參斛湯對前列腺癌患者術(shù)后病灶及血清microRNA-301a-3p水平的影響

楊靜，李曉天，陳品金

（1.鄭州大學(xué)藥學(xué)院，河南鄭州 450000；2.鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院泌尿外科，河南鄭州 450003）

前列腺癌是臨床常見的男性泌尿生殖系統(tǒng)惡性腫瘤，多發(fā)于中老年男性，其發(fā)病率較高，且與年齡呈正相關(guān)[1]。目前臨床對于前列腺癌的發(fā)病機(jī)制尚未完全闡明，多數(shù)學(xué)者認(rèn)為與遺傳、種族、年齡、肥胖、性激素等因素有關(guān)[2]。該病早期病情隱匿，多數(shù)患者確診時(shí)已至中晚期，臨床上治療此類患者以手術(shù)根治為主，并于術(shù)后進(jìn)行化學(xué)治療（以下簡稱化療）以提高療效，降低復(fù)發(fā)率。但術(shù)后化療對患者免疫功能造成一定損傷，易引發(fā)嚴(yán)重不良反應(yīng)[3]。近年來，隨著中醫(yī)藥的興起，部分學(xué)者將中西醫(yī)結(jié)合作為治療腫瘤疾病的新方向。多項(xiàng)研究指出，參斛湯可有效減少膀胱癌、食管癌等化療帶來的不良反應(yīng)，并可對腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生抑制作用，改善預(yù)后[4-5]。基于此，本研究通過對95 例接受根治術(shù)的前列腺癌患者術(shù)后進(jìn)行分組治療，探討參斛湯對前列腺癌術(shù)后病灶進(jìn)展及血清miRNA-301a-3p 水平的影響。現(xiàn)報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2020年2月—2021年3月就診于鄭州大學(xué)第一附屬醫(yī)院的95 例前列腺癌患者，按隨機(jī)數(shù)表法分為對照組（47 例）和研究組（48 例）。對照組患者年齡48～72 歲，平均（65.36±4.23）歲；鱗癌11 例，腺癌36 例；卡氏評分62～72 分，平均（66.34±2.41）分。研究組患者年齡49～73 歲，平均（66.01±4.16）歲；鱗癌10 例，腺癌38 例；卡氏評分63～72 分，平均（66.15±2.36）分。西醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照2011 版《中國泌尿外科疾病診斷治療指南》[6]中前列腺癌診斷標(biāo)準(zhǔn)，且經(jīng)前列腺穿刺活檢確診。中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：參照2011 版《中醫(yī)腫瘤學(xué)》[7]，主癥：尿流變細(xì)，點(diǎn)滴不通或排出無力，頭暈眼花，消瘦貧血，倦怠乏力，心悸怔仲，動(dòng)則氣促；次癥：腰痛，潮熱盜汗，食欲下降；舌脈象：舌紅，苔少或無苔。2 項(xiàng)主癥+1 項(xiàng)次癥+1 項(xiàng)舌脈象可診斷為前列腺癌氣陰兩虛證。納入標(biāo)準(zhǔn)：①符合以上西醫(yī)、中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)；②年齡≤75 歲；③TNM 分期Ⅲ、Ⅳ期；④預(yù)計(jì)生存期＞6 個(gè)月；⑤卡氏評分＞60 分；⑥自愿簽署知情同意書；排除標(biāo)準(zhǔn)：①合并其他重要器官惡性腫瘤者；②合并免疫功能障礙者；③術(shù)前已接受放射治療、化療者；④術(shù)后恢復(fù)不佳者；⑤治療依從性較差者。兩組一般資料比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05），可對比。

1.2 方法

患者均接受經(jīng)尿道前列腺癌根治術(shù)，對照組術(shù)后第2 天接受常規(guī)化療，即靜脈滴注紫杉醇注射液（四川匯宇制藥股份有限公司，國藥準(zhǔn)字H20203702），劑量75 mg/m2，3 周1 次；醋酸潑尼松片（天津柏海藥業(yè)有限責(zé)任公司，國藥準(zhǔn)字H12020364）5 mg，口服，2 次/d，21 d 為1 個(gè)療程。研究組在對照組基礎(chǔ)上增加參斛湯，即術(shù)后第2 天開始服用參斛湯，藥方組成：生曬參15 g，黃精、天花粉、雞血藤、墨旱蓮、女貞子各12 g，石斛、黃芪、連翹、豬苓各10 g，馬鞭草、生地黃、姜半夏各8 g，甘草、石葦、藕節(jié)、半枝蓮各6 g，雞內(nèi)金9 g，薏苡仁、麥冬各20 g；對于乏力嚴(yán)重患者可增加黃芪至30 g；對于失眠嚴(yán)重患者可加茯神9 g，蓮子心12 g，炒酸棗仁15 g；對于嘔吐嚴(yán)重患者可加竹茹10 g，生姜3 段；加水煎服，1 劑/d，早晚分服，21 d 為1個(gè)療程。兩組患者治療周期均為5 個(gè)療程。

1.3 評價(jià)指標(biāo)

①術(shù)后病灶進(jìn)展情況：所有患者術(shù)后每3 個(gè)月至醫(yī)院復(fù)查1 次，比較兩組術(shù)后局部病灶進(jìn)展時(shí)間、發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移時(shí)間，開始時(shí)間為術(shù)后第2 天，截止時(shí)間為局部出現(xiàn)腫瘤或發(fā)生遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移。②血清學(xué)指標(biāo)：于治療前、治療后6 個(gè)月采集兩組患者肘正中靜脈血5 ml，離心后取上層血清保存待測。采用發(fā)射免疫法對前列腺特異性抗原（PSA）、游離前列腺特異性抗原（f-PSA）水平進(jìn)行測定，并計(jì)算游離前列腺特異抗原百分率（FPSAR），F(xiàn)PSAR=f-PSA/PSA。采用化學(xué)發(fā)光免疫法測定血清腫瘤相關(guān)物質(zhì)（TAM）。采用實(shí)時(shí)熒光定量聚合酶鏈反應(yīng)（RT-PCR）對microRNA-301a-3p（miR-301a-3p）相對表達(dá)量進(jìn)行檢測。RT-PCR反應(yīng)體積20 μl，反應(yīng)條件：95℃預(yù)變性3 min，95℃變性15 s，60℃退火15 s，共40 個(gè)循環(huán)。內(nèi)參基因?yàn)镚APDH，計(jì)算Ct值，采用2-△△Ct法檢測miR-301a-3p 相對表達(dá)量。引物合成自廣州伯信生物科技有限公司，miR-301a-3p 正向引物：5’-AGCACCTTCGGAAGTCTCC CG-3’，反向引物：5’-ATGGGAGCACAATACCAC AGCAA-3’，分別為14 bp 和16 bp；GAPDH 正向引物：5'-CGGAGTCAACGGATTTGGTCGTAT-3'，反向引物：5'-AGCCTTCTCCATGGTGGTGAAGAC-3'，分別為15 和16 bp。③免疫功能：血清采集方法同上，采用Attune NxT 流式細(xì)胞儀（賽默飛世爾科技中國有限公司）檢測T 淋巴細(xì)胞亞群CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平。④不良反應(yīng)：比較兩組治療后不良反應(yīng)發(fā)生情況，包括發(fā)熱、胃腸道反應(yīng)、口腔黏膜炎、肝功能損傷等。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法

數(shù)據(jù)分析采用SPSS 23.0 統(tǒng)計(jì)軟件，計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差（±s）表示，比較用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率（%）表示，比較用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組患者術(shù)后病灶進(jìn)展情況比較

兩組患者局部病灶進(jìn)展時(shí)間、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移時(shí)間比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），研究組較對照組長。見表1。

表1 兩組患者術(shù)后病灶進(jìn)展情況比較 （月，±s）

表1 兩組患者術(shù)后病灶進(jìn)展情況比較 （月，±s）

組別對照組研究組t 值P 值n 47 48局部病灶進(jìn)展時(shí)間12.24±1.66 15.48±2.01 8.557 0.000遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移時(shí)間13.11±1.80 15.82±2.14 6.673 0.000

2.2 兩組患者治療前后血清學(xué)指標(biāo)比較

兩組患者治療前血清PSA、FPSAR、TAM、miR-301a-3p表達(dá)水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組治療后血清PSA、FPSAR、TAM、miR-301a-3p 表達(dá)水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），研究組FPSAR 高于對照組，PSA、TAM、miR-301a-3p低于對照組。見表2。

表2 兩組患者治療前后血清學(xué)指標(biāo)比較 （±s）

表2 兩組患者治療前后血清學(xué)指標(biāo)比較 （±s）

組別n PSA/（μg/L）治療前32.43±8.34 32.89±8.26 0.270 0.788治療后8.46±2.57 5.19±2.13 6.758 0.000 FPSAR/%治療前14.24±5.12 14.39±5.06 0.144 0.886治療后17.31±5.52 20.12±6.48 2.273 0.025 TAM/（u/ml）治療前110.46±16.97 109.83±16.60 0.183 0.855治療后82.17±11.23 75.14±10.29 3.182 0.002對照組研究組t 值P 值47 48 miR-301a-3p治療前5.62±1.24 5.53±1.29 0.347 0.729治療后2.59±0.91 2.01±0.88 8.158 0.034

2.3 兩組患者治療前后免疫功能比較

兩組患者治療前CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＞0.05）。兩組治療后CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平比較，差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05），研究組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較對照組高，CD8+較對照組低。見表3。

表3 兩組患者治療前后免疫功能比較 （±s）

表3 兩組患者治療前后免疫功能比較 （±s）

組別n CD3+/%治療前55.16±3.54 55.37±3.46 0.292 0.771治療后52.35±3.31 60.06±4.03 10.178 0.000 CD4+/%治療前35.64±2.34 35.27±2.40 0.761 0.449治療后33.39±2.26 38.72±2.89 9.946 0.000 CD8+/%治療前28.94±1.86 28.67±1.80 0.719 0.474治療后30.09±1.97 26.14±1.65 10.603 0.000對照組研究組t 值P 值47 48 CD4+/CD8+治療前1.22±0.41 1.25±0.39 0.365 0.716治療后1.17±0.35 1.40±0.63 2.193 0.031

2.4 兩組患者不良反應(yīng)比較

兩組患者不良反應(yīng)總發(fā)生率比較，差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（χ2=1.176，P=0.278）。見表4。

表4 兩組患者不良反應(yīng)比較 例（%）

3 討論

化療是臨床治療前列腺癌的重要手段之一，可有效延長患者生存時(shí)間并提高生存質(zhì)量[8]。為降低前列腺癌根治術(shù)后復(fù)發(fā)及轉(zhuǎn)移風(fēng)險(xiǎn)，臨床常在中晚期前列腺癌患者術(shù)后給予化療，但化療必然伴隨著一定程度的副作用。以往多項(xiàng)研究已證實(shí)，中醫(yī)在治療癌癥方面具有獨(dú)特優(yōu)勢，在緩解臨床癥狀、抑制病灶進(jìn)展、改善患者生存質(zhì)量等多方面可發(fā)揮積極作用[9]。故中西醫(yī)結(jié)合治療前列腺癌成為目前臨床研究熱點(diǎn)。

前列腺癌在中醫(yī)上屬“尿血”、“虛勞”、“癃閉”、“積聚”、“血淋”等范疇，本虛標(biāo)實(shí)是其病機(jī)，情志抑郁、飲食不節(jié)、臟腑虧虛、六淫邪毒等因素可引發(fā)正氣虧虛，痰凝氣阻，長此以往致使癌毒衍生[10]。前列腺癌晚期多采用手術(shù)聯(lián)合化療，化療屬火熱之毒，對人體氣陰易造成損傷，故氣陰兩虛型是晚期前列腺癌最常見證型[11]。氣虛主要為脾氣虛，脾胃氣血生化之源，胃主納食，脾胃運(yùn)化乏力，致使正氣虧虛，且水濕內(nèi)停，繼而生痰；陰虛主要為腎陰虛，腎陰虧虛致使內(nèi)生虛火，灼津?yàn)樘担惶稻脛t癌毒衍生，阻于前列腺則發(fā)為氣陰兩虛型前列腺癌[12]。對此證型前列腺癌患者的治療應(yīng)以扶正驅(qū)邪、益氣養(yǎng)陰為主。參斛湯是一種傳統(tǒng)中醫(yī)方劑，常用于膀胱癌、食管癌、胃癌等疾病的輔助治療，可抑制病灶進(jìn)展，提高生存質(zhì)量，其療效已得到廣泛證實(shí)，但在前列腺癌的輔助治療中應(yīng)用較少。本研究結(jié)果顯示，研究組局部病灶進(jìn)展時(shí)間、遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移時(shí)間較對照組長，治療后研究組CD3+、CD4+、CD4+/CD8+較對照組高，CD8+較對照組低，提示參斛湯用于前列腺癌術(shù)后可對病灶進(jìn)展產(chǎn)生抑制，并改善患者免疫功能。究其原因在于，參斛湯方中生曬參可補(bǔ)元?dú)狻⒀a(bǔ)脾益肺、生津止渴，常用于治療氣虛、久咳、津虧口渴等氣血津液不足之癥；且現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，生曬參中含有大量人參皂苷，口服時(shí)均為前藥，血液難以直接吸收，經(jīng)腸道生物催化下可生成次生皂苷Rh2、Rh1、CK 等，進(jìn)入血液發(fā)揮抗腫瘤的藥效，對腫瘤細(xì)胞可產(chǎn)生抑制，并誘導(dǎo)其凋亡[13]。黃芪有補(bǔ)氣固表之功，可治氣虛乏力；且現(xiàn)代藥理證實(shí)，黃芪可對機(jī)體代謝能量、蛋白質(zhì)的合成起到促進(jìn)作用，提高機(jī)體抗病能力，且可加速白細(xì)胞介素的合成，激活淋巴因子，提高機(jī)體抗腫瘤活性，抑制腫瘤細(xì)胞的生長[14]。黃精有健脾、補(bǔ)氣、養(yǎng)陰、益腎之功效，可治脾胃氣虛、精血不足、內(nèi)熱消渴；且黃精中含有黃精多糖，而其對腫瘤細(xì)胞具有抑制作用，可對細(xì)胞周期分布產(chǎn)生影響，通過Caspase 系統(tǒng)對腫瘤細(xì)胞凋亡起到誘導(dǎo)作用[15]。石斛具有養(yǎng)陰、生津之功效，可治陰虛內(nèi)虧之證；天花粉具有清熱瀉火、生津止渴之功效，與滋陰藥合用，可標(biāo)本兼治；半枝蓮具有清熱、化瘀之功效；薏苡仁則有健脾、瀉熱、燥濕之效；連翹、石葦可利尿利濕、清熱通淋；麥冬有益氣養(yǎng)陰之功，可治氣陰兩虛所致排尿困難、小便澀痛；甘草調(diào)和諸藥。全方攻補(bǔ)兼?zhèn)洌ザ粨p、補(bǔ)而不滯、生津而不助濕，共奏補(bǔ)氣養(yǎng)陰、祛痰生津之功效[16]。

微RNA 是非編碼RNA，是近年來疾病診斷、預(yù)后評估的新型標(biāo)志物。已有多項(xiàng)研究指出，miR-301a-3p 在胰腺癌、結(jié)直腸癌、喉癌、乳腺癌等多種腫瘤中表達(dá)異常[17]。ZHANG 等[18]研究提出，miR-301a-3p 可通過抑制PTEN 促進(jìn)食管鱗狀細(xì)胞癌細(xì)胞增殖。ZHANG 等[19]研究也指出，miR-301a-3p 在SW620、HT29 細(xì)胞系及結(jié)直腸癌組織中呈異常高表達(dá)，且miR-301a-3p 的異常表達(dá)與癌細(xì)胞的增殖、侵襲密切相關(guān)。趙琪等[20]研究指出，TAM 在前列腺癌的診斷中具有較高價(jià)值，與PSA 聯(lián)合檢測可提升診斷特異性。本研究結(jié)果顯示，研究組治療后血清PSA、TAM、miR-301a-3p 表達(dá)水平均低于對照組，F(xiàn)PSAR 高于對照組，提示參斛湯用于前列腺癌輔助治療可有效抑制腫瘤生長，改善腫瘤標(biāo)志物水平，抑制miR-301a-3p 表達(dá)，但具體作用機(jī)制仍需進(jìn)一步研究。

綜上所述，參斛湯用于前列腺癌術(shù)后治療可有效抑制病灶進(jìn)展，提高免疫功能，抑制miR-301a-3p 表達(dá)，但在減少術(shù)后化療不良反應(yīng)方面未見明顯優(yōu)勢。