LRG1和TNF-α在乳腺癌患者外周血中表達水平的變化及臨床意義

王詩然，鄒明明，歐津瑞，閆敏，孫凱源，孫平

1.牡丹江醫學院，黑龍江牡丹江 157011；2.牡丹江醫學院解剖教研室，黑龍江牡丹江 157011

乳腺癌是乳腺導管上皮及末端導管上皮發生的惡性腫瘤。大多數乳腺癌是可發現、可觸及的腫塊。少見表現為乳頭溢液及乳頭回縮。腋窩腫塊晚期，表現為皮膚潰瘍、皮膚結節、呈橘皮樣改變。患者生存期，取決于能否得到早期正確診斷和治療。超聲檢查是目前篩查乳腺惡性腫瘤的主要手段之一。近年來，乳腺癌的發病機制及治療靶點在飛速發展的分子生物學技術作用下受到了臨床日益廣泛的關注[1]，而在疾病的進展過程中，細胞因子在腫瘤免疫應答中發揮著極為重要的調節作用[2]。該研究回顧性分析2019年10月—2020年10月該院乳腺癌患者50例的臨床資料，探討乳腺癌患者外周血中LRG1和TNF-α表達水平的變化及臨床意義，現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

回顧性選取該院收治的乳腺癌患者50例作為乳腺癌組，年齡33～94歲，平均（54.2±9.3）歲；另回顧性選取同期乳腺良性病變患者50例作為乳腺良性病變組；健康體檢人員50名作為健康對照組。乳腺良性病變組患者年齡32～93歲，平均（53.5±9.1）歲；健康對照組人員年齡31～94歲，平均（53.2±9.4）歲；3組人員的一般資料比較差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。該研究經過醫院醫學倫理委員會批準，患者或家屬對研究知情同意。

1.2 納入與排除標準

納入標準：均符合乳腺癌的診斷標準[3]。排除標準：接受過放化療治療。

1.3 方法

在3組人員入院第2天上午6∶00抽取其3 mL空腹靜脈血，室溫下、4℃的溫度下分別靜置30 min～1 h、抗凝和離心15 min（速率：2 000 r/min），-70℃的低溫中保存上層血漿待檢。運用酶聯免疫吸附法，應用酶聯免疫吸附試劑盒（RD公司）對450 nm波長處樣品吸光度（OD）值進行檢測，將橫坐標、縱坐標分別設定為OD值、標志物濃度，繪制標準曲線來、計算樣品濃度，在此過程中分別采用curve exkpert軟件、應用標準曲線的回歸方程式；采用全自動酶標儀（Multiskan Ascent），運用酶聯免疫吸附法，應用武漢博士德生物工程有限公司生產的試劑盒對外周血中腫瘤壞死因子-α（TNF-α）表達水平進行測定。

1.4 觀察指標

3組人員的外周血中LRG1和TNF-α表達水平；乳腺癌組不同臨床分期患者的外周血中LRG1和TNF-α表達水平。

1.5 統計方法

采用SPSS 21.0統計學軟件處理數據，計量資料采用（±s）表示，組間差異比較進行t檢驗；P＜0.05為差異有統計學意義。

2 結果

2.1 3組研究對象外周血中LRG1和TNF-α表達水平比較

乳腺癌組、乳腺良性病變組患者的外周血中LRG1和TNF-α表達水平均顯著高于健康對照組，差異有統計學意義（F=471.229、424.059，P＜0.05）；乳腺癌組患者的外周血中LRG1和TNF-α表達水平均顯著高于乳腺良性病變組，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表1。

表1 3組研究對象外周血中LRG1和TNF-α表達水平比較（±s）

表1 3組研究對象外周血中LRG1和TNF-α表達水平比較（±s）

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2.2 乳腺癌組不同臨床分期患者外周血中LRG1和TNF-α表達水平比較

乳腺癌組Ⅱ期患者的外周血中LRG1和TNF-α表達水平均顯著低于Ⅲ期、Ⅳ期患者，差異有統計學意義（F=12.625、36.892，P＜0.05）；Ⅲ期患者的外周血中LRG1和TNF-α表達水平均顯著低于Ⅳ期患者，差異有統計學意義（P＜0.05）。見表2。

表2 乳腺癌組不同臨床分期患者外周血中LRG1和TNF-α表達水平比較（±s）

表2 乳腺癌組不同臨床分期患者外周血中LRG1和TNF-α表達水平比較（±s）

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3 討論

乳腺癌是乳腺導管上皮及末端導管上皮發生的惡性腫瘤，多見于成年女性，目前已成為女性惡性腫瘤的第一高發腫瘤。乳腺不是維持人體生命活動的重要器官，所以原位乳腺癌并不致命，但由于乳腺癌細胞喪失了正常細胞的特性，細胞之間連接松散，容易脫落，癌細胞一旦脫落，游離的癌細胞可以隨血液或淋巴液播散全身，形成轉移，引發機體其它癥狀，從而危及生命。大多數乳腺癌是可發現、可觸及的腫塊，少數表現為乳頭溢液及乳頭回縮。腋窩腫塊晚期，表現為皮膚潰瘍、皮膚結節、呈橘皮樣改變。患者生存期，取決于能否得到早期正確診斷和治療。超聲檢查是目前篩查乳腺惡性腫瘤的主要手段之一。

細胞因子是一類多肽物質，在體內的生物學效應廣泛，具有較多的種類，細胞因子之間相互制約、相互調節，促進復雜的細胞因子網絡形成，LRG1和TNFα在網絡中占有重要地位，一方面對機體自身免疫及抗感染免疫進行介導，另一方面對腫瘤生長、轉移造成了直接影響[4]。LRG1歸屬于富含亮氨酸重復序列家族，分子量、等電位點分別為44～55 kD、4.52～4.72，人LRG基因在染色體19p13.3上定位[5]。在中性粒細胞早期分化判定中，LRG1可能是一種新的標志物[6]。近年來，相關醫學研究表明，LRG是一類急相蛋白，高表達于急性期機體應答中[7-11]。相關醫學研究表明，LRG1信使RNA是微小RNA-335的靶點，將miR-335下調，進而上調轉化生長因子-β信號途徑成員絲裂原活化蛋白激酶磷酸酶-1等，從而為神經細胞瘤分化、遷移提供有利條件[12-13]。相關醫學學者研究表明，在乳腺癌的診斷中，血清LRG1水平提升（50.6 ng/mL→103.8 ng/mL），可能是一種潛在的生物標記物[14-15]。該研究結果表明，乳腺癌組患者的外周血中LRG1和TNF-α表達水平分別為（105.6±10.5）ng/mL、（82.8±19.6）pg/mL，乳腺良性病變組患者的外周血中LRG1和TNF-α表達水平分別為（64.3±10.2）ng/mL、（28.8±4.9）pg/mL，健康對照組的外周血中LRG1和TNF-α表達水平分別為（49.7±7.3）ng/mL、（18.9±3.2）pg/mL。乳腺癌組、乳腺良性病變組患者的外周血中LRG1表達水平顯著高于健康對照組（P＜0.05），乳腺癌組患者的外周血中LRG1表達水平顯著高于乳腺良性病變組（P＜0.05）。乳腺癌組Ⅱ期患者的外周血中LRG1表達水平顯著低于Ⅲ期、Ⅳ期患者（P＜0.05），Ⅲ期患者的外周血中LRG1表達水平顯著低于Ⅳ期患者（P＜0.05），和上述研究結果一致。

TNF-α一方面對一些腫瘤生長進行抑制，另一方面為卵巢癌的肺轉移提供有利條件，對腫瘤具有雙向作用[16]。其產生形式為自分泌、內分泌、旁分泌，對機體來說，高水平的TNF會引發惡液質[17]。相關醫學研究表明，和乳腺良性病變患者、健康人群相比，乳腺癌患者具有顯著較高的TNF-α水平，同時，隨著臨床分期的提升，TNF-α水平逐漸提升，以此認為在乳腺癌的發生發展過程中，TNF-α可能發揮了重要作用，對外周血中TNF-α水平進行檢測能夠為臨床預測乳腺癌患者病情進展提供有效依據[18-19]。該結果表明，乳腺癌組、乳腺良性病變組患者的外周血中TNF-α表達水平顯著高于健康對照組（P＜0.05），乳腺癌組患者的外周血中TNF-α表達水平顯著高于乳腺良性病變組（P＜0.05）。乳腺癌組Ⅱ期患者的外周血中TNF-α表達水平顯著低于Ⅲ期、Ⅳ期患者（P＜0.05），Ⅲ期患者的外周血中TNF-α表達水平顯著低于Ⅳ期患者（P＜0.05），和上述研究結果一致，說明高水平的TNF-α可能促進了乳腺癌的發生發展。發生這一現象的原因為TNF-α的分泌主體為腫瘤細胞、單核巨噬細胞，體內淋巴細胞在不斷加重的腫瘤負荷作用下被激活，將TNF-α過度釋放出來，提升血中TNF-α水平[20-22]。

綜上所述，乳腺癌患者外周血中LRG1和TNF-α表達水平升高，為臨床診斷乳腺癌及其分期提供了有效依據，值得推廣。