苦參燥濕洗劑制備工藝研究及質量控制

張勝龍

苦參燥濕洗劑是在濮陽市中醫醫院現有制劑品種苦參燥濕散(豫藥制字Z20120362(濮))基礎上改良發展而來。苦參燥濕散在臨床中對痔瘺、肛裂具有較好的治療效果，該藥劑為中藥煮散，患者需自行煎煮后使用。由于患者煎煮方法的操作規范程度可影響藥液的療效，因此，為了提高患者使用制劑的便利性并提高藥品療效，本研究在原有的注冊制劑品中苦參燥濕散的基礎上，增加了提取濃縮配液工藝，并將煮散劑型改為洗劑。此外，為使其檢測方法更加合理有效，本研究對其質控方法進行了升級，新增了薄層色譜鑒別個數，保證了藥品的優良品質和確切的臨床療效。

1 材料與試劑

硅膠G、鹽酸小檗堿對照品和蘇木對照藥材(中國食品藥品檢定研究院)；其他試劑均為分析純。處方組成：苦參、黃柏、防風、白礬、白芷、黃芩、蘇木、當歸、甘草。

2 方法與結果

2.1 制備工藝確定本品處方中君藥苦參和黃柏主要含生物堿類、黃酮類成分；其余各味藥主要含揮發油類、三萜皂苷類、有機酸、多糖類、氨基酸類及鞣質等成分[1-3]，主要成分可以被熱水提取。考慮到臨床用藥對象的疾病特點、給藥途徑以及使用便利性，本品擬選用洗劑。根據本品的劑型要求和主要有效成分的理化性質，擬采用以下工藝設計：苦參等九味飲片，擬以水為提取溶媒，采用水煎煮提取。擬定制備工藝路線見圖1。

圖1 工藝路線圖

2.2 制備工藝的考察

本研究以加水量、提取時間、提取次數、空白等4個因素為指標，每個因素取3個水平，選用L9(34)正交設計試驗；取1/10處方量藥材，按表1進行試驗，并以干膏得率作為考察指標，以優選出最佳提取工藝條件。取苦參、黃柏、防風、白礬、白芷、黃芩、蘇木、當歸、甘草，共9份，根據表2正交試驗表進行9種提取工藝的提取、濾過，得其水煎液。按照正交設計試驗操作，各水煎液分別濃縮，濃縮條件為：溫度60～70 ℃，真空度-0.06～-0.07 Mpa，蒸汽(壓力0.03 MPa)，稱量干膏重量。將濃縮液置于100 ml量瓶中，定容、搖勻。精密吸取濃縮液10 ml置干燥至恒重的蒸發皿中，水浴蒸干，于105 ℃干燥至恒重(約10 h)后，置于干燥器30 min，冷卻后稱定重量，計算干膏得率。每份試驗平行做3次，取平均值，試驗結果見表2。對實驗結果進行方差分析，因素A和C有顯著性影響，根據正交設計試驗直觀分析，因素A2>A3>A1，選擇A2，C2>C3>C1，選擇C2，因素B差異無統計學意義，且B3>B2>B1，B2與B3差異微小，考慮到兼顧充分提取和適當提高生產效率，選擇B2。因此綜合生產實際狀況，最佳提取工藝為：加8倍量水，提取2次，每次提取1.5 h。見表3。

表1 苦參燥濕洗劑提取因素水平表

表2 苦參燥濕洗劑L9(34)正交試驗安排及干膏率測定結果

表3 方差分析結果

2.3 中試樣品的制備研究

為了驗證工藝的穩定性和科學性，中試生產3批苦參燥濕洗劑。批量設定按照50倍處方量進行投料，對成品率分別進行考察。工藝設定合理，3批成品按照苦參燥濕洗劑的質量標準草案檢驗，結果均符合規定。該工藝穩定可靠，已初步具備大批量生產的條件。見表4。

表4 苦參燥濕洗劑3批中試樣品生產參數

2.4 質量控制本品處方中主要有效成分為生物堿類、揮發油類、黃酮類、三萜皂苷類、有機酸、多糖類、氨基酸類及鞣質等化合物[4]。本制劑性狀為紅棕色液體；氣微，味苦。取本品20 ml，蒸干，加甲醇10 ml，超聲處理30 min，上清液作為供試品溶液。另取蘇木對照藥材0.3 g，同法制成對照藥材溶液。薄層色譜法(通則0502)試驗，吸取供試品溶液各5 μl，對照藥材和對照品溶液各2 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以三氯甲烷-丙酮-甲酸(8∶4∶1)為展開劑[4]，展開，取出，晾干，立即置干燥器內放置4 h后置紫外燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。用不含蘇木的制劑進行陰性對照試驗，圖2顯示，陰性對照色譜中，在與對照藥材色譜相應位置上，無相同顏色的熒光斑點。取本品20 ml，蒸干，加乙醇15 ml，超聲處理10 min，上清液作為供試品溶液。另取鹽酸小檗堿對照品，加乙醇制成1 ml含1 mg的溶液，作為對照品溶液。照薄層色譜法(附錄一)試驗，吸取供試品溶液各5 μl，對照品溶液2 μl，分別點于同一硅膠G薄層板上，以正丁醇-冰醋酸-水(7∶1∶2)為展開劑[4]，展開，取出，晾干，置紫外燈(365 nm)下檢視。供試品色譜中，圖3顯示，在與對照品色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點。用不含黃柏的制劑進行陰性對照試驗，結果陰性對照色譜中，在與對照品色譜相應位置上，無相同顏色的熒光斑點。

注：1 缺蘇木陰性對照；2 苦參燥濕洗劑供試品(20190401)；3 苦參燥濕洗劑供試品(20190402)；4苦參燥濕洗劑供試品(20190403)；5蘇木對照藥材圖2 蘇木薄層色譜圖

注：1 缺黃柏陰性對照； 2 苦參燥濕洗劑供試品(20190401)； 3 苦參燥濕洗劑供試品(20190402)； 4苦參燥濕洗劑供試品(20190403)；5鹽酸小檗堿對照品圖3 黃柏薄層色譜圖

3 討論

中醫結合現代醫學對痔瘺，肛裂的治療，目前具有較好的治療效果。本證皆屬濕熱下注或氣滯血瘀，濕毒蘊結而成，基于濕熱瘀滯，絡阻腫瘤之病機。苦參清熱燥濕、祛風止癢為主藥，黃柏、黃芩清熱利濕、消腫止痛，防風祛風止癢，白礬燥濕、斂瘡為輔藥，白芷消腫排脹潤膚止痛，蘇木消風腫止痛，當歸養血潤燥、止痛為佐藥，甘草調和諸藥，有利濕之用而為使，諸藥合用共奏：清熱燥濕、祛風止癢、消腫止痛之效[5-7]。

該方于1999年12月正式批準為濮陽市中醫醫院制劑，2004年注冊批準文號，現已使用17年，其前應用湯劑已使用8年。濮陽市中醫醫院現有制劑品種苦參燥濕散，為中藥煮散，患者需自行煎煮后使用，由于患者提取方法的操作規范程度有差別，藥液的療效有一定的影響；為了患者更便于使用制劑，并保證藥品療效更好，在原有的注冊制劑品種苦參燥濕散的基礎上，工藝改為提取濃縮配液過程，將煮散劑型改為洗劑。苦參燥濕洗劑方從改善肛門疾病疼痛、排便障礙入手，經多年臨床使用證明是一種較好的治療方法，患者使用中藥制劑苦參燥濕洗劑熏洗坐浴，對肛門疾病疼痛、排便障礙等有明顯緩解作用，使用安全，療效確切。

選用L9(34)正交設計試驗對樣品進行提取確定最優制備工藝，測定3次提取液的干膏率，結果表明該制備工藝重現性較好。3批中試樣品的制備研究成品率分別為：95.5%、97.0%、96.0%，制備工藝穩定可靠，重新性好，已初步具備大批量生產的條件。通過查閱資料和進行預實驗，對方中的黃柏、蘇木進行薄層鑒別考察，結果顯示無陰性干擾，斑點清晰，不受樣品中其他藥味的干擾，專屬性較強。本制劑具有制備方法較為科學、質量易于控制，整體藥效較為穩定，使用更為方便等優點，值得推廣[8]。