A誘導(dǎo)的炎癥反應(yīng)可能受miR－146a調(diào)控，IL－17A有望成為胃炎診治的生物學(xué)靶標(biāo)［15］。以上研究證實(shí)，IL－17A表達(dá)失調(diào)與胃腸道炎癥性疾病相關(guān)。此外，Busch等［16］通過采集并分析潰瘍性結(jié)腸炎患兒回腸結(jié)腸鏡檢的標(biāo)本，結(jié)果顯示，IL－17A在潰瘍性結(jié)腸炎患兒中呈過表達(dá)，其可能參與并影響炎癥性腸病發(fā)病進(jìn)程，IL－17A可能具有診治炎癥性腸病的潛在價值。本研究中IBS組患者血清水平明顯高于對照組，提示IL－17A可能在IBS病理過程中發(fā)揮一定調(diào)節(jié)作用。究其可能原因，一方面，IL－17A作為IL－17家族代表性成員，其可能通過刺激上皮細(xì)胞、巨噬細(xì)胞、內(nèi)皮細(xì)胞等分泌細(xì)胞趨化因子及多種炎性介質(zhì)，募集中性粒細(xì)胞從而誘導(dǎo)炎癥發(fā)生；另一方面，由于腸道通透性增加或腸道菌群紊亂，腸道細(xì)菌成分通過激活腸粘膜抗原呈遞樹突細(xì)胞，促使IL－17A分泌增加，進(jìn)而引起針對腸道菌群的免疫應(yīng)答［17］。

IL－10主要是由Th2細(xì)胞產(chǎn)生的抗炎細(xì)胞因子，在腸道免疫及炎癥反應(yīng)中具有重要調(diào)節(jié)作用；此外，MDA可間接反映組織受氧自由基損傷程度，其可能在IBS氧化應(yīng)激、自由基損傷過程中發(fā)揮重要作用［4］。本研究中IBS組患者血清IL－10水平明顯低于對照組，MDA水平明顯高于對照組，與Amani等［4］研究趨勢類似，提示異常水平的IL－10、MDA可能與IBS發(fā)病進(jìn)展有關(guān)。推測IL－10可能通過抑制巨噬細(xì)胞黏附、激活，抑制炎癥細(xì)胞因子的產(chǎn)生和釋放，進(jìn)而在IBS的炎癥反應(yīng)過程中起抑制作用；MDA可能通過影響氧化反應(yīng)，引起組織自由基損傷，從而在IBS發(fā)病過程中起作用。

本研究對所有IBS患者腸道癥狀進(jìn)行評估，結(jié)果顯示，IBS－SSS評分為（345.36±112.58）分，且與血清PRDX1、IL－17A表達(dá)水平呈正相關(guān)，提示血清PRDX1、IL－17A可能與腸道癥狀相互影響，從而協(xié)同影響IBS發(fā)生發(fā)展。進(jìn)一步研究顯示，IBS患者血清IL－17A水平、IBS－SSS評分與IL－10呈負(fù)相關(guān)，PRDX1水平、IBS－SSS評分與MDA呈正相關(guān)，提示IL－17A與IL－10，PRDX1與MDA可能發(fā)生相互作用，并與腸道癥共同影響IBS進(jìn)程。此外，本研究顯示PRDX1、IL－17A、MDA水平、IBS－SSS評分均為IBS發(fā)生的危險(xiǎn)因素，提示PRDX1、IL－17A、MDA水平升高，IBS－SSS評分增加，均會增加IBS患病風(fēng)險(xiǎn)，及時監(jiān)控上述指標(biāo)有助于早期評估、治療IBS。

綜上所述，PRDX1、IL－17A在IBS患者血清中呈過表達(dá)，兩者與腸道癥狀具有一定相關(guān)性，可能與IL－10、MDA、腸道癥狀相互作用，進(jìn)而影響IBS發(fā)展過程。但本研究樣本較少，會引起研究結(jié)果出現(xiàn)一定偏頗，后續(xù)研究將增加樣本量進(jìn)行深入探究。