高效液相色譜法測(cè)定蔬菜中氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留的方法與應(yīng)用

張亞萍

（玉溪市江川區(qū)農(nóng)產(chǎn)品質(zhì)量安全檢測(cè)站，云南玉溪 652600）

氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥是一種良好的殺蟲(chóng)農(nóng)藥，這種農(nóng)藥在使用過(guò)程中，有高效、低毒、低殘留的效果，經(jīng)常被用在果蔬殺蟲(chóng)上，現(xiàn)已成為果蔬及糧食主要的殺蟲(chóng)劑。但由于農(nóng)戶(hù)環(huán)保意識(shí)以及相關(guān)部門(mén)的管理意識(shí)不夠，這類(lèi)農(nóng)藥仍存在一些不合理使用情況，且這些不合理的使用也給當(dāng)?shù)氐纳鷳B(tài)跟食品安全造成了一定影響，因此對(duì)蔬菜中的氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥進(jìn)行檢測(cè)十分必要。現(xiàn)如今可以完成氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留檢測(cè)的方法主要包括高效液相色譜法、質(zhì)譜法以及液相柱后衍生法等，其中酶抑制法存在著局限性，但可以將其作為儀器分析法進(jìn)行補(bǔ)充[1]。高效液相色譜法在檢測(cè)過(guò)程中，比較常用的檢測(cè)器是紫外檢測(cè)器，該檢測(cè)器的靈敏度不夠高，而熒光檢測(cè)器的靈敏度較高，操作起來(lái)也較為簡(jiǎn)便，在眾多分析方法中比較突出。基于此，主要以我國(guó)農(nóng)業(yè)行業(yè)標(biāo)準(zhǔn)——蔬菜和水果中有機(jī)磷、有機(jī)氮、擬除蟲(chóng)菊酯和氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥多殘留的測(cè)定作為參考，使用配熒光檢測(cè)器以及柱后衍生系統(tǒng)的高效液相色譜儀測(cè)定隨機(jī)抽取的蔬菜中的7 種氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留量，對(duì)蔬菜中氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥殘留測(cè)定技術(shù)進(jìn)行探討。

1 材料與方法

1.1 材料與試劑 主要的材料為市面上銷(xiāo)售的白菜、黃瓜以及芹菜；主要的試劑包括甲酯、色譜純、二氯甲烷、醋酸氨、氨基甲酸酯類(lèi)標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液。

1.2 主要的儀器與設(shè)備 儀器設(shè)備包括超高效液相色譜系統(tǒng)、質(zhì)譜儀、高速分散勻漿機(jī)、旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)儀、氮吹儀及固相萃取小柱。

1.3 樣品的前處理 首先稱(chēng)取25 g 樣品放入廣口瓶中，準(zhǔn)確加入100 mL 的色譜純勻速搖1 min 左右過(guò)濾后放入5 g 氯化鈉，進(jìn)行劇烈地?fù)u動(dòng)，然后將其靜置20 min 左右，待其分層，準(zhǔn)確地吸取色譜純20 mL，放入圓底燒瓶中，用50℃的水浴旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，將其蒸發(fā)至干，再加入2 mL 的二氯甲烷甲酯溶液，然后對(duì)其進(jìn)行溶解，等待凈化。

1.4 樣品凈化 將10 mL 的二氯甲烷甲酯溶液進(jìn)行萃取，待溶液流至吸附填料時(shí)，立刻加入樣品濃縮液20 mL 的離心管收集液，使用2 mL 的二氯甲烷甲酯溶液對(duì)圓底燒瓶進(jìn)行洗滌，將其轉(zhuǎn)移至固相萃取柱，然后重復(fù)上述操作2 次，把收集到的洗脫液放置于氮吹儀上，吹至蒸發(fā)近干，然后使用甲酯醋酸氨溶液將其定容至2 mL，用濾膜進(jìn)行過(guò)濾，等待測(cè)量[2]。

1.5 儀器條件 ①色譜條件。色譜柱的柱溫控制在40℃，樣品室的溫度控制在10℃，流速控制在0.25 mL/min，整個(gè)流程的分析過(guò)程大約9 min。②質(zhì)譜條件。毛細(xì)管電壓為3.2kV，離子源的溫度控制在110℃，脫溶劑氣的溫度為400℃，光電倍增器的電壓為650 V。

2 結(jié)果與分析

2.1 分離條件的選擇 為了能獲得更好地分離效果，需要對(duì)甲醇與水的體積比進(jìn)行多次配比試驗(yàn)，這樣才能考察甲醇跟水作為流動(dòng)相的分離效果。通過(guò)研究發(fā)現(xiàn)，甲醇的配比越大，其出峰越快，且峰型越好，但分離效果較差；水的配比較大，分離效果會(huì)較好，但峰型較寬，且分析時(shí)間較長(zhǎng)，出峰也較慢。綜合來(lái)講，甲醇與水配比下基線(xiàn)基本上呈現(xiàn)峰形對(duì)稱(chēng)的情況，和其他雜質(zhì)峰并未出現(xiàn)重疊，且能夠做到完全分離，因此可以選擇甲醇和水配比作為流動(dòng)相進(jìn)行研究。

2.2 組分分離情況 在已經(jīng)設(shè)定的試驗(yàn)條件下，7 種氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥得到了非常好的分離，經(jīng)過(guò)跟單標(biāo)的比較定性，這7 種農(nóng)藥的出峰順序依次為涕滅威砜、涕滅威亞砜、滅多威、3－羥基克百威、涕滅威、克百威和甲萘威。

2.3 方法的添加回收率以及精密度 在各種蔬菜樣品中添加了3 種濃度的7 種氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的標(biāo)樣，分別為0.05 mg/kg，0.10 mg/kg，0.50 mg/kg，在添加完3 種濃度后，考察添加的回收率。從研究可以發(fā)現(xiàn)，7 種濃度的回收率均固定在74.6%～107.6%，其精密度在10%以?xún)?nèi)，由此說(shuō)明其精密度處理較好，且在前期處理跟儀器方面都比較穩(wěn)定，能夠有效地滿(mǎn)足農(nóng)藥多殘留分析的需求[3]。

2.4 樣品定溶液的確定 樣品定溶液會(huì)影響到藥物在色譜柱中的分離行為以及離子效率，因此可以選用不同比例的甲醇+水溶液來(lái)進(jìn)行樣品的定溶液。試驗(yàn)發(fā)現(xiàn)，使用甲醇—醋酸氨溶液作為樣品的定溶液，各種農(nóng)藥的豐度較其他的定溶液來(lái)說(shuō)有著不同程度的提高，且峰型較好，因此可以選擇甲醇—醋酸氨溶液作為最佳的樣品定溶液。

3 結(jié)論與討論

氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥本身具有一定的熱不穩(wěn)定性，使用氣相色譜法來(lái)測(cè)定時(shí)，實(shí)際上測(cè)定的是該類(lèi)藥物高溫降解的產(chǎn)物，且響應(yīng)值較低。蔬菜生長(zhǎng)期較短，但流通速度非常快，用更加靈敏準(zhǔn)確的方法，才能真正地檢測(cè)出氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的殘留，因此這對(duì)檢測(cè)技術(shù)提出了更新的要求。自2006 年日本推出了相關(guān)的農(nóng)產(chǎn)品制度及歐美各國(guó)修改了食品安全法規(guī)后，新一輪的貿(mào)易壁壘對(duì)這類(lèi)農(nóng)藥檢測(cè)提出了更高的要求[4-5]。試驗(yàn)主要基于現(xiàn)有的標(biāo)準(zhǔn)與文獻(xiàn)基礎(chǔ)對(duì)樣品前處理的條件進(jìn)行了相關(guān)對(duì)比及優(yōu)化，使用熒光檢測(cè)器以及柱后衍生系統(tǒng)對(duì)蔬菜中的多種氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的殘留進(jìn)行了相關(guān)檢測(cè)。試驗(yàn)過(guò)程中，以乙腈作為提取溶液并高速勻漿提取出樣品，利用氨基固相萃取柱凈化后采用高相液相色譜進(jìn)行測(cè)定，查看蔬菜中7 種氨基甲酸酯類(lèi)農(nóng)藥的具體殘留量，使用該方法能夠有效地簡(jiǎn)化樣品處理步驟、節(jié)省時(shí)間，提升靈敏度。該方法的穩(wěn)定性較好，簡(jiǎn)單方便，利于工作人員操作，且更加具有實(shí)用性，能快速檢測(cè)出農(nóng)藥殘留含量，能完全滿(mǎn)足現(xiàn)在社會(huì)所需的效率、質(zhì)量。