李金龍,宋 欣,陳 薇
術中快速冷凍病理技術是病理科常規技術操作之一,因其診斷快速、準確而頗受臨床醫師的認可。北方地區冬季干燥,大部分醫院病理科技師在切片過程中產生靜電,切片后進行貼片時,組織切片在靜電作用下吸附在玻片上,造成貼片后組織出現皺縮、粘連甚至斷裂現象,影響制片效果及病理診斷的準確性。本科室對術中快速冷凍的全流程進行探討和實踐,發現一種減少術中冷凍貼片過程中玻片靜電的方法,現介紹如下。
1.1 材料日本櫻花Tissue-Tek Polar冷凍切片機,載玻片,AAF固定液(95%乙醇85 mL+40%濃甲醛10 mL+冰醋酸5 mL),毛筆,染色缸,顯微鏡。
1.2 方法用冷凍切片機切取組織后,將已標記病理號的載玻片末端微貼進固定液液面下(圖1),再用載玻片貼片已經切好的組織薄片。

圖1 將已標記病理號的載玻片末端微貼進固定液液面下
實驗結果發現,在貼片過程中幾乎無靜電作用的發生,貼片位置一般位于載玻片中央位置,不會觸及微浸入固定液面下的部分載玻片,組織切片不會因靜電作用主動吸附在準備貼片的載玻片上,鏡下無因靜電作用而引起的褶皺、粘連甚至斷裂現象(圖2),效果良好。

圖2 A.貼片過程中因靜電作用導致切片染色后鏡下出現裂隙、褶皺;B.貼片過程中消除靜電作用,切片染色后鏡下未見裂隙、褶皺
術中快速冷凍制片技術在病理科中的應用十分重要,掌握并熟練使用術中快速冷凍制片技術,可以在短時間內快速、準確的得到一張近乎于常規的染色切片,對疾病的診斷方向判斷,手術方式的選擇等方面均有極大的幫助,因此,在日常工作中極受臨床醫師的認可,但同時也對病理醫師和技師提出了更高的要求,優秀的病理醫師做出準確的病理診斷依賴于優質的病理切片,而一張優質的術中快速冷凍病理切片應該在制片染色效果上無限接近于常規病理切片的染色效果。北方冬季氣候寒冷干燥,當濕度低于40%時,切片常因靜電現象,導致切片困難和切片的組織薄片粘連或出現裂隙、褶皺、顫痕和切片速度慢等問題[1-2],影響制片質量從而影響病理醫師診斷的準確性。
在常規制片過程中,大部分北方醫院的病理科實驗室常常采用配備的加濕器或購買廠家自帶的加濕設備來減少或消除常規制片過程中所產生的靜電問題,使用效果良好,但在術中冷凍切片機中由于制片環境局限及其他細節因素的影響,無法使用加濕設備,有實驗者[3]曾采用摘掉手套用人體導電的方法來減少或消除冷凍切片機的靜電問題,存在較大的衛生安全問題,且不符合操作技術規范要求,因此筆者并不提倡使用該方法,考慮到導電問題,采用載玻片先浸入固定液導電再貼片組織的方法來消除或減少靜電,一方面原本載玻片貼片組織后就需要放入固定液中固定不會對載玻片和組織造成污染,另一方面可以利用固定液中液體的導電性消除或減少部分靜電問題,一舉兩得,簡單易行,效果良好,值得推廣。