微小RNA在鼻咽癌發生發展中的作用研究進展

巴思，莫祥蘭

【關鍵詞】miRNA ;鼻咽癌 ;細胞增殖;侵襲;轉移

中圖分類號：R766.3文獻標志碼：ADOI：10.3969/j.issn.1003-1383.2021.11.014

鼻咽癌（nasopharyngeal carcinoma，NPC）是鼻咽部上皮來源的惡性腫瘤，與EB病毒（EBV）感染密切相關，發病人群具有顯著的地理分布特征，好發于中國南部和東南亞地區;95%以上病例為未分化非角化型鱗狀細胞癌，對放療敏感。雖然早期經規范治療大部分患者可治愈，但NPC發病部位隱蔽，早期即經淋巴道或血道轉移。約70%患者就診時已為中晚期，治療效果差。因此，有必要深入研究NPC發生發展分子機制，尋找特異度和敏感度高的早期診斷NPC分子標志物，及早發現NPC患者，及早進行規范治療，進一步提高NPC患者治愈率和生存質量。研究已證實NPC的發生與EBV感染、遺傳因素、環境因素等密切相關。近年研究發現，miRNA表達失衡參與了NPC的發生和進展，但miRNA致NPC分子機制仍在探討中。

1miRNA與人類惡性腫瘤

miRNA是一類長度為19～25個核苷酸的單鏈非編碼小分子RNA，在轉錄后水平調控基因表達。miRNA具有高度保守性，在哺乳動物基因組中廣泛存在。隨著對miRNA研究的深入，發現其參與包括細胞增殖、分化、胚胎發育和組織形成等各種生理病理過程[1]。miRNA表達異常與人類多種疾病（包括腫瘤）的發生密切相關。miRNA在人類惡性腫瘤的發生、發展過程中扮演著類似于癌基因或抑癌基因的角色。新近研究發現食道癌細胞miR-483-5P表達上調，其通過靶向下調鉀離子通道亞家族Q成員1（KCNQ1）表達促進食道癌細胞的增殖、遷移和侵襲[2];提示miR-483-5P在食道癌發生發展過程中扮演癌基因角色。另一研究發現胃癌組織及細胞系miR-125b表達明顯下調，miR-125b模擬物可抑制胃癌細胞增殖、侵襲和轉移，在胃癌發生發展中扮演抑癌基因角色，其抑癌機制是通過靶向下調信號轉導和轉錄激活子3（STAT3）表達而實現的[3]。MAMINEZHAD等[4]研究發現6種血漿miRNA（miR-19a、miR-20a、miR-150、let-7a、miR-143和miR-145）可作為診斷大腸癌的分子標志物。大腸癌患者外周血miR-19a、miR-20a、miR-150和 let-7a表達顯著上調并與進展期密切相關，而 miR-143和miR-145則顯著下調。推測在大腸癌發生發展過程中miR-19a、miR-20a、miR-150和 let-7a扮演癌基因角色，而miR-143和miR-145則扮演抑癌基因角色。它們促癌或抑癌分子機制如何尚待研究。

2miRNA在NPC發生發展中的作用

NPC是鼻咽黏膜上皮細胞來源的惡性腫瘤。NPC的發生發展是多因素參與的復雜過程。研究已證實多種癌基因和抑癌基因表達異常導致多條信號通路包括Wnt/β-catenin、Rho/ROCK、PI3K/AKT、NF-κB、mTOR、MAPK等持續活化促進了NPC發生和進展。新近研究發現miRNA表達異常與NPC發生發展密切相關[5～9]。他們在NPC發生發展過程起促癌或抑癌作用。

2.1miRNA靶向調控抑癌基因表達促進NPC發生和發展研究證實部分miRNA促進NPC發生和發展。 NPC組織miRNA-630表達水平明顯上調并與預后不良密切相關;體外實驗發現，NPC細胞外源性過表達miRNA-630促進細胞增殖;其可能通過靶向下調抑癌基因P53誘導核蛋白2（TP53INP2）表達促進腫瘤發展[6]。NPC組織miR-103表達上調，而腫瘤侵襲轉移抑制基因基質金屬蛋白酶-3組織抑制物（TIMP-3）表達水平明顯降低;NPC細胞外源性過表達miR-103促進細胞增殖、遷移和侵襲，Wnt/β-catenin通路相關基因β-catenin 和cyclin D1表達上調[7]，提示 miR-103通過靶向抑制TIMP-3表達，激活Wnt/β-catenin通路促進NPC發生和發展。另一研究發現，miRNA-215在NPC組織中表達上調并與預后差密切相關;NPC細胞外源性過表達miR-215促進了細胞增殖、遷移和侵襲;miR-215通過靶向抑制抑癌基因RB1表達促進了NPC的發展;此外，miR-215通過促進NPC上皮-間質轉化（EMT）、激活Wnt/β-catenin通路促進NPC侵襲和轉移[8]。NPC組織miR106a-5p表達上調，其表達水平與疾病晚期、復發和不良臨床預后密切相關;功能研究發現 miR106a-5p通過靶向抑制抗增殖因子3（BTG3），抑制自噬而增強了NPC惡性表型;由miR106a-5p/BTG3軸介導的自噬減弱是通過激活MAPK通路而實現[9]。miR-141的功能具有組織特異性。NPC組織miR-141-3p表達上調并與不良預后相關，外源性過表達miR-141-3p促進了NPC細胞的增殖、遷移和侵襲，其通過靶向抑制腫瘤抑制基因DLC1表達、激活mTOR通路從而促進NPC的進程[10]。NPC組織高表達miRNA-19a-3p，而凋亡促進基因程序性細胞死亡5（PDCD5）表達下調，兩者表達水平呈負相關;生存分析顯示，高表達miRNA-19a-3p或低表達PDCD5者預后較差，他們是影響NPC預后的獨立危險因素[11]，提示miRNA-19a-3p在NPC中扮演癌基因角色。研究還發現NPC患者血漿miR-214-3p表達與臨床分期和復發或轉移密切相關，在NPC患者治療后的隨訪過程中，血漿miR-214-3p表達逐漸降低，復發或轉移的患者總是在同一時間點伴有更高水平的血漿miR-214-3p[12]，提示miR-214-3p可能在NPC發生發展中扮演癌基因角色。SUN等[13]研究發現，NPC患者外周血miR-93表達水平顯著增高并與臨床分期、淋巴結轉移以及5年總生存期顯著相關，是預測NPC預后的獨立因素;體外實驗表明，敲低miR-93可抑制NPC細胞增殖;進一步功能學實驗證明，其通過靶向抑制PDCD4表達促進NPC增殖。除人類miRNA外，部分EBV編碼的miRNA（EBV-miRNA）亦可促進NPC發生和發展。NPC組織高表達EBV-miRNA-BART8-3p并與遠處轉移密切相關[14];其通過激活NF-κB促進EMT從而促進NPC侵襲和轉移[15]。EBV-miR-BART2-5p在NPC中高表達，高表達與遠處轉移和預后差密切相關;體外實驗發現EBV-miR-BART2-5p通過靶向調控Rho家族GTP酶 3（RND3）表達，導致ROCK信號通路功能異常，最終引起NPC侵襲和轉移[16]。因此，部分miRNA包括EBV-miRNA能促進NPC發生發展，他們通過靶向下調抑癌基因表達，促進細胞增殖、侵襲和轉移的相關信號通路持續活化，導致NPC發生和進展。

2.2miRNA靶向調控癌基因表達抑制NPC發生和發展除促進NPC發生和發展外，部分miRNA在NPC發生中起抑癌作用。GAO等[17]研究發現所有NPC細胞系miR-233表達均下調，以高轉移性細胞系表達下調尤為明顯;體外實驗證實了miR-233能抑制NPC細胞增殖、EMT、遷移和侵襲，其抑癌作用是通過靶向下調結構特異性識別蛋白SSRP1表達，抑制EMT而實現的。另一研究發現miR-424-5P在NPC組織和細胞系中均低表達并且與淋巴結轉移和臨床分期呈負相關，轉染miR-424-5p模擬物可抑制NPC細胞增殖、遷移和侵襲;其通過下調 AKT3表達抑制AKT信號通路從而抑制NPC發生和發展[18]。miRNA-296-5p可通過逆轉轉化生長因子-β誘導的EMT抑制NPC細胞轉移和侵襲[19];miRNA-379-5p/YBX1軸調節NPC細胞EMT抑制NPC細胞的侵襲和遷移[20]。新近研究發現miR-206作為抑癌基因參與了多種人類惡性腫瘤的發生發展[21～25]。在NPC細胞中，miR-206顯著下調細胞周期促進基因周期素依賴激酶9（CDK9）的表達，導致細胞活性降低，細胞生長受抑制，遷移和侵襲能力減弱并誘導細胞凋亡[26]。研究還發現miRNA-331-3p在NPC組織和細胞系中表達明顯降低;NPC細胞外源性過表達miRNA-331-3p導致細胞增殖和侵襲轉移受抑制，細胞凋亡增加;其通過靶向下調真核細胞翻譯起始因子4B（eIF4B）的表達，抑制PI3K-AKT信號通路而抑制NPC進展[27]。NPC細胞低表達miR-375，高表達丙酮酸脫氫酶激酶1（PDK1），兩者表達水平呈負相關; miR-375通過靶向抑制PDK1從而抑制NPC細胞的增殖和侵襲[28]。鼻咽癌組織和細胞系低表達 miR-204，高表達趨化因子受體CXCR4，兩者表達呈負相關;miR-204通過靶向CXCR4調控NF-κB信號通路活性抑制鼻咽癌增殖、侵襲和轉移[29]。miR-34a在鼻咽癌組織中低表達，鼻咽癌細胞外源性過表達miR-34a抑制了細胞遷移和侵襲力，其通過抑制AKT信號通路抑制鼻咽癌侵襲和轉移[30]。因此，部分miRNA在NPC發生發展過程中起抑癌作用，其抑癌功能是通過靶向下調癌基因表達導致相關信號通路受抑制從而抑制腫瘤進程。NPC組織中抑癌miRNA表達下調促進NPC增殖、侵襲和轉移。

3展望

miRNA表達失衡參與了NPC發生和發展。miRNA通過靶向調控細胞內癌基因或抑癌基因表達從而激活或抑制相關信號通路，進而促進或抑制NPC進程。研究已證實與NPC密切相關的miRNA眾多，哪些 miRNA是NPC的啟動基因？他們在早期診斷NPC的價值如何？尚待進一步研究。

參考文獻

[1] BERTOLI G，CAVA C，CASTIGLIONI I.micrornas： new biomarkers for diagnosis， prognosis， therapy prediction and therapeutic tools for breast cancer[J]. Theranostics， 2015，5（10）：1122-1143.

[2] CHEN Y， WANG H， ZHU S， et al. MiR-483-5p promotes esophageal cancer progression by targeting KCNQ1[J].Biochem Biophys Res Commun，2020，531（4）：615-621.

[3] XU X， DANG Z， ZHANG J， et al.the mirna， mir-125b， inhibited invasion and metastasis of gastric-cancer cells by triggering the stat3 signaling pathway[J].Cancer Manag Res，2020，12：8569-8580.

[4] MAMINEZHAD H， GHANADIAN S， PAKRAVAN K， et al.A panel of six-circulating miRNA signature in serum and its potential diagnostic value in colorectal cancer[J].Life Sci，2020，258：118226.

[5] 羅鳳玲，杜紅纓，毛進星，等.血漿miRNA在鼻咽癌發生發展中的表達差異性研究[J].中國醫藥科學，2017，7（9）：217-219.

[6] 劉濤，王瑋，周潔，等.miRNA-630在鼻咽癌中的表達情況及與不良預后的相關性分析[J].檢驗醫學與臨床，2019，16（24）：3573-3576，3581.

[7] ZHAO Y， GU X， WANG Y.MicroRNA-103 promotes nasopharyngeal carcinoma through targeting TIMP-3 and the Wnt/β-catenin pathway[J]. Laryngoscope，2020，130（3）：E75-75E82.

[8] ZHANG Y，ZHANG H， LI X.MicroRNA-215 promoted the progression of nasopharyngeal carcinoma through targeting RB1 and activating Wnt/β-catenin pathway[J]. J BUON， 2020，25（3）：1579-1586.

[9] ZHU Q， ZHANG Q， GU M， et al.MIR106A-5p upregulation suppresses autophagy and accelerates malignant phenotype in nasopharyngeal carcinoma[J]. Autophagy，2020：1-17.

[10] MU J W，ZHOU X Y， WANG Q J，et al.MicroRNA-141-3p promoted the progression of nasopharyngeal carcinoma through targeting DLC1[J]. Eur Rev Med Pharmacol Sci，2020，24（21）：11105-11113.

[11] ZHONG J H，ZHONG J J，SHI Y N，et al.Prognostic potentials of miRNA-19a-3p and PDCD5 in nasopharynx carcinoma[J].Eur Rev Med Pharmacol Sci，2020，24（21）：11114-11119.

[12] WANG J，XU Y，WANG J，et al.Circulating miR-214-3p predicts nasopharyngeal carcinoma recurrence or metastasis[J].Clin Chim Acta， 2020，503：54-60.

[13] SUN J，YONG J，ZHANG H.MicroRNA-93， upregulated in serum of nasopharyngeal carcinoma patients， promotes tumor cell proliferation by targeting PDCD4[J].Exp Ther Med，2020，19（4）：2579-2587.

[14] MO X， YIN W， HUANG Y， et al.Expression of miR-3182 and EBV-miR-BART8-3p in nasopharyngeal carcinoma is correlated with distant metastasis[J]. Int J Clin Exp Pathol，2018，11（6）：3134-3140.

[15] LIN C，ZONG J，LIN W，et al.EBV-miR-BART8-3p induces epithelial-mesenchymal transition and promotes metastasis of nasopharyngeal carcinoma cells through activating NF-κB and Erk1/2 pathways[J]. J Exp Clin Cancer Res，2018，37（1）：283.

[16] JIANG C，LI L，XIANG Y Q，et al.Epstein-barr virus mirna bart2-5p promotes metastasis of nasopharyngeal carcinoma by suppressing RND3[J].Cancer Res，2020，80（10）：1957-1969.

[17] GAO L，XIONG X.MiR-223 inhibits the proliferation， invasion and EMT of nasopharyngeal carcinoma cells by targeting SSRP1[J]. Int J Clin Exp Pathol，2018，11（9）：4374-4384.

[18] ZHAO C，ZHAO F，CHEN H，et al.MicroRNA-424-5p inhibits the proliferation， migration， and invasion of nasopharyngeal carcinoma cells by decreasing AKT3 expression[J].Braz J Med Biol Res， 2020，53（7）：e9029.

[19] CHEN M， CHEN C， LUO H， et al.MicroRNA-296-5p inhibits cell metastasis and invasion in nasopharyngeal carcinoma by reversing transforming growth factor-β-induced epithelial-mesenchymal transition[J].Cell Mol Biol Lett，2020，25（1）：49.

[20] ZHANG F， DUAN C， YIN S， et al. MicroRNA-379-5p/YBX1 Axis Regulates Cellular EMT to Suppress Migration and Invasion of Nasopharyngeal Carcinoma Cells[J]. Cancer Manag Res，2020，12：4335-4346.

[21] LIU C， LI J， WANG W， et al. MiR-206 inhibits liver cancer stem cell expansion by regulating EGFR expression[J].Cell Cycle， 2020，19（10）：1077-1088.

[22] YANG Q，ZHANG L，ZHONG Y，et al.MiR-206 inhibits cell proliferation， invasion， and migration by down-regulating PTP1B in hepatocellular carcinoma[J].Biosci Rep，2019，39（5）：1023-1011.

[23] GUO Z，JIA H， GE J.MiR-206 suppresses proliferation and epithelial-mesenchymal transition of renal cell carcinoma by inhibiting CDK6 expression[J].Hum Cell，2020，33（3）：750-758.

[24] WANG P， GU J， WANG K， et al. MiR-206 inhibits thyroid cancer proliferation and invasion by targeting RAP1B[J].J Cell Biochem， 2019，120（11）：18927-18936.

[25] LIAO M， PENG L. MiR-206 may suppress non-small lung cancer metastasis by targeting CORO1C[J]. Cell Mol Biol Lett，2020，25（28）：22-49.

[26] GUO Q，REN X H， ZHAO C P，et al.MicroRNA-206 inhibits tumor metastasis of nasopharyngeal carcinoma through targeting G6PD[J].J Biol Regul Homeost Agents，2020，34（2）：1088-1029.

[27] XUEFANG Z，RUINIAN Z，LIJI J，et al.MiR-331-3p inhibits proliferation and promotes apoptosis of nasopharyngeal carcinoma cells by targeting elf4b-pi3k-akt pathway[J].Technol Cancer Res Treat，2020，19：1533033819892251.

[28] JIA-YUAN X，WEI S，FANG-FANG L，et al.MiR-375 inhibits the proliferation and invasion of nasopharyngeal carcinoma cells by suppressing PDK1[J]. Biomed Res Int，2020：9704245.

[29] ZONG G， HAN J，YUE Z，et al.Downregulation of miR-204 facilitates the progression of nasopharyngeal carcinoma by targeting CXCR4 through NF-κB signaling pathway[J]. J BUON，2020，25（2）：1098-1104.

[30] JIANG C， CHENG Z， JIANG T， et al.MicroRNA-34a inhibits cell invasion and epithelial-mesenchymal transition via targeting AXL/PI3K/AKT/Snail signaling in nasopharyngeal carcinoma[J]. Genes Genomics， 2020，42（8）：971-978.

（收稿日期：2021-06-23修回日期：2021-08-04）

（編輯：梁明佩）