漢桃葉藥材質量標準研究

【摘 要】 目的： 建立漢桃葉藥材的質量標準。方法：分別對不同產地漢桃葉藥材進行顯微鑒別、薄層色譜鑒別;參照《中國藥典》2020年版四部通則方法對漢桃葉藥材水分、總灰分、浸出物進行測定。結果：漢桃葉藥材顯微特征明顯;薄層色譜鑒別中，在與對照藥材色譜相應的位置上，顯相同顏色的熒光斑點;漢桃葉藥材水分、總灰分、醇溶性浸出物范圍分別為4.90%～6.15%，3.27%～4.95%，7.28%～8.55%。結論：該方法操作簡單，結果穩定可靠，可為漢桃葉藥材質量控制提供參考依據。

【關鍵詞】 漢桃葉;質量標準;顯微鑒別;薄層鑒別

【中圖分類號】R282"" 【文獻標志碼】 A""" 【文章編號】1007-8517（2022）10-0015-03

Study on Quality Standard of Schefflera leucantha

NIE Yushan1，3 KUANG Weimi1，3 HUANG Yong2 LI Xiaoshuang1，3 MA Xue1 LI Yongjun1 WANG Yonglin2*

1. State Key Laboratory of Functions and Applications of Medicinal Plants，Engineering Research Center for the Development and Application of Ethnic Medicine and TCM （Ministry of Education）， Guizhou Medical University， Guiyang 550004， China;

2.Guizhou Provincial Key Laboratory of Pharmaceutics， Guizhou Medical University， Guiyang 550004， China;

3.School of Pharmacy， Guizhou Medical University， Guiyang 550004， China

Abstract：

Objective To establish quality standard for S.leucantha. Methods" Microscopic identification and thin layer chromategraphy （TLC） identification were established for S.leucantha from different habitats. According to the four general principles method of Chinese Pharmacopoeia published in 2020， the moisture content， total ash and extract of S. leucantha were determined. Results The microscopic features were proper and the same color fluorescence spots were displayed at the same position as the reference substance chromatography in the TLC identification. The moisture content， the total ash and the alcohol-soluble extractives were 4.90%-6.15%， 3.27%-4.95%， 7.28%-8.55%.Conclusion The method is simple， stable and reliable， which can provide a reference for the quality control of S. leucantha.

Key words：Schefflera leucantha; Quality Standard; Microscopic Identification; TLC Identification

漢桃葉（Schefflera leucantha R.Viguier）為五加科植物鵝掌柴屬的帶葉莖枝或干燥莖枝，主要分布于我國廣西、貴州、云南、海南、廣東等地，多生于山谷或陰濕疏林中。性苦味甘，具有祛風止痛、舒經活絡等功效，是貴州省少數民族常用藥材[1-3]。藥理研究[3-4]表明，漢桃葉具有抗癌、抗氧化、抗色素沉著、抗炎、抗菌、抗病毒等生物活性。該藥材的化學成分主要是齊墩果烷型的五環三萜及其苷類，另外還含有甾醇、長鏈烯烴、有機酸、揮發油、倍半萜等成分[5-9]。目前關于漢桃葉藥材的質量控制尚不完善，在2003年版《貴州省中藥材、民族藥材質量標準》中，漢桃葉質量標準項下僅有性狀描述及莖橫切面顯微鑒別，其質量標準相對簡單。為完善其質量控制，本研究從漢桃葉藥材的顯微鑒別、薄層鑒別、水分、總灰分、醇溶性浸出物等方面進行研究，建立其質量標準，以期為其質量控制提供實驗依據。

1 儀器與試藥

1.1 儀器 CX41光學生物顯微鏡（S60明美顯微成像系統，奧林巴斯公司）;REPROSTAR3薄層數碼成像系統（瑞士CAMAG）;KQ5200B超聲波清洗器（昆山市超聲儀器有限公司）;EL240電子天平（梅特勒-托利多儀器上海有限公司）;KSW4馬弗爐（上海路達實驗儀器有限公司）;DK-98-Ⅱ恒溫水浴鍋（天津泰斯特有限公司）等。

1.2 藥材與試劑 漢桃葉樣品（見表1）均由貴州益佰制藥股份有限公司提供，經貴州中醫藥大學魏升華教授鑒定為五加科鵝掌柴屬植物白花鵝掌柴Schefflera leucantha R. Viguier. 的帶葉莖枝或干燥莖枝，憑證標本保存于貴州醫科大學貴州省藥物制劑重點實驗室，其藥材圖如圖1所示。

漢桃葉對照藥材（批號：121575-201503，中國食品藥品鑒定研究院）;水合氯醛（批號：20161121，天津市大茂化學試劑廠）;丙三醇（批號：20190302，天津市北辰方正試劑廠）;薄層色譜硅膠板G（批號：20201107，青島海洋化工有限公司）;聚酰胺薄膜（批號：20201214，浙江省臺州市路橋四甲生化塑料廠）;丙酮、硫酸（批號分別為：20200421、20180524，國藥集團化學試劑有限公司）;甲醇、石油醚（批號分別為：P1595640、P1790623，上海泰坦科技有公司）;甲酸（批號：20151013，天津市科密歐化學試劑有限公司）;乙酸乙酯、冰醋酸（批號分別為：1812101、1703101，上海申博化工有限公司）。上述試劑均為分析純，實驗用水為超純水。

2 方法與結果

2.1 顯微鑒別

2.1.1 漢桃葉橫切面特征 壁呈深棕色，木栓層為10余列細胞，皮層緊接木栓細胞，近木栓層處有1～3列石細胞，排列成環，內側有散在樹脂道。中柱鞘纖維束呈類圓形或半圓形，韌皮部較窄，有分泌道及纖維束，木質部導管直徑約為40～60 μm，呈多角形，射線寬1～4列細胞，髓部寬廣，外側少有分泌道，薄壁細胞含有草酸鈣簇晶及方晶。如圖2所示。

2.1.2 漢桃葉粉末特征 本品粉末棕黃色。纖維斷寬梭形或長梭形，長200 μm以上，直徑20～70 μm;多見草酸鈣方晶，直徑10～60 μm，亦可見草酸鈣簇晶;木栓細胞呈類方形;淀粉粒為橢圓形或類圓形，多為單粒，直徑8～50 μm，也有較多復粒，多為2～5粒組成;樹脂道碎片較多，內含黃色塊狀或滴狀分泌物;石細胞呈類圓形、長方形，孔溝明顯，直徑10～120 μm;導管易見，多為梯紋導管，亦可見螺紋導管。如圖3所示。

2.2 薄層鑒別

2.2.1 薄層色譜方法的建立 取本品粉末約1 g，加入20 mL 70%乙醇水溶液，超聲處理30 min，過濾，將濾液蒸干，所得殘渣用1 mL甲醇溶解，即得供試品溶液。另取0.5 g漢桃葉對照藥材，按上述方法制備對照藥材溶液。參照《中國藥典》2020年版四部通則0502 薄層色譜法試驗，分別吸取5 μL上述2種溶液，點于同一聚酰胺板上，用甲醇-水-甲酸（3.5∶1.5∶0.05， V/V/V）展開，取出，晾干，置于紫外光燈 （365 nm）下檢視。供試品溶液色譜中，在與對照藥材溶液色譜相應位置上，顯相同顏色的斑點。如圖4所示。

2.3 檢查

2.3.1 水分測定 參照 《中國藥典》2020年版四部通則0832水分測定法（第二法 烘干法）測定。5批漢桃葉中含水量為4.90%～6.15%，平均值5.73%，故暫定本品水分不得過7.0%。見表1。

2.3.2 總灰分測定 參照《中國藥典》2020年版四部通則2302 灰分測定法測定。5批漢桃葉中總灰分為3.27%～4.95%，平均值4.24%，暫定本品總灰分不得過6.0%。見表1。

2.3.3 醇溶性浸出物測定 參考《中國藥典》2020年版四部通則2201浸出物測定法（熱浸法），以70%乙醇為溶劑進行浸出物測定。5批漢桃葉70%醇溶性浸出物為7.28%～8.55%，平均值7.86%，暫定本品醇溶性浸出物不得少于6.0%。見表1。

3 討論

在探索薄層色譜條件時，分別以石油醚-乙酸乙酯-甲酸、石油醚-丙酮、氯仿-乙酸乙酯-甲酸乙酸、氯仿-甲醇-甲酸、乙酯-甲醇-甲酸等體系為展開劑，用青島海洋硅膠GF254、G板進行分離，但該方法分離效果差，斑點成形性不好，且色素干擾明顯，可能與漢桃葉的主要成分是五環三萜及其苷類，且極性相差較小有關。基于上述情況，換用聚酰胺板進行考察，極性物質通過與聚酰胺之間形成氫鍵吸附被分離物質，層析時，展開劑與被分離物在聚酰胺膜表面競爭形成氫鍵，氫鍵強弱決定分離效果。分別以甲醇-水、乙腈-水、甲醇-磷酸水、甲醇-甲酸水等體系為展開劑，用聚酰胺板進行分離，發現均能觀察到較為清晰的斑點，其中以甲醇-水-甲酸體系展開效果為最佳，故對此展開體系比例進行優化，最終確定展開劑條件為甲醇-水-甲酸（3.5∶1.5∶0.05， V/V/V）。在此展開條件下，聚酰胺板上呈現出兩個較為明顯的點。在確定薄層條件后，用樣品20200601對供試品溶液的穩定性做了考察，發現穩定性較好，方法穩定可靠。根據該藥材化學成分的性質選用70%乙醇作為浸出物提取溶劑，熱浸法提取率更高，故采用70%乙醇熱浸作為浸出物測定方法。

漢桃葉作為貴州省少數民族常用藥材，質量標準內容較為簡單。本課題在原有標準上完善了其項下“莖橫切面顯微鑒別”，另新增了漢桃葉藥材的粉末顯微鑒別、薄層鑒別、水分、總灰分、醇溶性浸出物等項，且方法操作簡便，結果穩定可靠。在本研究中，該藥材顯微鑒別特征明顯，所建立的薄層鑒別方法分離效果好，色譜斑點清晰，可為漢桃葉藥材的質量控制及進一步開發利用提供參考依據。

參考文獻

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（收稿日期：2021-10-09 編輯：劉 斌）

基金項目：國家重點研發計劃項目 （2018YFC1708100 ）;中央引導地方科技專項項目 （ 黔科中引地[2018]4006 ）; 貴州省科技計劃項目（黔科合平臺人才[2016]5677 ）。

作者簡介：聶雨杉（1997-），女，漢族，碩士研究生在讀，研究方向為藥劑學。E-mail：1812822843 @qq.com

通信作者：王永林（1954-），男，漢族，教授，博士生導師，研究方向為中藥藥效物質基礎及新藥開發。E-mail： gywyl@gmc.edu.cn