系統性紅斑狼瘡患者血清中HMGB1與IFNα的表達水平及其臨床意義

李 鑫

天津市南開區三潭醫院檢驗科，天津 300193

系統性紅斑狼瘡(SLE)是一種由于機體免疫調節紊亂所致的慢性炎癥性疾病，其臨床表現多樣[1]，體內積聚的致病性自身抗體與抗原結合形成免疫復合物(ICs)沉積于靶器官，ICs可激活樹突細胞(DCs)上的Toll樣受體(TLR)，引起Ⅰ型干擾素(IFN)系統的變化，通過促進CD4+T淋巴細胞、CD8+T淋巴細胞和B細胞的一系列自身免疫反應，引起免疫調節異常，尤其是細胞凋亡異常、細胞因子分泌異常等[2]。此過程中，高遷移率族蛋白-1(HMGB1)的釋放增加，后者可維持免疫復合物的穩定，促進HMGB1進入內涵體，與TLR接觸后引起進一步的自身免疫反應[3]。HMGB1活化DCs，促其產生大量IFNα，后者進一步活化免疫細胞，促進細胞因子生成[4]。HMGB1與IFNα可能在SLE的發病過程中相互促進，級聯放大。本研究檢測SLE患者血清IFNα、HMGB1及IL-1β等細胞因子水平，以探討IFNɑ、HMGB1等細胞因子在SLE疾病發生、發展中的作用，并評估IFNα、HMGB1與SLE疾病活動的相關性及這些指標檢測的臨床應用價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年1月至2019年12月在本院診治的70例SLE患者(SLE組)作為研究對象，均符合2017年美國風濕病學會和歐洲風濕病協會修訂的SLE分類標準[5]，女性63例，男性7例，平均年齡(37.1±8.6)歲；根據SLE病情活動指數(SLEDAI)又將SLE患者分為活動組(SLEDAI≥5)與非活動組(SLEDAI<5)，其中活動組44例，非活動組26 例，活動組、非活動組一般資料比較見表1。同期在本院診治的15例類風濕關節炎(RA)患者作為RA組，女性13例，男性2例，平均年齡(34.2±7.1)歲。健康對照組為同期在本院體檢健康者35例，平均年齡(35.2±7.1)歲。健康對照組、RA組與SLE組在年齡、性別上比較差異無統計學意義(P>0.05)。

表1 活動組、非活動組一般資料比較

1.2方法 各組研究對象空腹采靜脈血5 mL，1 500 r/min離心15 min，血清于-80 ℃放置待測。采用酶聯免疫吸附試驗(ELISA)檢測HMGB1(參考區間：HMGB1≤0.2 ng/mL)、IFNα(參考區間：IFNα≤1.8 pg/mL),HMGB1、IFNα水平在參考區間以外范圍即為異常。采用免疫磁珠法檢測白細胞介素(IL)-1β、IL-2、IL-4、IL-5和IL-6，均依據試劑盒說明書進行檢測。

2 結 果

2.1各組IFNα、HMGB1及細胞因子水平比較 SLE組IFNα、HMGB1及細胞因子水平高于健康對照組，差異有統計學意義(P<0.05)； SLE組IFNα、HMGB1、IL-2及IL-6與RA組比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表2。活動組IFNα、HMGB1、IL-6水平高于非活動組,差異有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表2 3組IFNα、HMGB1及細胞因子水平比較

表3 活動組與非活動組IFNα、HMGB1及細胞因子水平比較

2.2各指標間的相關性研究 HMGB1與IFNα呈正相關(r=0.76，P=0.012)，HMGB1、IFNα與SLEDAI呈正相關(r=0.65，P=0.013；r=0.41，P=0.031)；多元線性回歸分析表明，HMGB1與細胞因子IL-1β、IL-4、IL-5相關(β=-0.07，P=0.011；β=0.03，P=0.021；β=-2.11，P=0.003)，IFNα與IL-1β、IL-4相關(β=2.66，P=0.001；β=-1.21，P=0.003)。

2.3HMGB1異常、正常患者和IFNα異常、正常患者的SLE臨床表現比較 HMGB1異常患者腎臟損害、發熱占比與HMGB1正常患者比較，差異有統計學意義(P<0.05)；IFNα異常患者關節炎、腎臟損害、發熱占比與IFNα正常患者比較，差異有統計學意義(P<0.05)。見表4。

表4 HMGB1異常、正常患者和IFNα異常、正常患者的SLE臨床表現比較 [n(%)]

2.4評估活動組與非活動組血清IFNα、HMGB1水平的試驗效能 42例HMGB1異常患者中活動組患者為33例、非活動組患者為9例，28例HMGB1正常患者中活動組患者為11例、非活動組患者為17例；38例IFNα異常患者中活動組患者為32例、非活動組患者為6例，32例IFNα正常患者中活動組患者為12例，非活動組患者為20例。試驗效能見表5。

表5 SLE患者IFNα與HMGB1血清水平檢測的陽性預期值、陰性預期值、靈敏度與特異度

3 討 論

SLE 是一種自身免疫介導的累及多器官、多系統的彌漫性結締組織病，其發病機制復雜，近年研究表明[6]，Ⅰ型干擾素在SLE的發病中起重要作用。Ⅰ型干擾素是一種能夠有效調控細胞分裂、免疫系統活化、抗病毒感染，并且能夠抑制腫瘤生長的重要細胞因子。IFNα為其主要細胞因子，IFNα一般在病毒感染時由漿細胞樣樹突狀細胞(pDC)產生，pDC也稱為天然干擾素形成細胞，可產生大量IFNα[7]。在SLE患者中，pDC通過TLR誘導合成IFNα[8]。本研究發現，活動組IFNα、HMGB1、IL-6水平高于非活動組,差異有統計學意義(P<0.05)。QI等[9]研究發現狼瘡腎炎小鼠模型的血清IFNɑ水平升高，而有研究者發現SLE相關關節炎小鼠的IFNɑ水平也升高[10]，馬元平等[11]報道IFNα治療的不良反應之一就是發熱。以上研究結果證實了SLE患者血清中增高的IFNα水平與SLE的疾病嚴重程度有關，提示血清IFNα水平的高低可能可以作為一種SLE的診斷標準。

HMGB1是存在于真核細胞核內的非組蛋白染色體結合蛋白[12]。據研究報道，HMGB1可通過活化pCD來啟動SLE患者的自身免疫過程，其既是炎癥的早期啟動者(從部分壞死細胞的被動釋放)，也是炎癥晚期的促進者(巨噬細胞主動分泌HMGB1)，其不僅本身具有細胞因子樣效應，而且可誘導巨噬細胞和中性粒細胞等產生更多炎癥介質，進一步放大炎癥[13]。本研究結果提示，血清HMGB1可作為評價SLE患者病情活動性的一個指標。本研究結果與文獻[14]結果類似，FENG等[15]研究結果提示HMGB1參與了SLE的發病過程，而且與病情活動有關，認為HMGB1可能參與了SLE患者天然免疫激活，釋放大量的免疫刺激因子，形成免疫復合物，并沉積在皮膚、腎等組織、器官的小血管床，引起皮膚、腎等靶器官損害。本研究通過對血清IFNα、HMGB1水平區分活動組與非活動組SLE患者的試驗效能分析表明，二者能夠較好地區分活動組與非活動組SLE患者，具有較好的靈敏度與特異度。

有研究報道，SLE患者血清促炎細胞因子IL-1β、IL-6和TNFa水平升高，且與疾病活動度相關[16]，本研究中IL-6水平也有類似發現。本研究結果發現，IL-1β與HMGB1及IFNα相關，說明IL-1β可能由IFNα/HMGB1相關的免疫反應誘導產生；而且，Th2相關細胞因子IL-4、IL-5與 IFNα/HMGB1的相關性表明Th2相關的體液免疫反應與SLE發病密切相關。SLE是一種典型的自身免疫性疾病，SLE中有多克隆B細胞的活化增殖，進而增加了自身抗體的產生，但分泌自身抗體的多克隆B細胞的活化有賴于自身抗原的驅動和T細胞的輔助。T細胞異常在SLE發病中尤為重要。Th2型細胞因子水平增加，可擴大炎性反應，活化B細胞，導致大量的自身抗體產生[17]。

綜上所述，IFNα、HMGB1參與了SLE的發生、發展，與疾病活動度及臨床表現均相關。本研究從臨床應用角度評估了IFNα/HMGB1區分活動組與非活動組SLE患者的試驗效能，其應用前景尚需加大樣本量做進一步的研究。