RF、Ig、ANA與抗ENA抗體檢測在類風濕關節炎患者診斷及預后分析中的價值

趙嬋媛，聞苗苗

陜西省西安市第五醫院檢驗科，陜西西安 710082

類風濕關節炎(RA)為一種常見的自身免疫性疾病，在我國發病率為0.28%～0.42%[1]。目前，RA診斷主要根據患者的臨床表現，如長時間晨僵、關節炎癥、疼痛、腫脹、功能障礙等，但早期RA往往不具有典型癥狀，臨床中難以做出準確判斷[2]。類風濕因子(RF)是最早用于RA診斷的血清學指標，靈敏度較高但特異度較差，使得其在RA診斷中應用受限[3]。免疫球蛋白(Ig)是具有抗體活性或化學結構與抗體相似的球蛋白的統稱，對RA診斷具有重要意義[4]。近年來多種和RA相關的抗體被發現，如抗核抗體(ANA)、抗可提取性核抗原多肽(ENA)抗體等，被認為是RA早期即出現的特異性抗體，對RA具有較高的診斷價值[5]。因此，本研究檢測了RA患者和非RA患者、體檢健康者血清RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體水平差異，旨在探討以上指標對RA的診斷及預后評估的價值，現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年6月至2020年6月本院收治的71例RA患者(RA組)、55例非RA自身免疫性疾病患者(非RA組)為研究對象。RA組納入標準：(1)均符合RA診斷標準[6]；(2)初治患者。排除標準：(1)其他風濕性疾病、自身免疫性疾病患者；(2)惡性腫瘤患者；(3)合并心、肝、腎等嚴重功能障礙患者；(4)妊娠、哺乳期患者；(5)急性感染性疾病患者。RA組中男32例、女39例，年齡35～65歲、平均(51.09±12.57)歲。非RA組均明確診斷為相應非RA自身免疫性疾病，其中男25例、女30例，年齡33～64歲、平均(50.84±12.88)歲，包括33例系統性紅斑狼瘡、14例混合性結締組織病、8例干燥綜合征。并選取30例同期體檢健康者作為對照組，其中男14例、女16例，年齡34～65歲、平均(51.42±11.94)歲。3組受檢者性別、年齡等資料比較，差異無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。

1.2方法

1.2.1治療方法 RA組患者接受3個月的標準化治療[7]，氨甲蝶呤(生產廠家：上海上藥信誼藥廠有限公司；批準文號：國藥準字H31020644；規格：每片2.5 mg，共100片；用法用量：口服，每次5～10 mg，1次/天，1～2次/周)、來氟米特(生產廠家：江蘇亞邦愛普森藥業有限公司；批準文號：國藥準字H20080420；規格：每片10 mg，共10片；用法用量：口服，每次20 mg，1次/天)、柳氮磺吡啶(生產廠家：北京嘉林藥業股份有限公司；批準文號：國藥準字H20054246；規格：0.25 g；用法用量：口服，每次0.5 g，3次/天)，并在醫師指導下適量補充維生素D。

1.2.2檢測方法 抽取3組受檢者空腹狀態靜脈血5 mL(RA組為入院時及治療3個月后，非RA組及對照組均為入院時抽取)，3 000 r/min離心處理10 min，分離血清，-80 ℃保存待檢。采用免疫比濁法檢測待測標本中RF、IgA、IgG、IgM水平，RF試劑盒購自深圳市生科源技術有限公司；IgA、IgG、IgM試劑盒購自山東博科生物產業有限公司，檢測儀器為貝克曼庫爾特AU5800全自動生化分析儀；采用間接免疫熒光法檢測待測標本中ANA水平，試劑盒購自德國歐蒙醫學實驗診斷股份公司；采用免疫印跡法檢測待測樣本中抗ENA抗體水平，試劑盒購自德國歐蒙醫學實驗診斷股份公司。嚴格按照試劑盒說明書進行操作。

結果判讀：RF、IgA、IgG、IgM為定量分析，ANA、抗ENA抗體為定性分析。RF>20 IU/mL判定為陽性；IgA、IgG、IgM參考范圍：0.69～3.82 g/L、7.23～16.85 g/L、0.63～2.77 g/L；ANA滴度≥1∶100判定為陽性；抗ENA抗體滴度≥1∶80判定為陽性。

1.2.3預后評估及分組 RA組患者接受3個月標準化治療后，采用RA 28個關節病情活動評分表(DAS28)評估其預后[8]，其中DAS28評分≤3.2分代表疾病緩解，納入緩解組(45例)；DAS28評分>3.2分代表疾病活動，納入活動組(26例)。DAS28評分=(0.70×紅細胞沉降率+0.28×腫脹關節數+0.56×壓痛關節數)×1.08+0.16。

2 結 果

2.13組受檢者血清RF、抗ENA抗體、ANA陽性率及IgA、IgG、IgM水平比較 RA組患者血清RF陽性率明顯高于非RA組患者及對照組，而血清ANA、抗ENA抗體陽性率雖高于對照組，但明顯低于非RA組患者，差異有統計學意義(P<0.05)；RA組患者血清IgA、IgG、IgM水平明顯高于非RA組患者及對照組，差異有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 3組受檢者血清RF、抗ENA抗體、ANA陽性率及IgA、IgG、IgM水平比較

2.2RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體單獨及多項聯合檢測對RA的診斷價值 ROC曲線顯示，檢測血清RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體對RA具有一定診斷價值，見表2。將RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體進行聯合檢測，結果顯示，聯合檢測的診斷價值均高于RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體單項檢測，見表2。

表2 RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體單獨及聯合檢測對RA的診斷價值

2.3不同預后的RA患者血清RF、ANA、抗ENA抗體陽性率及IgA、IgG、IgM水平比較 緩解組患者血清RF、ANA、抗ENA抗體陽性率及IgA、IgG、IgM水平均明顯低于活動組患者，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 不同預后的RA患者血清RF、ANA、抗ENA抗體陽性率及IgA、IgG、IgM水平比較

2.4RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體對RA患者預后的評估價值 ROC曲線顯示，血清RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體對RA患者預后具有一定評估價值。將RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體進行聯合檢測，結果顯示，聯合檢測以上指標評估RA患者預后的價值均高于各指標單獨檢測，見表4。

表4 RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體單獨及聯合檢測對RA患者預后的評估價值

3 討 論

早期診斷RA一直以來是醫學界研究熱點。隨著現代醫學不斷發展，越來越多實驗室指標應用于RA早期診斷中，但診斷效能不盡相同[9]。RF是最早用于診斷RA的血清學指標，也是美國風濕病學會(ACR)在RA診斷標準中提出唯一的血清學指標。因其靈敏度高，目前仍為診斷RA的有效指標之一，但由于該指標還可在其他自身免疫性疾病、慢性感染性疾病中表達，因此缺乏特異性，使其在RA早期診斷中使用受限。本研究中RF在RA組患者中陽性率明顯高于非RA組患者及對照組，ROC曲線顯示，其診斷RA的靈敏度為74.6%，特異度僅為68.8%，與國內相關研究結果一致[10]。龍欣[11]研究表明，RA患者常出現免疫功能紊亂，動態監測血清Ig水平對RA病情進展及預后具有重要評估價值。Ig可分為IgA、IgD、IgE、IgG、IgM，通常檢測IgA、IgG、IgM這3類Ig就可以代表血清Ig的水平。Ig是調節體液免疫重要因子，而體液免疫紊亂被認為和RA發生有關[12]。本研究結果顯示，RA患者血清IgA、IgG、IgM水平明顯高于非RA患者及對照者，ROC曲線顯示，IgA、IgG、IgM診斷RA的靈敏度均較低，但特異度均較高，說明檢測RA患者血清IgA、IgG、IgM水平可對RA診斷起輔助作用[13]。ANA為近年來診斷RA的常用指標之一，在不同類型疾病中表達存在明顯差異。AHRARI等[14]報道，ANA診斷RA的靈敏度為95.0%，特異度僅為30.0%，對RA具有一定輔助診斷價值。本研究中，RA組患者血清ANA陽性率雖明顯高于對照組，但亦顯著低于非RA組患者，差異有統計學意義(P<0.05)；ROC曲線顯示，ANA診斷RA的靈敏度較高，但特異度較低，提示ANA不能作為RA診斷的特異性指標，但可用于RA輔助診斷。抗ENA抗體是細胞中由小分子RNA及多肽構成的核中非組蛋白總稱，包括數十種蛋白多肽抗原，其中抗干燥綜合征A抗原抗體(抗SS-A抗體)、抗干燥綜合征B抗原抗體(抗SS-B抗體)、抗Sm抗體、抗nRNP抗體最為常用。不同類型自身免疫性疾病會產生不同抗ENA抗體，因此檢測抗ENA抗體在自身免疫性疾病診斷、鑒別診斷中具有關鍵作用[15]。本研究結果顯示，單獨檢測抗ENA抗體在RA組患者血清中陽性率雖高于對照組，但明顯低于非RA組患者，差異有統計學意義(P<0.05)；ROC曲線顯示，抗ENA抗體診斷RA的靈敏度尚可，但特異度較差，表明抗ENA抗體能用作RA篩查指標，但單獨檢測診斷RA的效果不理想。

以上結果表明，RF、Ig、ANA、抗ENA抗體單獨檢測診斷RA均存在一定局限性，而當上述指標聯合檢測時發現，聯合檢測的靈敏度、特異度均較單獨檢測顯著提高，且檢測經濟方便，可用于早期診斷RA。此外，本研究還發現，相對于活動組患者，緩解組患者血清RF、ANA、抗ENA抗體陽性率及IgA、IgG、IgM水平均明顯降低(P<0.05)，提示可反映RA患者預后情況。進一步ROC曲線分析顯示，RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體單獨檢測評估RA患者預后的靈敏度均較高，但特異度均較低，聯合檢測評估RA患者預后的特異度較高，說明聯合檢測RF、IgA、IgG、IgM、ANA、抗ENA抗體可作為RA患者預后評估的方法。

綜上所述，檢測RF、Ig、ANA與抗ENA抗體可用于RA的輔助診斷及預后評估，且當上述指標聯合檢測時診斷及預后評估價值更高。