術前T 細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）、NLR 及PLR 比值對化膿性膽囊炎的預測價值

李倩，李航，李相磊

（開封市中心醫院檢驗科，河南 開封 475000）

化膿性膽囊炎是急性膽囊炎的嚴重并發癥，通常發病急，容易出現膽囊的壞疽、穿孔等危重情況，大量的膿性膽汁會容易引起感染性休克的表現，嚴重威脅患者生命健康[1,2]。 膽囊炎多發于中年人，尤其是中年肥胖女性發病概率更高，其病死率為5%～10%[3]。 臨床主張采用手術治療化膿性膽囊炎，如不及時進行手術可能引發腹膜炎，加重患者病情[4]。 但是目前各種膽囊炎的診斷主要依據術中觀察和術后的組織病理學，術前尚無統一指標用于指導膽囊炎的分型[5]。 因此，術前早期有效判斷膽囊炎類型對控制疾病發展、 選擇有效合適的治療方案具有不可忽視的意義。 化膿性膽囊炎的誘發因素比較多，通常認為其由局部化膿性感染引起，會累及鄰近器官感染發炎[6]。 機體對感染免疫以T 淋巴細胞介導的細胞免疫為主，參與調節蛋白質抗原引起的免疫應答過程，可清除細胞表面抗原，或改善細胞內微生物效應[7]。 中性粒細胞與淋巴細胞比值（neutrophil/lymphocyte ratio，NLR）和血小板與淋巴細胞比值（platelet-to-lymphoccyte ratio，PLR）是外周血常規指標，可反應機體炎癥狀態[8]。 但目前關于術前NLR、PLR 預測化膿性膽囊炎研究較少，鑒于此，本研究旨在探討術前T 淋巴細胞亞群（CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+）、NLR、PLR 預測化膿性膽囊炎的價值。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2018年2月-2021年2月本院治療的膽囊炎患者75 例作為本次研究的對象，并在我院行腔鏡膽囊切除術。 根據組織病理學特點分為化膿性膽囊炎,分為化膿性膽囊炎組和非化膿性膽囊炎組，非化膿性膽囊炎組43 例，化膿性膽囊炎32 例。 非化膿性膽囊炎組：男性與女性比例為19:24，年齡35～50歲，平均年齡43.12±3.24歲，體重指數21.96±2.34kg/m2。 化膿性膽囊炎組：男性與女性比例為12:20，年齡35～51歲，平均年齡44.12±3.04歲，體重指數22.46±2.74kg/m2。 納入標準：符合化膿性膽囊炎診斷標準[9]，經腹部B 型超聲確診，膽囊直徑≥10cm，膽囊壁厚度≥0.5 cm；符合膽囊炎手術特征；臨床資料完整。 排除標準：患有惡性腫瘤患者； 合并慢性肝腎功能不全；3月內進行其他腹部手術者；依從性差，臨床資料不全者。 化膿性膽囊炎組和非化膿性膽囊炎組患者年齡、性別、體重指數等基本資料差異無有統計學意義（P＞0.05）。本次研究已經與患者及患者家屬積極溝通，且已自愿簽署知情同意書。

1.2 手術方法 入組患者均行腔鏡膽囊切除術。 患者在術前12h 禁止飲食飲水，對患者實施氣管插管靜呼吸復合麻醉，采取仰頭高腳低臥位，向左側傾斜15°左右。 在患者腹部做一個切口，接著建立人工氣腹，保證腹腔內正常氣壓維持機體正常運轉。 通過腔鏡對患者腹腔進行觀察各項指標，術中保證患者生命安全。

1.3 觀察指標 收集患者年齡、性別、住院時間、是否伴有結石、是否伴有嚴重并發癥（膽囊穿孔、彌漫性腹膜炎及腹腔膿腫）。

1.4 觀察血清指標 采集所有入組患者外周靜脈血2ml，離心15min 取上清液，備用。 采用SYSMEX XN-2000 全自動血細胞分析儀檢測中性粒細胞中性粒細胞、淋巴細胞、血小板，統計中性粒細胞與淋巴細胞比值（neutrophil/lymphocyte ratio,NLR） 和血小板與淋巴細胞比值（platelet-to-lymphoccyte ratio, PLR）。 電化學發光法檢測血清降鈣素原（procalcitonin，PCT）、免疫比濁法檢測C-反應蛋白（C-reactive protein，CRP）。

1.5 T 淋巴細胞亞群檢測 采集所有入組患者外周靜脈血2ml，離心15min 取上清液，采用流式細胞術對CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+水平進行檢測，詳細操作步驟按照試劑盒指示進行。

1.6 統計學處理 采用SPSS 17.0 統計分析軟件進行統計分析，符合正態分布的計量資料以均數±標準差表示。 對于計數資料采用率表示，兩獨立樣本差異比較采取χ2分析。 兩兩組間的差異比較采用t檢驗。 根據受試者工作特征曲線(receiver operating characteristic curve，ROC) 判斷T 淋巴細胞、NLR/PLR 對化膿性膽囊炎的預測價值。 P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 兩組患者一般資料比較 兩組患者均無院內死亡情況。 兩組患者性別、年齡、體重指數、診治至手術時間及膽囊結石比較差異無有統計學意義（P＞0.05）。兩組患者膽囊穿孔、彌漫性腹膜炎、腹腔膿腫和發熱情況差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 兩組患者一般資料比較（n，%）

2.2 兩組患者血清NLR、PLR、PCT 和CRP 比較化膿性膽囊炎組NLR、PLR、PCT 和CRP 明顯高于非化膿性膽囊炎組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 兩組患者血清NLR、PLR、PCT 和CRP 情況比較（±s）

表2 兩組患者血清NLR、PLR、PCT 和CRP 情況比較（±s）

組別 NLR非化膿性膽囊炎組（n=43）化膿性膽囊炎組（n=32）5.37±1.06 PLR PCT（ng/ml）129.87±17.841.86±0.42 CRP（mg/L）25.33±7.89 8.21±1.14160.14±20.322.65±0.3952.47±15.62 t P 11.112＜0.001 6.848＜0.001 8.303＜0.001 9.845＜0.001

2.3 兩組T 淋巴細胞亞群情況比較 兩組患者血清CD8+無明顯變化，差異無統計學意義（P＞0.05）；非化膿性膽囊炎組患者血清CD3+、CD4+、CD4+/CD8+均高于化膿性膽囊炎組（P＜0.05）。 見表3。

表3 兩組T 淋巴細胞亞群情況比較（±s）

表3 兩組T 淋巴細胞亞群情況比較（±s）

組別 例數化膿性膽囊炎組非化膿性膽囊炎組43 CD3+70.54±8.86 CD4+38.14±6.32 CD8+25.43±3.22 CD4+/ CD8+1.53±0.24 32 77.94±6.3545.76±5.8327.52±2.961.69±0.22 t P 4.215＜0.001 5.336＜0.001 2.884 0.005 2.997 0.004

2.4 術前T 淋巴細胞、NLR、PLR 檢測對化膿性膽囊炎的預測價值 血清CD3+預測化膿性膽囊炎的AUC 為0.677，血清CD4+預測化膿性膽囊炎的AUC 為0.649，血清CD8+預測化膿性膽囊炎的AUC 為0.565，血清CD4+/CD8+預測化膿性膽囊炎的AUC 為0.752，NLR 預測化膿性膽囊炎的AUC為0.830，PLR 預測化膿性膽囊炎的AUC 為0.789，聯合預測的AUC 為0.956。 見圖1 和表4。

圖1 術前T 淋巴細胞、NLR、PLR 檢測對化膿性膽囊炎的的ROC 曲線

表4 T 淋巴細胞亞群對化膿性膽囊炎的預測價值

3 討論

化膿性膽囊炎是急性膽囊炎中較為常見疾病，其發病原因很多，包括機械性、化學性和細菌性，一般都是因為是結石堵塞膽囊管繼發感染、膽囊積液以致膽囊內壓力增高，導致膽囊壁壞死化膿[10,11]。 若未得到及時救治可能威脅患者的生命安全，選擇合適的方式進行治療，改善患者病情是目前重中之重。 但臨床采用的常規檢查診斷率較低，對病情的嚴重程度無法做到準確判斷[12]。 因此，目前迫切需要尋找早期化膿性膽囊炎有效且特異度高的診斷手段。

本研究通過比較非化膿性膽囊炎組和化膿性膽囊炎組患者一般臨床資料發現，兩組患者膽囊穿孔、彌漫性腹膜炎、腹腔膿腫和發熱情況,差異有統計學意義(P＜0.05)。有文獻報道，急性膽囊炎發生的危險因素有年齡、性別、高熱等。 劉南斌等人[13]研究發現年齡≥60歲和最高體溫≥38℃是急性進展迅速型壞疽性膽囊炎的危險因素。 而本文中并未發現兩組患者年齡存在差異，可能由于納入對象不同，造成組間差異不明顯。 本文同樣發現發熱可能是化膿性膽囊炎的影響因素。 化膿性膽囊炎組患者住院天數高于非化膿性膽囊炎組，表明化膿性膽囊炎病情相對復雜，需要的治療更多。 化膿性膽囊炎組膽囊穿孔、 彌漫性腹膜炎和腹腔膿腫的發生率明顯高于非化膿性膽囊炎組，同樣說明化膿性膽囊炎患者病情更為嚴重，出現各種并發癥的幾率更高，術后恢復時間長，治療成本高。

本研究中，化膿性膽囊炎組NLR、PLR、PCT 和CRP 顯著高于非化膿性膽囊炎組，差異具有統計學意義。 NLR 反映機體炎癥激活因子中性粒細胞與淋巴細胞的動態平衡過程，升高表示炎癥情況加重[14,15]。 既往研究表明，在炎癥性疾病，NLR 可以作為預測疾病嚴重程度和不靈預后的潛在生物標志物[16]。 PLR 是除NLR 外另一類炎癥反應重要標志物，并且NLR、PLR 在臨床中獲取簡便，不額外增加檢測費用，臨床可操作性強。

炎癥反應是臨床常見的一個病理過程，是機體對于刺激的一種防御反應,大多數疾病都有炎癥反應的參與，常引起T 淋巴細胞亞群的變化。 本研究發現，非化膿性膽囊炎組患者血清CD3+、CD4+、CD4+/ CD8+均顯著高于化膿性膽囊炎組。 T 淋巴細胞亞群主管細胞免疫,具有抵抗病毒和調節免疫系統功能的作用。 其細胞功能取決于T 淋巴細胞總值及其亞群的相對組成[17]。 正常情況下，亞群間互相拮抗達到平衡；當免疫失衡，細胞數及比值發生紊亂，則易引發疾病。 在此基礎上，本文通過繪制ROC 曲線以評價各術前炎癥標志物的情況，確定這些指標是否有助于診斷化膿性膽囊炎。 結果顯示，CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NLR、PLR 及聯合預測化膿性膽囊炎AUC 分別為0.677、0.649、0.565、0.752、0.830、0.789 和0.956。 CD8+曲線下面積僅為0.565，不適用于術前單獨鑒定化膿性膽囊炎。 在預測化膿性膽囊炎方面NLR 曲線下面積明顯高于其他指標，可用于初步鑒 別化膿性膽囊炎，CD4+/CD8+和PLR 可 用 于輔助 診斷。 CD3+、CD4+、CD8+、CD4+/CD8+、NLR、PLR 聯合診斷對化膿性膽囊炎有較高的診斷能效，可較準確預測化膿性膽囊炎，做到減少漏診、誤診，盡可能在早期發現化膿性膽囊炎，改善患者疾病進展。

綜上所述，CD4+/CD8+、NLR、PLR 可以作為診斷化膿性膽囊炎的生物學指標，NLR 單一指標診斷效能明顯優于其他指標，聯合所有指標優于單項指標檢測效能，對臨床預測化膿性膽囊炎有較高價值，適合臨床推廣應用。