結(jié)直腸癌錯(cuò)配修復(fù)蛋白檢測(cè)的意義分析

劉美娜

（英德市人民醫(yī)院病理科，廣東清遠(yuǎn) 513000）

結(jié)直腸癌的發(fā)病率近幾年不斷增加，同時(shí)具有年輕化發(fā)展趨勢(shì)，因此，結(jié)直腸癌的診斷治療逐漸受到更多醫(yī)學(xué)領(lǐng)域研究人員的關(guān)注，對(duì)于結(jié)直腸癌的發(fā)展規(guī)律進(jìn)行明確，有利于實(shí)現(xiàn)疾病的診斷治療[1]。現(xiàn)階段結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的生物學(xué)行為及機(jī)制尚未明確，相關(guān)研究中發(fā)現(xiàn)，錯(cuò)配修復(fù)基因中修復(fù)缺陷的穩(wěn)定性有可能與結(jié)直腸癌之間的發(fā)生發(fā)展存在一定關(guān)系[2]。本次研究對(duì)于MLH1、PMS2、遺傳性非息肉性結(jié)腸癌（HNPCC）相關(guān)基因MSH2、遺傳性非息肉性結(jié)腸癌（HNPCC）相關(guān)基因MSH6的表達(dá)水平在直腸癌手術(shù)預(yù)后效果中的影響價(jià)值分析，報(bào)道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2016年7月至2020年7月英德市人民醫(yī)院收治的116例結(jié)直腸癌患者納入研究，共抽取116例納入研究，其中男性患者62例，女性患者54例，年齡29~90歲，平均年齡（63.09±13.21）。本研究經(jīng)廣東省英德市人民醫(yī)院醫(yī)學(xué)倫理委員會(huì)審批通過(guò)，患者及家屬知情同意并簽署知情同意書(shū)。納入標(biāo)準(zhǔn)：①原發(fā)于結(jié)直腸；②行結(jié)直腸癌根治術(shù)；③病例資料完整。排除標(biāo)準(zhǔn)：①術(shù)前院內(nèi)經(jīng)過(guò)放化療患者；②伴有其他惡性腫瘤患者。

1.2 檢測(cè)方法 檢測(cè)方法：應(yīng)用福州邁新公司生產(chǎn)的鼠單抗MSH2、鼠單抗MLH1、兔單抗PMS2、兔單抗MSH6，應(yīng)用徠卡Bond-MAX全自動(dòng)免疫組化儀上檢測(cè)。

將所有標(biāo)本利用中性福爾馬林（湖南爾康制藥股份有限公司，國(guó)藥準(zhǔn)字H43020198；規(guī)格：10%）實(shí)施固定、脫水并采用石蠟包埋,利用4 μm切片并在65℃溫度下進(jìn)行烤片2 h,隨后置于全自動(dòng)免疫組化儀[美國(guó)BioCare公司，國(guó)食藥監(jiān)械(進(jìn))字2013第1404260號(hào);型號(hào):intelliPATH FLX ]進(jìn)行檢測(cè),并利用中性樹(shù)膠實(shí)施封片。

1.3 觀察指標(biāo) 觀察研究指標(biāo)：統(tǒng)計(jì)分析患者中錯(cuò)配修復(fù)蛋白缺失情況，應(yīng)用單因素、Logistic回歸分析錯(cuò)配修復(fù)蛋白缺失的關(guān)聯(lián)因素，對(duì)比錯(cuò)配修復(fù)蛋白缺失患者及正常患者預(yù)后情況。

結(jié)果判斷：MLH1、PMS2、MSH2、MSH6均在細(xì)胞核內(nèi)實(shí)施定位，胞核如產(chǎn)生黃色、棕黃色顆粒可以判斷為陽(yáng)性，如胞核不著色則表示缺失。MLH1、PMS2、MSH2、MSH6蛋白中存在任意一種缺失則判定為錯(cuò)配修復(fù)蛋白缺失，以上免疫組化結(jié)果由兩名高年資醫(yī)師進(jìn)行判讀診斷。腫瘤直徑5 cm以下為0、5 cm及以上為1，病理分型腺癌為0、黏液腺癌為1，淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移為1，非轉(zhuǎn)移為0，分化程度中分化為0，低分化為1，TNM分期情況Ⅱ期為0，Ⅲ期為1。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)分析 采用SPSS 22.0軟件統(tǒng)計(jì)分析數(shù)據(jù)，計(jì)量資料使用（±s）表示，采用t檢驗(yàn)，計(jì)數(shù)資料以[例(%)]表示，采用χ2檢驗(yàn)；P＜0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 錯(cuò)配修復(fù)蛋白檢測(cè)缺失情況 本次檢測(cè)中，錯(cuò)配修復(fù)蛋白陽(yáng)性者105例,表達(dá)缺失者為11例,其中MLH1和PMS2共同表達(dá)缺失者為7例，MLH1單獨(dú)缺失者2例，PMS2單獨(dú)缺失者2例。

2.2 結(jié)直腸癌錯(cuò)配修復(fù)蛋白檢測(cè)缺失關(guān)聯(lián)單因素分析 經(jīng)過(guò)單因素分析發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌錯(cuò)配修復(fù)蛋白檢測(cè)缺失關(guān)聯(lián)單因素為腫瘤直徑、分化程度、TNM分期情況（P＜0.05），性別、病理分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移中錯(cuò)配修復(fù)蛋白檢測(cè)缺失關(guān)聯(lián)度較低（P＞0.05），見(jiàn)表1。

表1 結(jié)直腸癌錯(cuò)配修復(fù)蛋白檢測(cè)缺失關(guān)聯(lián)單因素分析（例,%）

2.3 結(jié)直腸癌錯(cuò)配修復(fù)蛋白檢測(cè)缺失Logistic回歸分析 經(jīng)Logistic回歸分析，腫瘤直徑、分化程度、TNM分期情況與結(jié)直腸癌錯(cuò)配修復(fù)蛋白之間存在較強(qiáng)關(guān)聯(lián)性，腫瘤直徑越大、分化程度越高、TNM分期越低，錯(cuò)配修復(fù)蛋白缺失率越高，見(jiàn)表2。

表2 結(jié)直腸癌錯(cuò)配修復(fù)蛋白檢測(cè)缺失Logistic回歸分析

3 討論

結(jié)直腸癌為胃腸道系統(tǒng)中存在的惡性腫瘤疾病，主要由于多階段及多因素引發(fā)的復(fù)雜性消化系統(tǒng)疾病。結(jié)直腸癌的病因可能與人們?nèi)粘５牟涣忌盍?xí)慣及吸煙、飲酒等有關(guān)，同時(shí)還與遺傳因素及環(huán)境因素相關(guān)，部分患者機(jī)體中的腸道菌群及素質(zhì)免疫系統(tǒng)失衡也會(huì)引發(fā)此疾病。結(jié)直腸癌臨床上一般應(yīng)用手術(shù)治療、放化療及靶向治療等，能夠通過(guò)患者的不同階段實(shí)施相應(yīng)治療，有效改善患者疾病預(yù)后，使患者生存質(zhì)量得到提升。但部分患者存在藥物不敏感以及手術(shù)預(yù)后效果較差的情況，部分患者在確診時(shí)已經(jīng)進(jìn)入中晚期，導(dǎo)致治療難度增大，提高疾病死亡率。因此，針對(duì)結(jié)直腸癌的有效診斷對(duì)于患者的預(yù)后改善具備重要意義，為結(jié)直腸癌患者提供更加及時(shí)有效的治療，同時(shí)能夠通過(guò)有效診斷實(shí)現(xiàn)疾病的篩查及預(yù)防[3-4]。

錯(cuò)配修復(fù)基因?yàn)楝F(xiàn)階段結(jié)直腸癌臨床病理特征相關(guān)性因子，為能夠?qū)τ诨颊哳A(yù)后實(shí)現(xiàn)輔助判斷的分子生物學(xué)指標(biāo)。同時(shí)，錯(cuò)配修復(fù)基因?qū)儆贒NA損傷反應(yīng)通路的重要組成部分，能夠?qū)崿F(xiàn)基因組的完整性維持。其中包含 了MLH1、PMS2、MSH2、MSH6，MSH6一般 為堿 基片段突變，其與子宮內(nèi)膜癌、大腸癌、卵巢癌的發(fā)生發(fā)展存在一定聯(lián)系[5-7]。近幾年，人們對(duì)于此基因的研究逐漸完善，相關(guān)研究中報(bào)道，錯(cuò)配修復(fù)基因的存在不同分化程度及性別差異，但在不同病理分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移的腫瘤中表達(dá)缺失率不具備統(tǒng)計(jì)學(xué)差異性，是否存在錯(cuò)配修復(fù)蛋白缺失與性別、病理分型、淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況之間關(guān)聯(lián)性較小[8-10]。

本文研究顯示，本次檢測(cè)中，錯(cuò)配修復(fù)蛋白陽(yáng)性者105例,表達(dá)缺失者為11例,其中存在MLH1和PMS2共同表達(dá)缺失者7例，MLH1單獨(dú)缺失者2例，PMS2單獨(dú)缺失者2例，經(jīng)過(guò)單因素、Logistic回歸分析發(fā)現(xiàn)，結(jié)直腸癌錯(cuò)配修復(fù)蛋白檢測(cè)缺失與患者腫瘤直徑、分化程度、TNM分期情況關(guān)聯(lián)性較為明顯（P＜0.05），腫瘤直徑越大、分化程度越高、TNM分期越低，錯(cuò)配修復(fù)蛋白缺失率越高。

綜上所述，臨床結(jié)直腸癌疾病診斷中可根據(jù)患者機(jī)體中MLH1、PMS2、MSH2、MSH6等錯(cuò)配修復(fù)蛋白缺失情況判定預(yù)后，同時(shí)可參考錯(cuò)配修復(fù)蛋白指標(biāo)情況為患者實(shí)施針對(duì)性治療。