自體外周血干細胞移植治療對乙型肝炎肝硬化患者療效及其對外周血T淋巴細胞亞群的影響研究

魏倩倩（河南省開封市傳染病醫院,河南 開封 475000）

乙型肝炎是指乙型肝炎病毒引起的疾病[1]。臨床上常表現為食欲減退、惡心、肝區疼痛。目前，乙型肝炎仍屬于難治性疾病，患者一旦感染乙肝病毒，疾病將伴隨終身，給患者的生活和工作帶來嚴重的影響。再加之，乙型肝炎呈進行性發展，如果不加以治療，最終會發展成肝硬化[2]。肝硬化是指肝細胞發生纖維樣變性，失去其原有的代謝功能。早期患者肝臟病變較輕，肝臟仍具有一定的代償能力，隨著病變的進一步發展，肝功能難以維持代償能力，稱為失代償期，一旦發展到肝硬化階段，患者的生活質量急速下降，嚴重威脅患者的生命健康。常規的護肝治療的療效并不理想，因此，臨床上亟待探索新的治療方式來延長患者的生命年限。近些年來，自體外周血干細胞移植治療乙型肝炎肝硬化取得了一定的效果，但是關于其具體作用機制仍不明確，因此本次研究觀察其對外周血T淋巴細胞亞群的影響。

1 資料和方法

1.1 一般資料 選取2020年1月-2020年12月本院接收的140例乙型肝炎肝硬化患者為研究對象，按照兩組基礎資料具有匹配性的原則分為對照組和觀察組，每組70例，對照組中，男36例，女34例，年齡32-75歲，平均年齡(51.1±1.9)歲。觀察組中，男38例，女32例，年齡33-78歲，平均年齡(50.4±2.4)歲，組間基礎資料差異無統計學意義（P＞0.05）。入選標準：①符合慢性乙型肝炎防治指南[3]的標準，并診斷為肝硬化；②均由本人簽署了知情研究協議書；③本次研究經醫院倫理委員會通過。排除標準：①存在嚴重心理及精神疾病者；②不能配合治療者；③存在全身感染性疾病者。

1.2 研究方法 對照組：給予常規治療，如護肝、降酶和恩替卡韋抗病毒治療。觀察組：給予人粒細胞集落細胞刺激因子皮下注射，連續2d。進行外周血血細胞分離。采集完成后，在數字減影血管造影下經股動脈穿刺插管，排除肝內占位后，將采集的干細胞懸液緩慢注入肝動脈。

1.3 觀察指標 ①肝功能指標。檢測患者治療前后TBIL、ALB、INR指標。②外周血、T細胞亞群。使用全自動流式細胞儀檢測CD3+、CD4+、CD4+/CD8+指標。③使用Fibroscan儀檢測肝臟硬度；采用Child-Turcotte-Pugh評分系統評價肝功能[8]。④血清細胞因子水平。采用ELISA法檢測血清腫瘤壞死因子（TNF-α）、白細胞介素-6（IL-6）水平，血清超敏C反應蛋白（hs-CRP）。

1.4 統計學方法 采用SPSS22.0軟件進行數據統計分析，計數資料以率（%）表示，采用χ2檢驗，計量資料用（±s）表示，t檢驗，P＜0.05顯示差異具有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者治療前后肝功能指標對比 治療前，兩組TBIL、ALB、INR指標無明顯差別，差異不存在統計學意義（P＞0.05），治療后，觀察組TBIL指標顯著低于對照組，ALB顯著高于對照組，差異存在統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者治療前后肝功能指標對比（±s）

表1 兩組患者治療前后肝功能指標對比（±s）

分組 例數 TBIL（μmol/L） ALB(g/L) INR治療前 治療6個月后 治療前 治療6個月后 治療前 治療6個月后觀察組 70 27.23±7.62 16.33±3.17 26.27±3.58 36.38±3.15 1.46±0.78 1.33±0.65對照組 70 27.91±7.32 22.82±4.01 26.57±9.51 29.42±2.46 1.41±0.19 1.31±0.13 t 0.938 3.998 5.926 0.867 4.056 6.512 P 0.064 0.043 0.076 0.012 0.087 0.082

2.2 兩組患者治療前后外周血、T細胞亞群變化 治療前，兩組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+無明顯差別，差異不存在統計學意義（P＞0.05），治療后，觀察組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+顯著高于對照組，差異存在統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組患者治療前后外周血、T細胞亞群變化比較（±s）

表2 兩組患者治療前后外周血、T細胞亞群變化比較（±s）

分組 例數 CD3+（%） CD4+（%） CD4+ /CD8+治療前 治療一個月后 治療前 治療后 治療前 治療后觀察組 70 50.23±7.62 68.33±0.17 33.27±3.58 43.38±3.15 0.96±0.08 1.63±0.05對照組 70 51.91±7.32 60.82±4.01 32.57±9.51 38.42±2.46 0.91±0.09 1.45±0.03 t 0.938 3.998 5.926 0.867 4.056 6.512 P 0.064 0.043 0.076 0.012 0.087 0.032

2.3 兩組肝硬度和Child-Turcotte-Pugh評分比較 治療前，兩組肝硬度和Child-Turcotte-Pugh評分無明顯差別，差異無統計學意義（P＞0.05），治療后，觀察組肝硬度和Child-Turcotte-Pugh評分顯著低于對照組，差異存在統計學意義（P＜0.05）。見表3。

表3 兩組肝硬度和Child-Turcotte-Pugh評分比較（±s）

表3 兩組肝硬度和Child-Turcotte-Pugh評分比較（±s）

組別 例數 肝硬度（kPa） Child- Pugh 評分（分）治療前 治療后 治療前 治療后觀察組 70 9.31±1.35 7.01±1.52 9.54±1.32 5.57±1.21對照組 70 9.25±1.37 8.19±1.31 9.49±1.21 7.61±1.09 t 0.782 7.892 0.693 8.638 P 0.078 0.000 0.084 0.000

2.4 兩組血清細胞因子水平對比 治療前，兩組TNF-α、hs-CRP、IL-6水平無明顯差別，差異不存在統計學意義（P＞0.05），治療后，觀察組TNF-α、hs-CRP、IL-6水平均顯著低于對照組，差異存在統計學意義（P＜0.05）。見表4。

表4 兩組血清細胞因子水平比較（±s）

表4 兩組血清細胞因子水平比較（±s）

組別 例數 TNF-α（pg/mL） hs-CRP（mg/L） IL-6（pg/mL）治療前 治療后 治療前 治療后 治療前 治療后觀察組 70 48.34±5.12 29.42±4.62 12.31±3.78 6.86±3.21 37.67±3.14 17.67±5.13對照組 70 47.51±4.96 34.56±4.26 11.45±3.26 9.12±4.14 36.61±2.89 24.67±4.15 t 0.985 8.973 0.893 7.873 0.743 8.963 P 0.892 0.001 0.783 0.001 0.763 0.001

3 討論

乙型肝炎仍然是目前臨床上難以攻克的傳染病，主要措施以預防為主。我國現在仍有較多的乙型肝炎病毒攜帶者[4]。研究顯示，乙肝病毒長期潛伏在體內，會破壞機體的免疫系統，造成肝臟炎癥的加劇，破壞正常的肝臟結構，形成肝硬化[5]。肝硬化是指肝臟彌散性的破壞，纖維結締組織受損，肝細胞死亡，形成假小葉。肝臟正常的血液循環能力受損。患者病情發展到失代償期難以徹底治療[6]。目前的治療方式主要以抗病毒為主，給予抗病毒藥物，對癥治療，減輕肝臟炎癥反應，減緩肝臟的纖維化發展，使病情穩定。但是長期服用抗病毒藥物，機體會產生耐藥性以及諸多不良反應。自體外周血干細胞移植是指將具有分化潛能的自體外周血干細胞移植進入體內，使其向肝細胞分化，恢復肝功能，但是目前對其研究仍然較少[7]。

研究結果顯示，治療后，觀察組TBIL指標顯著低于對照組，ALB顯著高于對照組。TBIL、ALB是反映肝功能的常用指標，這說明觀察組患者的肝功能得到顯著改善。分析原因為：自體外周血干細胞移植通過分化為正常的肝細胞，分泌各種生長因子，患者自身的肝功能逐步恢復[8]。觀察組的肝硬度和Child-Turcotte-Pugh評分顯著低于對照組，說明自體外周血干細胞移植能減慢肝硬化的速度，其原因可能為自體外周血干細胞可以緩解肝臟纖維化水平，能有效緩解患者的臨床癥狀，延長其生命[9]。

研究結果顯示，治療后，觀察組免疫功能得到顯著改善，CD3＋、CD4＋是淋巴細胞表面抗原，淋巴細胞是機體的免疫屏障，其水平升高，代表了機體的免疫力提高[10]。分析原因可能為：自體外周血干細胞通過修復損傷的肝細胞，恢復其功能，改善外周血T淋巴細胞亞群水平。機體發生炎癥反應釋放炎癥因子，一方面可以清除入侵的物質，但是炎癥反應過強會對機體正常細胞產生傷害。研究結果還顯示，治療后觀察組血清炎性因子水平均低于對照組，這表明自體外周血干細胞可以緩解患者體內的炎癥水平，減輕炎癥因子對肝臟的進一步傷害。

綜上所述，自體外周血干細胞移植治療乙型肝炎肝硬化患者可以顯著改善外周血T淋巴細胞亞群水平，改善肝功能，降低血清因子水平，提高臨床療效，但是由于本次研究病例數較少，關于其具體作用機制還有待繼續研究。