一例奶山羊破傷風的診斷和防治

高 雅，智 宇，劉佳利，張承天，斯 慶，孟 克，郝學峰，王金玲*

(1.內蒙古農業大學獸醫學院和農業農村部動物疾病臨床診療技術重點實驗室，內蒙古 呼和浩特010018;2.內蒙古自治區農牧業科學研究院，內蒙古 呼和浩特010031；3.鄂爾多斯市烏審旗嘎魯圖鎮人民政府，內蒙古 嘎魯圖017300；4.鄂爾多斯市伊金霍洛旗動物疫病預防控制中心，內蒙古 鄂爾多斯017200)

破傷風，是由破傷風梭狀芽胞桿菌（Clostridium Tetanus）引起的急性、創傷性、中毒性疾病，破傷風梭狀芽胞桿菌屬于梭菌屬的成員[1]。破傷風的流行對養殖業具有巨大危害。目前對破傷風有大量治療和預防的報道，但對于其特征性的病理學觀察描述較為有限。本研究通過臨床病史、大體病變、組織病理學變化、觸片檢查和毒素實驗綜合診斷了一例羊破傷風，并采取有效措施，進行防治。

1 臨床病史

內蒙古自治區某奶山羊養殖場于2021年2月13號進行全群打耳標，于15 d后開始散在發病，臨床癥狀表現為易驚，走路僵直，呼吸加快，發病后3 d出現角弓反張，牙關緊咬的癥狀，最后死亡。病程3～5 d。至2021年3月5號已發病和死亡5只羊。發病期間使用青霉素、磺胺類藥物治療均無治愈效果。疫苗免疫情況為布病、小反芻獸疫、三聯苗、口蹄疫和傳染性胸膜肺炎均已接種。

2 大體病變

左耳近耳根處皮膚被耳標磨出一個較深的大潰瘍灶（圖1），耳標孔邊緣皮膚明顯腫脹、充血，創面附著少量壞死組織（圖2）。心臟呈向心性肥大，特別是左右心室壁增厚明顯，心室腔明顯縮小，心內膜彌散分布大小不等的出血點。肝臟呈彌漫性的土黃色。腦組織水腫，有大量清亮的腦脊液流出。其他組織器官眼觀無明顯病變。

圖1 耳標周圍皮膚呈現環形潰瘍

圖2 耳標孔周圍組織充血和腫脹，耳標磨損形成潰瘍

3 病理變化

耳孔邊緣表面形成薄層環狀的結痂和炎癥反應帶，組織深部可見有大量肉芽組織（圖3）。肉芽組織中有明顯的充血、出血水腫以及中性粒細胞浸潤。心肌纖維彌散出血形成出血灶。肝組織出現明顯水腫，狄氏腔顯現，肝細胞普遍發生顆粒變性，少部分肝細胞發生大泡性脂肪變性；靠近間質處的肝細胞部分壞死。脾臟靠近被膜處紅髓、白髓結構紊亂，有大面積出血。出血灶內有大量吞噬含鐵血黃素的巨噬細胞彌散出現。淋巴結中部分淋巴小結的生發中心可見淋巴細胞散在壞死，表現為核破碎。腎小管上皮細胞普遍發生顆粒變性，髓質處的腎小管水腫與基底膜分離。小腦浦肯野細胞層出現單個散在性細胞壞死，小腦髓質神經纖維發生脫髓鞘現象。大腦髓質血管周圍形成數個出血灶。

圖3 耳孔邊緣表面形成薄層環狀的結痂和炎癥反應

4 觸片檢查

在耳標孔邊緣切面制備觸片，自然干燥，革蘭氏染色，油鏡觀察。觀察到大量呈單個或成對存在，局部多個菌體連接成鏈狀的兩頭鈍圓的革蘭氏陽性粗大桿菌（圖4）。

圖4 觸片上大量兩頭鈍圓的革蘭氏陽性粗大桿菌

5 毒素檢查實驗

無菌取少量耳標孔附近的炎癥組織，加少量生理鹽水進行研磨，所得研磨液置于1.5 mL離心管中，以5000 r／min離心10 min，取上清液0.3 mL腹腔注射3只小白鼠，實時觀察。接毒2 h后小鼠均出現精神沉郁、運動障礙、痙攣、弓腰、后腿和尾根僵直的神經癥，5~8 h 3只實驗小白鼠均死亡。

6 診斷

通過臨床病史、尸體剖檢、病理組織學、觸片檢查和毒素檢查實驗綜合診斷為奶山羊破傷風。

7 防治方案

給羊佩帶標識時，必須按照規定的無菌操作程序進行，防止污染。佩戴耳標時建議耳標向外，并遠離耳根部。同時也要注意其他因素導致傷口的形成，為防止羊群因傷口感染破傷風梭菌，對羊群早期進行注射破傷風血清。根據羊群的體質可一次足量的注射，一般用在20萬～80萬單位；也可以總量分3次注射，皮下、肌肉或靜脈注射均可，抗破傷風血清在羊體內可保留2周左右。同時在養殖過程中，堅持和加強衛生消毒工作，加強日常飼養管理，避免羊只發生外傷。飼養員每天對羊群進行檢查，如有發現外傷及時處理[2]。

對于發病羊建議及時清除壞死組織和耳標，傷口采用3%雙氧水溶液沖洗創口，再用5%碘酊對創面進行消毒，同時結合抗生素治療[3]。發現病羊后立刻將病羊隔離至干燥清潔、通風良好的圈舍，及時清理病羊羊舍，并采用10%漂白粉溶液對羊舍環境和水槽、料槽等用具進行消毒處理，第一時間杜絕該病的傳染源[4]。

8 討論

破傷風病是由外傷感染破傷風梭菌引起的一種急性中毒性疾病。本病的臨床特征主要表現為牙關緊閉、局部或全身肌肉呈持續性強直和陣發性痙攣，對外界刺激反射性增高，多死于窒息及全身性衰竭，病死率很高[5]。本例奶山羊表現為易驚，走路僵直，呼吸加快并伴有角弓反張的癥狀。與文獻報道一致。關于破傷風病理學變化未檢索到相關報道，本研究通過尸體剖檢和病理組織學觀察到在病死羊耳部打耳標處周圍組織明顯壞死和潰瘍，心臟肥大，實質器官均有損傷性的變化。

破傷風梭狀芽胞桿菌經創口感染后產生毒素對動物造成傷害。該菌為厭氧革蘭氏陽性桿菌，有鞭毛，能運動，無莢膜，能形成芽胞，芽孢在菌體一端，形似鼓錘狀[6]。該菌廣泛存在于自然界的土壤、塵土、糞便中等。本例取奶山羊耳部損傷處組織進行觸片后革蘭氏染色觀察菌體形態，觀察到有許多單個或成對存在，有些呈長絲狀排列的兩頭鈍圓的革蘭氏陽性桿菌。與破傷風梭菌形態一致。并通過毒素檢查實驗，小鼠在2 h后出現神經癥狀并在5~8 h死亡，說明耳部損傷處皮膚有毒素存在。

破傷風梭菌的繁殖體對外界的抵抗力不強，但該病菌的芽孢體具有很強的抵抗力，在土壤中能存活幾十年。可因外傷或斷臍、去勢、斷角、帶耳標等經傷口進入體內[7]。本例病羊通過臨床病史和尸體剖檢除耳部打耳標處未在其他組織器官發現損傷，并且據畜主介紹該群羊陸續出現了易驚，走路僵直，角弓反張等癥狀。并結合病理組織學、觸片檢查和小鼠攻毒實驗綜合判斷由于打耳標位置不當而導致破傷風感染。因此在今后的生產實踐中，要對打耳標的位置加以調整，同時在打耳標前后也要對動物耳部和耳標進行嚴格消毒。

破傷風發病機理為當形成芽孢的菌體通過傷口侵入體內，芽孢在缺氧環境中即可復蘇，在壞死組織中進行大量增殖并且分泌大量的毒素代謝產物，進而通過組織中的毛細血管網侵入血液，最終擴散至全身各處[8]。毒素到達運動神經元末梢的突觸前膜，與外周神經末梢富集的糖脂結合，進而反向沿神經鞘經脊髓神經根傳至脊髓前腳神經元，上行可達腦干細胞。此時毒素選擇性封閉抑制性神經元，阻止神經遞質抑制類物質釋放，使肌肉伸縮失去平衡。毒素還會抑制神經肌肉接頭處的神經突觸傳遞活動，引起強直或者痙攣，并伴有水腫等變化[9]。本例病羊在腦部可以觀察到有大小不等散在的出血灶和明顯的水腫的變化，并在小腦浦肯野細胞層看到變質性變化，這與破傷風毒素作用有關。