鐵皮石斛提取物不同極性部位對自發性高血壓大鼠血壓的影響研究

李艷華（河南科技大學附屬許昌市中心醫院,河南 許昌 461000）

鐵皮石斛是蘭科石斛屬植物的干燥莖，在我國傳統名貴中藥材，具有滋陰清熱、益胃生津的功效[1]。近年來藥理學研究表明鐵皮石斛具有多種藥理學活性，如抗氧化、降血糖和免疫調節等，其中對心血管系統性疾病具有特異性得到關注和重視[2-3]。本課題組前期對鐵皮石斛提取物(Dendrobium officinale extracts，DOe)的治療高血壓活性進行系統性的研究，發現DOe對自發性高血壓大鼠有一定療效，但同時也注意到DOe的治療高血壓的活性不是很強，故筆者開展DOe不同極性部位對自發性高血壓大鼠療效的進一步研究。匯報如下。

1 材料與方法

1.1 動物及藥材 8周齡正常Wistar大鼠和SHR大鼠均購于北京維通利華實驗動物技術有限公司，動物許可證號：SCXK(京)2020-0012，于屏障環境適應性喂養1周后進行實驗研究。

鐵皮石斛購于安徽亳州滕王藥業有限公司，批號為20020141，為干燥狀態。

1.2 試劑 石油醚、乙酸乙酯、正丁醇購于國藥化試。

1.3 儀器 超聲波清洗儀（KQ-500，昆山市超聲儀器有限公司）；無創尾動脈血壓測量儀（BP-98A，日本軟融株式會社）；HH-60L型恒溫水浴鍋（常州國華電器有限公司）。

1.4 DOe不同極性部位的制備 取鐵皮石斛干燥莖，粉碎過40目篩備用。稱取10.0kg鐵皮石斛干燥莖，純化水作為提取溶劑（料液比1∶20），浸提24h后，加熱回流提取1h，真空抽濾后濾渣重復上操作2次，最后合并濾液，得到鐵皮石斛水提液；對鐵皮石斛水提液采用不同極性溶劑進行依次萃取，依次為：石油醚、乙酸乙酯、正丁醇。減壓濃縮干燥后分別得到DOe不同極性部位粉末或浸膏，石油醚極性部位10.7g（得率為0.107%），乙酸乙酯極性部位90.6g（得率為0.906%），正丁醇極性部位140.5g（得率為1.405%）；剩余的水液減壓濃縮干燥，得到水層極性部位320.9g（得率為3.209%）。

1.5 樣品溶液的制備 實驗臨用前用純化水將DOe不同極性部位粉末或浸膏超聲混懸后，稀釋至所需的濃度，使用前需充分搖勻。

1.6 動物試驗 隨機將40只自發性高血壓大鼠分成五組，分DOe不同極性部位組和模型組，雌雄各半；8只正常Wistar大鼠為對照組，雌雄各半。模型組和對照組給予等量飲水，DOe不同極性部位組給藥劑量以生藥量計均為3.0g/kg，各組均等容量經口給藥。實驗療程為8周。

1.7 觀察指標 治療前及治療后每周監測一次給藥2h后的血壓，主要觀察指標有：體質量、收縮壓和舒張壓。

1.8 統計學方法 采用SPSS19.0軟件統計分析。組間計量數據比較采用t檢驗。P＜0.05表示差異有統計學意義。

2 結果

2.1 DOe不同極性部位對大鼠體重的影響 治療前模型組及DOe不同極性部位組體重無明顯差異（P＞0.05），說明具有可比性；各組治療前后體重均無明顯差異（P＞0.05），說明治療方式對大鼠的體重沒有明顯的影響；正常組大鼠的體重均明顯大于模型組及DOe不同極性部位組（P＜0.05），這與由于所用大鼠品系不同所致。如表1所示。

表1 DOe不同極性部位對大鼠體重的影響（±s,n=8）

表1 DOe不同極性部位對大鼠體重的影響（±s,n=8）

注：與正常組相比較，*P＜0.05。

組別 治療前體重/g 終末體重/g正常組 251.6±38.7 310.4±42.1模型組 192.7±25.8* 220.7±31.7*DOe不同極性部位組石油醚極性部位 185.4±30.7* 227.9±41.7*乙酸乙酯極性部位 190.8±26.7* 225.8±45.2*正丁醇極性部位 187.4±31.2* 234.3±54.7*水極性部位 182.8±28.4* 238.7±46.8*

2.2 DOe不同極性部位對大鼠血壓的影響 治療前的模型組和DOe不同極性部位組的血壓數值（收縮壓和舒張壓）不存在明顯差異（P＞0.05），但均明顯高于正常組大鼠（P＜0.05）；收縮壓指標比較：與本組治療前相比較，治療后僅DOe乙酸乙酯極性部位組和正丁醇極性部位組，治療后1周、4周和8周均有明顯下降（P＜0.05），且與同期模型組相比有顯著性差異（P＜0.05），同時也注意到DOe乙酸乙酯極性部位下降幅度明顯大于同期的DOe正丁醇極性部位組（P＜0.05）。舒張壓指標比較：與本組治療前相比較，治療后僅DOe乙酸乙酯極性部位組（治療后1周、4周、8周）和正丁醇極性部位組（治療后4周、8周）均有明顯下降（P＜0.05）；與同期模型組相比較，僅DOe乙酸乙酯極性部位組（治療后1周、4周、8周）和正丁醇極性部位組（治療后4周、8周）均有明顯下降（P＜0.05）；同時也注意到DOe乙酸乙酯極性部位在8周時下降幅度明顯大于同期的DOe正丁醇極性部位組（P＜0.05）。如表2、表3所示。

表2 DOe不同極性部位對大鼠收縮壓的影響（±s,n=8）

表2 DOe不同極性部位對大鼠收縮壓的影響（±s,n=8）

注：與本組治療前相比，aP＜0.05；與同期正常組相比較，bP＜0.05；與同期模型組相比較，cP＜0.05；與同期乙酸乙酯極性部位組相比，dP＜0.05。

組別 治療前/mmHg 治療1周/mmHg 治療4周/mmHg 治療8周/mmHg正常組 140.2±3.7 138.7±2.7 136.9±4.2 142.7±3.9模型組 211.2±7.9b 213.3±6.8b 215.9±9.7b 220.7±8.3ab DOe不同極性部位組石油醚極性部位 210.4±6.4b 211.7±7.7bd 209.8±12.7bd 214.6±9.8bd乙酸乙酯極性部位 205.7±7.7b 180.4±8.7abc 175.4±9.3abc 170.1±9.5abc正丁醇極性部位 209.7±6.3b 190.6±9.1abcd 184.3±6.7abcd 180.6±11.2abcd水極性部位 208.5±7.4b 209.7±6.6bd 210.8±10.1bd 215.7±8.7bd

表3 DOe不同極性部位對大鼠舒張壓的影響（±s,n=8）

表3 DOe不同極性部位對大鼠舒張壓的影響（±s,n=8）

注：與本組治療前相比，aP＜0.05；與同期正常組相比較，bP＜0.05；與同期模型組相比較，cP＜0.05；與同期乙酸乙酯極性部位組相比，dP＜0.05。

組別 治療前/mmHg 治療1周/mmHg 治療4周/mmHg 治療8周/mmHg正常組 104.3±3.2 105.7±2.9 106.4±4.1 107.7±4.7模型組 155.2±7.8b 156.3±6.7b 157.9±9.4b 158.7±8.8b DOe不同極性部位組石油醚極性部位 156.4±6.9b 157.7±7.8bd 159.8±10.7bd 158.6±8.1bd乙酸乙酯極性部位 155.7±7.8b 150.4±6.3abc 145.6±9.8abc 140.9±7.8abc正丁醇極性部位 157.7±6.8b 152.6±9.4b 148.7±6.3abc 145.3±6.1abcd水極性部位 158.5±7.9b 156.7±6.8bd 157.8±9.5bd 159.7±9.0bd

3 討論

鐵皮石斛在我國有較廣泛的分布，作為一種名貴中藥材，有悠久的用藥歷史，臨床上多用于陰液不足和改善氣陰兩虛的治療，中醫認為高血壓是陰虛陽亢的熱性疾病，從機理分析有對因治療的作用。鐵皮石斛化學成分較為復雜，主要有生物堿、多糖、茋類、氨基酸等[4-7]。

本課題組前期對DOe抗高血壓活性進行研究，發現有一定活性，但用量較高；筆者對DOe通過萃取得到不同極性部位，發現DOe乙酸乙酯部位活性最高，在生藥量計3.0g/kg就有明顯的生物活性，此時以萃取物的用量計約30mg/kg。但DOe乙酸乙酯部位其中化學成分也較為復雜，有些化合物可能并不具有抗高血壓活性。這些都十分值得進一步的深入研究，這也是本課題組下一步的主要研究方向。

綜上所述，DOe乙酸乙酯部位對自發性高血壓大鼠有較高的抗高血壓活性，其中可能相應機制需進一步的研究。