多發性骨髓瘤生物標志物的研究進展

李若林，王禹，姚奕斌，黃春妮

【關鍵詞】多發性骨髓瘤;生物標志物;血清;組織;細胞

中圖分類號：R733.3文獻標志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.11.012

多發性骨髓瘤（multiple myeloma，MM）是第二常見的血液惡性腫瘤，表現為骨髓中漿細胞惡性克隆增殖，其臨床特征是在血漿或者尿液中出現單克隆免疫球蛋白，出現貧血、高鈣血癥、腎功能不全、感染、骨折等臨床癥狀[1]。近年來，隨著組織病理學、細胞遺傳學、分子生物學及影像學的發展，筆者發現了許多與MM診斷或預后有關的生物標志物，為MM的診斷與治療提供了重要依據。現筆者針對近年來國內外學者開展MM患者的血清、組織、細胞中表達生物標志物的研究進展進行綜述。

1在血清中表達的生物標志物

1.1DDP8二肽基肽酶（dipeptidyl peptidase，DPP）是絲氨酸蛋白酶亞家族S9B的成員，包括DPP4、DPP8、DPP9和成纖維細胞活化蛋白，它們被認為作為治療腫瘤藥物靶點具有廣闊的前景[2]。有研究證實DPP8/9抑制劑1G244對多種細胞系和CD138+細胞均有抗MM作用，并且DPP8而非DPP9是誘導DPP8/9抑制所致細胞死亡的關鍵分子，抑制DPP8可以誘導細胞凋亡，因此DPP8被認為是MM治療的新型治療靶標[3]。DPP8除了誘導細胞凋亡外，還可能具有其他的生物學功能，進一步開發針對DPP8的特異性抑制劑將為MM提供有前景的治療效果。

1.2VCAN多能蛋白聚糖（versican，VCAN）是一種大分子的細胞外基質硫酸軟骨素蛋白多糖，它通過與其結構域的相互作用參與細胞黏附、增殖、遷移和血管生成，從而在疾病發生與轉化過程中發揮作用[4]。有研究證實了MM患者血清中VCAN顯著升高，與其相關的microRNA分子表達則顯著降低，推測VCAN可作為MM診斷的潛在標志物[5]。VCAN主要由Wnt通路產生，與β1 結合激活FAK，不僅促進不同血液細胞的生長和分化，還能為腫瘤細胞增殖提供最佳生長環境，在骨髓微環境生存中發揮著重要的作用。

1.3CTCs循環腫瘤細胞（circulatory tumor cells，CTCs）是從原發性或轉移性腫瘤部位釋放到循環中的細胞。研究發現，MM外周血中循環腫瘤細胞越多，骨髓浸潤程度越高，預后越差，從MGUS進展到MM的時間越短，MM患者的生存時間越短，外周血中較高的CTCs數量與較高的骨髓浸潤水平和不良預后有關，因此檢測CTCs有助于診斷和評估MM[6]。

1.4miRNA微小核糖核酸（micro ribonucleic acid，miRNA）是內源表達的18～25個核苷酸的非編碼RNA，它可以調節許多腫瘤的進展和轉移。有學者發現miR-203、miR-30d在MM患者血清中低表達，可以通過抑制細胞活力來促進細胞凋亡而發揮抑癌作用[5，7]。還有研究發現，miR-21對MM具有致癌潛力，miR-720和miR-1246可能成為MM患者預后的預測指標[8]。由于RNA在疾病早期就能產生，具有一定的穩定性和豐度后可進入循環系統，易于檢測，miRNA與lncRNA、circRNA都被發現參與疾病過程，成為許多疾病早期檢測及預測疾病進程的指標，它們有望成為潛在腫瘤標志物。

1.5GDF15生長分化因子15 （growth differentiation factor15，GDF-15）是轉化生長因子β超家族成員之一，由骨髓基質細胞分泌[9]。有研究發現，在MM患者血清中GDF15濃度升高，不僅與患者的腎功能、貧血、MM分期和炎癥等具有相關性[10]，與血紅蛋白、血小板計數、M蛋白、β2-微球蛋白、血肌酐等指標也具有相關性[11]。另外，MM骨轉移患者血清中也發現GDF15濃度明顯增高，認為它可能作為監測骨轉移的新型標志物[12]。此外，還有研究發現MM晚期患者的GDF15水平顯著升高，患者完全緩解后GDF15的濃度顯著降低[13]。由此可見，GDF15與MM的進展及預后密切相關，推測它可作為診斷及監測指標之一。

2在組織中表達的生物標志物

2.1ATIC在一項基于生物信息學研究中，使用多變量Cox回歸分析確定了16個與生存相關的自噬相關基因，其中包括5-氨基咪唑-4-羧酰胺核糖甲酰轉移酶/IMP環水解酶（ATIC）。同時證實了ATIC在MM樣本中的mRNA和蛋白水平明顯上調，提示ATIC的上調可能在MM發生發展過程中發揮重要作用[14]。ATIC是一種自噬相關基因，其可能通過調控AMPK/mTOR、Wnt/β-catenin通路介導細胞自噬參與MM進展，但目前尚未有研究報道。

2.2M2極化的巨噬細胞近年來，有學者依據MM患者骨髓組織M2極化的巨噬細胞浸潤程度將患者分為高浸潤組和低浸潤組，發現高浸潤組患者早期治療有效率明顯低于低浸潤組，M2極化的巨噬細胞浸潤程度和早期治療反應相關[15]。M2極化的巨噬細胞通過促進骨髓瘤細胞分泌系列炎癥因子、趨化因子和相關受體的表達，從而促進骨髓瘤細胞增殖以及保護骨髓瘤細胞免于凋亡。因此，M2極化的巨噬細胞浸潤可能在促進MM的進展中發揮重要作用。

2.3APN脂聯素（adiponectin， APN）是目前發現的唯一與體脂含量呈負相關的脂肪細胞因子。有研究發現低脂聯素血癥與MM風險升高相關[16]。LIU等[17]發現MM患者APN水平顯著降低，它可能通過增加AdipoR1的表達，降低mTOR和4EBP1的磷酸化水平進而抑制破骨細胞的分化成熟。APN可能是一種很有前途的生物標志物，在確定某些意義不明的單克隆丙種球蛋白病和髓系血液系統惡性腫瘤患者發生骨髓瘤和白血病進展的可能性方面具有潛在的診斷及預后價值[18]。APN具有增敏、抗炎、調節糖類和脂質代謝、保護血管等多重作用，但它在血液中半衰期短、濃度高，因此，雖然具有潛在的靶點挖掘價值，但在臨床應用上也有新的挑戰。

2.4circRNA-MYBL2MYBL2屬于MYB轉錄因子家族成員，對細胞周期、生存、分化發揮重要的生理性調節作用。由于MYBL2被逐漸發現在很多腫瘤中異常表達，因此它被認為與腫瘤的發生發展有關。研究發現circRNA-MYBL2在MM組織中表達下調，它低表達與臨床分期和不良預后密切相關，外源 circRNA-MYBL2的表達可抑制MM細胞活力、DNA合成和細胞周期進程。進一步研究表明，circRNA-MYBL2促進了Cyclin F與MYBL2的結合，抑制 MYBL2磷酸化和激活，從而抑制許多增殖相關癌基因的轉錄，因此它有可能成為MM患者潛在靶點[19]。

2.5PD-1程序性死亡因子1（PD-1）是一種免疫觸點受體，通過與其配體PD-L1和PD-L2相互作用，進而調節外周組織中T細胞的活性。有研究檢測出MM骨髓活檢標本PD-1和PD-L2的總體表達率分別為26.2%和61.9%，說明PD-1通路在MM進展中發揮作用，但無法證明這些標志物對預后有影響[20]。但也有研究發現sPD-L1水平升高與MM預后不良相關[21]。MM患者的BMSCs可能通過PD-1/PD-L1軸誘導CD8+T細胞凋亡，并抑制CD8+T細胞釋放穿孔素和顆粒酶B，從而促進MM的免疫逃逸[22]。PD-1抑制劑是近年來腫瘤治療方面最引人注目的方向之一，與之相關的免疫治療療效預測的標志物研究也成為了新的研究熱點。

3在細胞中表達的生物標志物

3.1KDM6B賴氨酸脫甲基酶6B（KDM6B）是一種組蛋白去甲基化酶，它不僅參與炎癥反應，還參與應激誘導的衰老、發育和分化等多種生物學過程。KDM6B以環境依賴的方式參與腫瘤的發生，還能增強甲基化進而抑制腫瘤的順鉑耐藥性。已有研究證實KDM6B低表達可抑制骨肉瘤細胞的增殖與侵襲能力[23]。最近的研究也表明KDM6B在MM細胞中高度表達，它通過激活NF-κB通路誘導MAPK分子，從而促進MM細胞的增殖，在MM的發病機制中發揮重要作用[24]。

3.2IL-6白介素-6（IL-6）屬于白介素家族的多效細胞因子，它通過作用于B淋巴細胞和T淋巴細胞，刺激機體產生炎癥并參與免疫調節、造血和腫瘤發生。IL-6/STAT3信號通路是多種腫瘤發生發展的關鍵通路之一，它能通過介導下游致癌靶基因的激活促進腫瘤發生發展。有研究發現，MM患者中IL-6水平高表達，提示IL-6可能參與MM的發病機制[25]，認為它可作為破骨標志物評估MM患者預后[26]。針對IL-6的靶向藥物如IL-6抑制劑siltuximab治療MM的臨床試驗也在陸續開展，并使患者獲得部分緩解[27]。

3.3端粒酶端粒酶是一種核糖核蛋白復合物，合成并添加端粒DNA序列，從而逆轉每一輪復制中DNA的丟失。在一項MM的體外治療研究中，抑制端粒重復結合因子2和端粒酶活性，MM患者顯示了很好的效果[28]。最近，一種端粒酶抑制劑（MST-312）通過誘導細胞凋亡和下調細胞增殖及炎癥因子作用，對MM細胞顯示出明顯的抑制作用，它有可能是一個新型標志物[29]。

3.4CD38CD38是一種在髓系和淋巴組織中低水平表達的糖蛋白，在正常情況下CD38可以促進漿細胞的遷移和黏附細胞信號。研究者發現，復發/難治性MM患者中，治療開始時CD38呈高表達，在達雷妥尤單抗治療4個周期后，CD38表達降低[30]。還有研究發現幾乎所有MM細胞表面都表達高水平的CD38[31]。CD38參與MM微環境調控，是一個非常有意義的靶點。2015年，抗CD38單克隆抗體daratumumab已經被批準用于復發/難治性MM患者的治療，近年來以CD38作為靶點的MM免疫靶向治療也取得良好的進展，它對MM的診斷與預后作用具有重要意義。

4小結和展望

在過去的幾十年里，MM的診斷主要以檢測β2-MG、白蛋白、LDH等傳統血清標志物為判斷指標。血液樣本因采集方便、損傷小、易于持續追蹤不同階段的濃度變化、可重復檢測等優點，是尋找疾病早期生物標志物最常用且經濟實惠的方法之一。

隨著實驗技術的發展，越來越多的新型生物標志物被發現并日益受到廣泛關注，如血清標志物DPP8、CTCs、VCAN等，細胞標志物KDM6B、CD38、IL-6等，組織標志物M2極化巨噬細胞、脂聯素、circRNA-MYBL2等，以它們作為靶點研發的藥物也取得許多良好的療效。隨著科技的發展，更多靈敏檢測技術（如單分子免疫列陣、免疫沉淀-質譜聯用、電化學發光、免疫磁減量等）的應用，新型生物標志物的探索會趨于精準、高效，這也將為進一步實現MM的早期診斷、治療及預后評估奠定重要的基礎。

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（收稿日期：2021-10-15修回日期：2021-10-28）

（編輯：黃研研）