四磨湯與功能性消化不良模型大鼠胃RhoA及ROCK 的關系研究

邱娟娟，李玉春，邱 陽，郭 莉，劉越堅，萬嘉嘉，熊永建，吳國鍇，郭慧淑

（大連醫科大學附屬第一醫院中心實驗室，遼寧 大連 116011）

功能性消化不良（functional dyspepsia，FD）是臨床常見的胃腸道紊亂的功能性疾病[1]。功能性消化不良發病率高，但病因病機未完全明確。功能性消化不良盡管不會危及生命安全，但是嚴重影響生活質量。胃腸動力障礙是FD 主要的病理生理學基礎。四磨湯是治療功能性消化不良的常用中藥方劑[2]。本實驗觀察功能性消化不良模型大鼠胃RhoA 及ROCK 表達的變化，初步探討RhoA 及ROCK 與功能性消化不良發病機制的關系及四磨湯干預作用機制。

1 材料與方法

1.1 材料

1.1.1 動物 健康雄性SD 大鼠，體質量（200 ± 20）g，清潔級；出生7 日SD 乳鼠，清潔級。大鼠與乳鼠均購于大連醫科大學SPF 動物中心。

1.1.2 主要試劑及儀器 Y27632（Selleck）；四磨湯口服液（湖南漢森制藥股份有限公司）；碘乙酰胺和蔗糖（Sigma）；RNA 提取的試劑盒，反轉錄試劑盒和Real-time PCR 試劑盒（大連寶生物公司）；小平臺；Stepone plus 熒光定量PCR 儀（ABI）。生物多道記錄儀（BIOPAC）。

1.2 胃平滑肌縱行肌條收縮作用檢測 健康雄性SD 大鼠禁食24 h，不禁水。采用10% 水合氯醛（0.3 mL/100 g 體質量）麻醉大鼠，取出全胃。用剪刀沿胃小彎打開胃，用Krebs 液漂洗。去除黏膜層，取平行于胃縱行肌纖維走向的10 mm×1.5 mm 肌條，固定于37℃恒溫灌流槽內，Krebs 液灌流，并持續通入95% 氧氣和5% 二氧化碳混合氧，利用生物多道記錄儀記錄胃縱行平滑肌自發性收縮活動。用37 ℃新鮮的Krebs 液持續灌流，孵育60 min 左右，自發性收縮穩定出現后開始實驗，加入終濃度1.49×10-4g/mL 四磨湯口服液，描記大鼠胃縱行平滑肌……