蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)常見問題及對(duì)策

楊燁

摘 ? ?要：伴隨著經(jīng)濟(jì)社會(huì)不斷發(fā)展，人們生活水平日益提高，對(duì)于食品安全重視程度不斷加強(qiáng)，這也對(duì)蔬菜質(zhì)量安全提出了更高的要求。農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)作為把好蔬菜質(zhì)量安全關(guān)的重要技術(shù)手段，近年來(lái)在農(nóng)藥殘留檢測(cè)方面普遍應(yīng)用。但目前在蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)方面仍存在一些問題，針對(duì)這些問題進(jìn)行分析，探討并提出一些有效對(duì)策，旨在進(jìn)一步提高蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)水平，最大程度地確保食用蔬菜的質(zhì)量，保證食品安全和人民身體健康。

關(guān)鍵詞：農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù);蔬菜檢測(cè);問題;對(duì)策

文章編號(hào)：1005-2690（2021）19-0077-02 ? ? ? 中國(guó)圖書分類號(hào)：S481.8 ? ? ? 文獻(xiàn)標(biāo)志碼：B

1 ? 酶抑制法——蔬菜農(nóng)藥殘留試驗(yàn)操作流程

1.1 ? 原理

農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)儀是根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB/T 5009.199—2003和農(nóng)業(yè)標(biāo)準(zhǔn)方法NY/T 448—2001中的酶抑制率法，結(jié)合快速檢測(cè)方法研制的全新食品安全檢測(cè)設(shè)備，能準(zhǔn)確、快速檢測(cè)出蔬菜、水果中有機(jī)磷類和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留量。在一定條件下，有機(jī)磷和氨基甲酸類農(nóng)藥對(duì)膽堿酯酶正常功能有抑制作用，其抑制率與農(nóng)藥的濃度呈正相關(guān)。酶催化神經(jīng)傳導(dǎo)代謝產(chǎn)物（乙酰膽堿）水解，其水解產(chǎn)物與顯色劑反應(yīng)，產(chǎn)生黃色物質(zhì)，用分光光度計(jì)測(cè)定412 nm下吸光度隨時(shí)間的變化值，計(jì)算出抑制率，通過(guò)抑制率可以判斷出樣品中是否含有有機(jī)磷或氨基甲酸酯類農(nóng)藥的殘留[1]。

1.2 ? 檢測(cè)

1.2.1 ? 試劑配制

①提取液：提取液粉中加入510 mL蒸餾水，充分搖勻后備用。②酶液：每瓶酶液中加入3.1 mL提取液，充分搖勻后備用。③底物：每瓶底物中加入3.1 mL蒸餾水，充分搖勻后備用。④顯色劑：每瓶顯色劑加入32 mL提取液，搖勻后避光冷藏保存。

1.2.2 ? 樣品提取

果蔬樣品2 g，加入提取液10 mL，震蕩5 min后靜置2 min，取上層清液進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.3 ? 對(duì)照溶液配制

將2.5 mL提取液加入試管中，加入酶液100μL、顯色劑100μL放置15 min后加入底物100μL，搖勻后迅速倒入比色皿中，放入儀器（BIII博納八通道殘留農(nóng)藥測(cè)定儀）第一通道進(jìn)行檢測(cè)[2]。

1.2.4 ? 樣品溶液配制

將2.5 mL樣品提取液加入到試管中，加入酶液100μL、顯色劑100μL放置15 min后加入底物100μL，搖勻后迅速倒入比色皿中，放入儀器中進(jìn)行檢測(cè)。

1.2.5 ? 儀器操作與結(jié)果判定

儀器開機(jī)后實(shí)施對(duì)照試驗(yàn)，在第一通道中，放入對(duì)照溶液，樣品與對(duì)照溶液可共同開展試驗(yàn)，開啟儀器上的對(duì)照鍵，儀器做完對(duì)照后，可將樣品放入所有通道，啟動(dòng)測(cè)試鍵來(lái)開展檢測(cè)。結(jié)果判定過(guò)程中，50%以上抑制率，提示蔬菜中存在明顯的有機(jī)磷超標(biāo)或者氨基甲酸酯類農(nóng)藥超標(biāo)。檢測(cè)結(jié)果為陽(yáng)性，需要進(jìn)行二次以上檢驗(yàn)，還應(yīng)當(dāng)通過(guò)氣象色譜法進(jìn)行確認(rèn)，抑制率在50%以下，說(shuō)明試驗(yàn)樣品合格。

2 ? 試紙檢測(cè)法——農(nóng)藥殘留速測(cè)卡

2.1 ? 原理

農(nóng)藥殘留速測(cè)卡是根據(jù)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法GB/T 5009.199—2003研發(fā)的快速檢測(cè)農(nóng)藥殘留的試紙，運(yùn)用顯色劑和對(duì)農(nóng)藥高敏感的膽堿酯酶制成的試紙，能夠?qū)Π被姿狨ヮ愞r(nóng)藥和有機(jī)磷類農(nóng)藥在蔬菜中的殘留情況進(jìn)行快速及時(shí)的檢測(cè)[3]。

2.2 ? 檢測(cè)

2.2.1 ? 粗篩法

①將蔬菜表面存在的泥土擦干凈，將洗脫液滴在蔬菜上，并選擇另一片蔬菜摩擦此蔬菜表面的滴液。②將一片速測(cè)卡取下，把蔬菜上的滴液滴入白色藥片之上。③放置10 min預(yù)反應(yīng)，具備條件的可以利用恒溫裝置保持在37 ℃，放置10 min，藥片經(jīng)過(guò)預(yù)反應(yīng)后，要確保其表面濕潤(rùn)度。④對(duì)折速測(cè)卡，通過(guò)恒溫裝置進(jìn)行3 min恒溫操作，也可用手捏3 min，確保白色與紅色藥片有效疊合，產(chǎn)生反應(yīng)。⑤測(cè)定每個(gè)批次蔬菜殘留過(guò)程中，應(yīng)當(dāng)對(duì)一個(gè)洗脫液空白對(duì)照卡進(jìn)行設(shè)定。

2.2.2 ? 整體測(cè)定法

①優(yōu)選代表性強(qiáng)的蔬菜測(cè)定樣品，將其表面的泥土全部插進(jìn)，利用剪刀把樣品設(shè)置成25 px的碎塊，取出5 g樣品后，放入有蓋的瓶中，并將緩沖溶液或者10 mL純凈水加入其中，進(jìn)行50次震搖，靜置2 min。②把一片速測(cè)卡取出后，通過(guò)白色藥片將提取液進(jìn)行沾取，并放置10 min預(yù)反應(yīng)，具備條件的可以在恒溫裝置37 ℃的條件下放置10 min，藥片經(jīng)過(guò)預(yù)反應(yīng)之后，表面必須要保證其濕潤(rùn)度。③對(duì)折速測(cè)卡，在恒溫裝置下靜置3 min，也可用手捏3 min，確保白色藥片和紅色藥片充分疊合并產(chǎn)生反應(yīng)。④每批測(cè)定過(guò)程中必須要進(jìn)行緩沖液或者純凈水空白對(duì)照卡設(shè)定。

2.2.3 ? 折疊結(jié)果判定

對(duì)比空白對(duì)照卡，白色藥片輕微呈現(xiàn)淺藍(lán)色或者不變色都屬于陽(yáng)性，沒有變藍(lán)主要表現(xiàn)為強(qiáng)陽(yáng)性，提示農(nóng)藥有著很高的殘留量;而呈現(xiàn)淺藍(lán)色主要表現(xiàn)為弱陽(yáng)性，農(nóng)藥有著較低的殘留量;白色藥片呈現(xiàn)天藍(lán)色，相同于空白對(duì)照卡，屬于陰性。針對(duì)蔬菜樣品屬于陽(yáng)性，可運(yùn)用其他方法對(duì)農(nóng)藥品種及其含量進(jìn)行確定[4]。

3 ? 酶抑制法和試紙檢測(cè)對(duì)比分析

在酶抑制法和試紙檢測(cè)兩種方法檢測(cè)過(guò)程中，都有著類似的檢測(cè)原理，能夠快速地檢測(cè)蔬菜中有無(wú)有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留，結(jié)果雖然會(huì)出現(xiàn)一些假陰性、假陽(yáng)性，然而相較于質(zhì)譜法與氣象色譜法，可以更為簡(jiǎn)單地開展操作，具有很高的檢測(cè)效率，設(shè)備投入也相對(duì)較小。在實(shí)踐中發(fā)現(xiàn)除了馬拉硫磷、甲胺磷和樂果之外，酶抑制法相較于試紙檢測(cè)法效果更好，而且該方法能夠同時(shí)對(duì)8個(gè)樣品進(jìn)行測(cè)定，減少了時(shí)間投入。試紙檢測(cè)方法攜帶非常方便，在檢測(cè)過(guò)程中技術(shù)要求不高、成本投入低、資金不足時(shí)可以運(yùn)用此方法，快速地開展蔬菜農(nóng)藥殘留檢測(cè)。

4 ? 常見問題和處理方法

4.1 ? 檢查結(jié)果差異

同批次購(gòu)入的蔬菜，由于個(gè)體因素影響，對(duì)農(nóng)藥殘留檢測(cè)結(jié)果也帶來(lái)一定影響。農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)在取樣量以及定液量方面都存在一定的誤差，即使相同的儀器和方法也時(shí)常出現(xiàn)一些誤差，所以應(yīng)當(dāng)采取有效措施進(jìn)行處理。

第一，檢測(cè)工作開展前，認(rèn)真清洗相關(guān)器具，保證使用器具衛(wèi)生干凈，以免對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成不利影響，完成取樣后及時(shí)封存，避免樣品變質(zhì)。第二，在取樣過(guò)程中應(yīng)當(dāng)多點(diǎn)混取，并保證適量平均，保證樣品的代表性與公平性。第三，應(yīng)加強(qiáng)儀器維護(hù)，確保儀器設(shè)備始終處于良好的工作狀態(tài)，科學(xué)規(guī)范操作，才能提高檢測(cè)效率與質(zhì)量，減少差錯(cuò)。

4.2 ? ?抑制率過(guò)小

其一，由于發(fā)生反應(yīng)之前的酶活性已經(jīng)喪失，可能是酶過(guò)期失活。酶凍干劑在冷凍狀態(tài)下可保存一年，配制好的酶液在4 ℃的貯藏箱內(nèi)可保存7 d。

其二，因酶存在脆弱性的特征，為使其活性得到有效保障，工作人員在開展試驗(yàn)時(shí)，應(yīng)當(dāng)確保恒定的溫度，使酶的穩(wěn)定性得到有效提高，進(jìn)而確保底物與酶反應(yīng)更加充分。抑制時(shí)間和酶的抑制力密切相關(guān)，所以還應(yīng)當(dāng)對(duì)時(shí)間科學(xué)掌握，確保樣品和空白對(duì)照反應(yīng)時(shí)間相同，避免酶與底物出現(xiàn)不徹底的反應(yīng)。

其三，檢測(cè)工作開展過(guò)程中，取樣時(shí)不能對(duì)蔬菜進(jìn)行清洗，這樣會(huì)稀釋掉蔬菜上的農(nóng)藥，導(dǎo)致檢測(cè)結(jié)果不準(zhǔn)確。同時(shí)蔬菜生長(zhǎng)需要光合作用的參與，而產(chǎn)生的葉綠素會(huì)對(duì)檢測(cè)結(jié)果造成一定影響，因此在對(duì)含有較高葉綠素蔬菜樣品檢測(cè)時(shí)，應(yīng)掌握科學(xué)的檢測(cè)時(shí)間，對(duì)蔬菜實(shí)施浸提處理，有效排除葉綠素的影響，保證結(jié)果更加精準(zhǔn)，多次檢測(cè)獲取其中的平均值。

4.3 ? 抑制率過(guò)大

抑制率過(guò)大主要是由于檢驗(yàn)人員不規(guī)范操作所導(dǎo)致，即酶沒有通過(guò)上機(jī)比色，便與底物產(chǎn)生了反應(yīng)。所以工作人員在蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)過(guò)程中必須要保證規(guī)范性的操作，樣品培養(yǎng)必須要在規(guī)定的時(shí)間內(nèi)完成，培養(yǎng)時(shí)間不能隨意更改，應(yīng)控制在30 min內(nèi)，確保比色皿干凈衛(wèi)生，透光性較好。

5 ? 合理建議

在檢測(cè)實(shí)施前，對(duì)儀器進(jìn)行預(yù)熱，確保其持續(xù)穩(wěn)定運(yùn)行，保證檢測(cè)效率及其質(zhì)量。檢測(cè)工作實(shí)施過(guò)程中，工作人員不能用手直接接觸比色皿表面，利用光面與毛面找準(zhǔn)光路，一般情況下，其中液體應(yīng)當(dāng)超過(guò)2/3，才能確保檢測(cè)結(jié)果更加理想。操作工作開展過(guò)程中，應(yīng)確保光面外部更加整潔，根據(jù)儀器產(chǎn)品說(shuō)明書開展操作。白菜、豆角等蔬菜，由于生長(zhǎng)速度快，農(nóng)藥利用率較高，時(shí)常會(huì)出現(xiàn)農(nóng)藥殘留問題，所以針對(duì)這些蔬菜，更應(yīng)充分做好檢測(cè)工作。

6 ? 結(jié)語(yǔ)

對(duì)蔬菜農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)常見問題進(jìn)行分析探討，希望能為相關(guān)工作人員提供一些啟示作用。結(jié)合工作實(shí)際，采取切實(shí)有效的措施進(jìn)行應(yīng)對(duì)，認(rèn)真做好檢測(cè)前、檢測(cè)實(shí)施以及善后等各方面工作，確保檢測(cè)結(jié)果精準(zhǔn)性，最大程度地保證蔬菜質(zhì)量安全。

參考文獻(xiàn)：

[ 1 ] 范小偉，戴軍力.蔬菜中農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)綜述[J].蔬菜，2019（8）：28-32.

[ 2 ] 許國(guó)文.蔬菜中有機(jī)磷和氨基甲酸酯類農(nóng)藥殘留快速檢測(cè)技術(shù)[J].蔬菜，2019（8）：61-63.

[ 3 ] 李凌云，李家經(jīng)，翟國(guó)雨.酶抑制法在蔬菜農(nóng)藥殘留測(cè)定中存在的問題及對(duì)策[J].農(nóng)家參謀，2019（16）：84.

[ 4 ] 蔡文海.農(nóng)產(chǎn)品農(nóng)藥殘留檢測(cè)技術(shù)要點(diǎn)分析[J].南方農(nóng)業(yè)，2018，12（9）：83-84.