循環腫瘤細胞在非小細胞肺癌患者中的水平及其與腫瘤標志物的關系研究

趙潔敏 左萬里 廖悅華

1江門市中心醫院（中山大學附屬江門醫院）呼吸與危重癥醫學科，江門 529000；2江門市中心醫院（中山大學附屬江門醫院）病理科，江門 529000

非小細胞肺癌（NSCLC）是一種常見的惡性腫瘤疾病，其主要是以呼吸困難、胸痛等癥狀為臨床表現，且具有起病隱匿、病情進展性發展等特點，若患者未能予以及時有效的治療措施，則可隨著病情進展發生轉移、浸潤，出現膿胸、病理性骨折等并發癥，進而嚴重影響其生存質量。NSCLC發病早期多無明顯癥狀，因此可導致大多數患者在臨床確診時病情已屬晚期，錯失了最佳治療時間窗，同時患者5年生存率低于15%，故臨床早期診斷NSCLC疾病在患者后期治療中具有重要的指導意義。循環腫瘤細胞（CTCs）是一種源于原發性或轉移性腫瘤并脫落于循環系統的活細胞，且可在一定條件下轉變為轉移灶，進而出現侵犯和轉移，造成繼發性損害［1］。腫瘤標志物主要源于惡性腫瘤細胞，其可包括糖類抗原（CA125）、癌胚抗原（CEA）、細胞角蛋白19片段（CYFRA21-1）等物質，且可用于反映腫瘤發生、發展等進程［2］。本研究旨在探討CTCs在NSCLC患者中的水平及其與腫瘤標志物的關系，現報道如下。

資料與方法

1、基礎資料

回顧性選取2020年3月至2021年2月江門市中心醫院收治的NSCLC患者50例作為研究對象，并整理與分析其臨床資料，所有患者均進行CTCs檢查，按照其水平將其分為陽性組（30例，≥4%）、陰性組（20例，＜4%）。診斷標準：參照《非小細胞肺癌診療指南：循證醫學與治療學基礎》［3］中的診斷標準。納入標準：符合以上診斷標準，并經病理學檢查確診者；臨床資料齊全者；入組前30 d未進行相關治療（放化療及靶向治療）者等。排除標準：合并其他惡性腫瘤者；有肝、腎功能障礙者；嚴重性感染性疾病者；入組前5年內診斷有其他惡性疾病者；影像學已有其他器官轉移征象者；凝血功能障礙者等。此項研究經江門市中心醫院醫學倫理委員會審批通過。

2、方法

于所有患者入院后，予以CTCs檢測。取患者肘正中靜脈血5 ml后，于24 d內使用免疫磁珠陰性富集法進行富集腫瘤細胞，而后應用CTCs檢測系統［萊爾（北京）醫療器械有限公司］進行檢測外周CTCs計數水平。

3、觀察指標

①外周CTCs在不同性別、年齡、病理類型的NSCLC患者中陽性率情況，統計NSCLC患者的臨床資料，主要包括不同性別、年齡、病理類型等情況，并計算外周CTCs計數在不同性別、年齡、病理類型的NSCLC患者中陽性率。其中病理類型標準使用《WHO（2015）肺腫瘤組織學分類》［4］。②外周CTCs在不同分期的NSCLC患者中陽性率情況，統計NSCLC患者的不同分期資料，并計算外周CTCs在不同分期的NSCLC患者中陽性率。其中分期標準使用《國際肺癌研究協會第八版國際肺癌TNM分期修訂稿解讀》［5］。③血清CEA、CA125、CYFRA21-1與外周CTCs的關系，于所有患者入院后，取其肘正中靜脈血5 ml后，以3 000 r/min離心10 min，離心半徑為15 cm，得血清，血清CEA、CA125、CYFRA21-1水平檢測使用E2010全自動電化學發光免疫分析儀（瑞士羅氏公司）。

4、統計學分析

應用SPSS 22.0軟件分析數據，符合正態分布的計量資料以（±s）的形式表示，用獨立樣本t檢驗；計數資料以［例（%）］表示，比較采用χ2檢驗，經Spearman分析相關性，同時以P＜0.05為差異有統計學意義。

結 果

1、外周CTCs在不同性別、年齡、病理類型的NSCLC患者中陽性率情況

50例NSCLC患者的外周CTCs計數水平為（5.36±1.12）%，并按照其計數水平將所有患者分為陽性組（30例，≥4%）、陰性組（20例，＜4%）。在NSCLC患者，陽性組、陰性組的不同性別、年齡、病理類型占比經比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），見表1。

表1 外周CTCs在不同性別、年齡、病理類型的NSCLC患者中的陽性情況[例（%）]

2、外周CTCs在不同分期的NSCLC患者中陽性率情況

在NSCLC患者，陽性組、陰性組的T、N、M分期經比較差異均無統計學意義（均P＞0.05），而與陽性組相比，陰性組臨床Ⅲ期占比高于陽性組，臨床Ⅳ期低于陽性組（均P＜0.05）。見表2。

表2 外周CTCs在不同分期的NSCLC患者中陽性情況[例（%）]

3、血清CEA、CA125、CYFRA21-1與外周CTCs的關系

在NSCLC患者，與陽性組相比，陰性組的血清CEA、CA125、CYFRA21-1水平降低（均P＜0.05），見表3。

表3 NSCLC患者血清CEA、CA125、CYFRA21-1與外周CTCs的關系（±s）

表3 NSCLC患者血清CEA、CA125、CYFRA21-1與外周CTCs的關系（±s）

注：NSCLC為非小細胞肺癌，CEA為癌胚抗原，CA125為糖類抗原，CYFRA21-1為細胞角蛋白19片段，CTCs為循環腫瘤細胞

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4、血清CEA、CA125、CYFRA21-1與外周CTCs的相關性

經Spearman相關性分析，外周CTCs水平與血清CEA、CA125、CYFRA21-1水平均呈正相關關系（r=0.445、0.436、0.423，均P＜0.05）。

討 論

NSCLC主要是因吸煙、職業因素等致病因素導致機體支氣管黏膜上皮或肺泡上皮細胞發生異常增長，進而導致肺功能下降的一種疾病，近幾年，NSCLC的發病率呈逐年升高趨勢且趨向年輕化，現已對患者的身心健康及安全造成了不利影響。

外周CTCs是一種具有發展為轉移病變潛力腫瘤細胞，其可作為腫瘤轉移的主要途徑，且可真實反映腫瘤負荷，故其水平升高可提示患者的腫瘤病情惡化，同時其還可作為反映患者治療效果及預后的敏感指標，進而以有利于為患者合理個體化治療提供一定依據［6］。本研究結果顯示，在NSCLC患者，陽性組、陰性組的性別、年齡、病理類型及TNM分期經比較無明顯差異，而與陽性組相比，陰性組Ⅲ期占比高于陽性組、Ⅳ期低于陽性組，表明在NSCLC患者中，外周CTCs計數與性別、年齡、病理類型、TNM分期無明顯關系，外周CTCs計數水平可隨著臨床分期進展而升高，與呂曉偉和陸海軍［7］的研究結果相符。在NSCLC患者預后及評價治療效果中，血清CEA、CA125、CYFRA21-1可作為敏感的腫瘤標志物，其水平越高表明患者的腫瘤病情越嚴重，預后及治療效果越差。相關研究表明，外周CTCs計數水平可用于早期診斷NSCLC，且具有較高的確診率，因此，血清腫瘤標志物可與外周CTCs計數水平存在一定的關系［8］。本研究結果顯示，在NSCLC患者，與陽性組相比，陰性組的血清CEA、CA125、CYFRA21-1水平降低，外周CTCs水平與血清CEA、CA125、CYFRA21-1水平均呈正相關關系，表明NSCLC患者外周CTCs計數水平與血清腫瘤標志物水平呈正相關關系，與費小東［9］的研究結果相符。

綜上，在NSCLC患者，外周CTCs計數水平與性別、年齡、病理類型、TNM分期無明顯關系，而在臨床Ⅲ期患者中外周CTCs計數水平較低，Ⅳ期患者中外周CTCs計數水平較高，且外周CTCs水平與血清腫瘤標志物水平均呈正相關關系。但因此項研究具有一定的缺點，如選取的樣本量較少，其可導致統計學結果發生一定的偏倚，進而不能明確其間是否具有關聯性。因此臨床需采取大樣本量、多中心進行深入研究，以便提高此項研究結果的準確性。

利益沖突所有作者均聲明不存在利益沖突