復(fù)方中藥提取物牙膏藥理作用的研究

黃光偉 劉文佳 黃 靜 梁雪松 李月菲

(柳州兩面針股份有限公司，廣西 柳州 545006)

據(jù)有關(guān)資料統(tǒng)計，目前在我國有超過90%以上的人有牙齦問題，牙齦問題主要包括牙齦炎、牙周炎，初期癥狀表現(xiàn)為牙齦出血、紅腫、疼痛等[1]。如果牙齦問題得不到及時防治，會出現(xiàn)越來越嚴(yán)重的腫痛和出血癥狀，最終會導(dǎo)致牙齒的脫落[2]。本研究通過查閱大量文獻(xiàn)資料[3]，篩選出幾味中藥進(jìn)行組方，通過現(xiàn)代中藥技術(shù)提取其中的活性成分，將提取物按一定量添加到牙膏中，通過抗炎、鎮(zhèn)痛和止血作用的藥理實驗，研究牙膏的功效，為開發(fā)具有較好養(yǎng)齦固齒功效的牙膏提供可靠理論依據(jù)。

1 材料

1.1 中藥組方

組方由兩面針、生地黃、獨活、骨碎補(bǔ)等四味中藥材組成。

1.2 提取工藝

按處方稱量好藥材放于圓底燒瓶中，用3倍的75%乙醇溶液浸泡過面，放置12小時，采用加熱回流法在95 ℃水浴鍋中提取3小時，倒出第一次提取液。再按前述方法提取第二次。將兩次提取液合并，在真空條件下濃縮至生藥量∶提取物=1∶1，備用。

1.3 試驗樣品

按一定量添加到牙膏制成復(fù)方中藥提取物牙膏；牙膏空白樣品除不添加中藥提取物外，其它成分與試驗樣品一致。

1.4 試藥

醋酸氟輕松乳膏，天津太平洋制藥有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字H12020838，產(chǎn)品批號：8414133，生產(chǎn)日期：20140704，有效期至201706；雙氯芬酸二乙胺乳膠劑,北京諾華制藥有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字H19990291，產(chǎn)品批號：X4193，生產(chǎn)日期：201304，有效期至201603；云南白藥粉，云南白藥集團(tuán)股份有限公司生產(chǎn)，國藥準(zhǔn)字Z53020798，產(chǎn)品批號：ZDA1401,生產(chǎn)日期：20140310，有效期至201802；醫(yī)用淀粉，廣東德峰淀粉糖業(yè)有限公司淀粉廠生產(chǎn)，批號：20140306。

1.5 實驗動物

昆明種小白鼠，SPF級，體重18～22g；健康白色家兔，普通級，體重2.0～2.5kg；實驗動物均由廣西壯族自治區(qū)實驗動物中心提供，許可證號：SCXK桂2009-0002。

1.6 實驗儀器

FA1004型電子分析天平，中華人民共和國上海精科天平廠生產(chǎn)；GJ-8402型熱板測痛儀，寧海白石電子醫(yī)藥儀器廠生產(chǎn)。

2 方法與結(jié)果[4]

2.1 對二甲苯致小白鼠耳廓急性炎癥腫脹的抗炎作用

選取體重18～22g健康昆明種♂小白鼠40只，隨機(jī)均分4組，每組10只。空白對照組(生理鹽水0.1mL/只)，牙膏空白組(牙膏空白0.1g/只)，陽性藥醋酸氟輕松乳膏組(醋酸氟輕松乳膏0.1g/只)，牙膏樣品組(牙膏0.1g/只)。實驗時各組每只動物右耳廓內(nèi)外兩面均勻涂抹二甲苯0.1mL/只致炎，左耳不加處理作自身空白對照。涂抹二甲苯30min后，各組每只動物右耳廓內(nèi)外兩面分別均勻涂抹各組受試物樣品0.1g/只。給予受試物1 h后，小白鼠頸椎脫臼處死，剪下兩耳廓，用生理鹽水洗去右耳廓受試物樣品，干棉球擦凈，重疊兩耳廓，用內(nèi)徑8 mm的打孔器在同一部位鑿取兩圓耳片，分別在FA1004型電子分析天平上稱重，右耳片重量減去左耳片重量為腫脹值，數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)t檢驗，結(jié)果見表1。

表1 牙膏對二甲苯所致小白鼠耳廓急性炎癥腫脹的影響

2.2 對小白鼠的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)

選取體重18～22g健康昆明種♀小白鼠，用GJ-8402型熱板測痛儀，調(diào)節(jié)控制溫度在55±0.5 ℃,將小白鼠放在熱板上測定每鼠的痛閾值(小白鼠接觸熱板至舔后足的時間),凡舔后足時間小于5s或大于30s及跳躍者棄之不用，挑選合格小白鼠40只，隨機(jī)均分4組，每組10只。空白對照組、牙膏空白基質(zhì)組、陽性藥雙氯芬酸二乙胺乳膠劑組、牙膏樣品組。各組小白鼠按同法重復(fù)2次測定小白鼠的正常痛閾值，每次間隔15min，取兩次正常痛閾值平均值,做為該組小白鼠給藥前的痛閾值。分別于各組動物每鼠4個足跖外用涂予相應(yīng)受試物0.2g/只,空白對照組外用涂予生理鹽水0.2mL/只，外用涂予受試物后15min、30min、45min按同法分別測定小白鼠的痛閾值，如小白鼠60s仍無反應(yīng)，將小白鼠取出，以免燙傷，其痛閾值以60s計算，記錄各組小白鼠痛閾值，數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)t檢驗，結(jié)果見表2。

表2 牙膏對小白鼠的鎮(zhèn)痛作用(熱板法)

2.3 對兔肝臟局部創(chuàng)面損傷出血的止血作用

取健康白色家兔20只，體重2.0～2.5kg，雌雄兼用。用3%戊巴比妥鈉30mg/kg耳緣靜脈緩慢注入，家兔麻醉后，仰臥固定于手術(shù)臺上，腹部正中切口長約6～8cm，暴露并固定肝臟，用手術(shù)剪在肝左葉切去肝臟組織長約1cm，寬約1cm，高約1cm，創(chuàng)面呈噴射樣出血。擦去噴出的血后，立即在創(chuàng)面局部敷涂待試物樣品1g，紗布復(fù)蓋，以200g砝碼壓迫1min，1min后移去砝碼，觀察止血效果，以不出血為止血，如仍出血，則加敷涂待試物樣品后繼續(xù)加壓，每隔30s觀察一次，記錄止血時間，如超過3min仍然出血，則記為未能止血，止血時間記為>3min。每次樣品測試后，用37℃生理鹽水洗去殘留受試物，使創(chuàng)面重新出血，再測試下一受試物樣品。每只兔子進(jìn)行四次肝臟局部創(chuàng)面損傷止血測試實驗，各受試物樣品按拉丁方程序敷藥，以減少肝臟局部創(chuàng)面損傷切口差異和用藥順序的影響。每個受試物樣品總計進(jìn)行20次兔肝臟局部創(chuàng)面損傷出血的止血實驗。止血效果按倒數(shù)計分法(10/T)記為分值F，3min以上未能止血，F(xiàn)無分值記為0。記錄并進(jìn)行統(tǒng)計學(xué)t檢驗，結(jié)果見表3。

表3 牙膏對兔肝臟局部創(chuàng)面損傷出血的止血效果

3 討論

本研究采用的中藥處方為兩面針、生地黃、獨活、骨碎補(bǔ)。兩面針為蕓香科植物兩面針Zanthoxylum nitidum (Roxb.)DC. 的干燥根，歸肝和胃經(jīng)，具有行氣止痛、活血化瘀、祛風(fēng)通絡(luò)等作用，此為君藥；骨碎補(bǔ)為水龍骨科植物槲蕨 Drynaria fortunei (Kunze)