杜仲黃酮對2 型糖尿病小鼠胰腺凋亡因子的影響

范春惠，張琳惠，鄭 妮

（1.浙江大學醫(yī)學院附屬兒童醫(yī)院，杭州 310000；2.南方科技大學醫(yī)院，廣東 深圳 518000）

2 型糖尿病（T2DM）發(fā)病機制主要是前期的胰島素抵抗和后期的胰島細胞功能障礙或受損凋亡[1]。隨著T2DM 病程的發(fā)展，胰島細胞數(shù)量逐漸減少，胰島功能受損逐漸加劇，而胰腺細胞凋亡是其數(shù)量減少、胰島素分泌功能下降的主要因素之一[2]。杜仲黃酮是杜仲科植物杜仲（Eucommia ulmoidesOliver）的干燥樹皮中提取的主要成分。研究[3-4]表明，杜仲黃酮有良好的降糖、抗氧化應激效果，本研究基于課題組前期研究（通過尾靜脈注射鏈脲佐菌素聯(lián)合高脂高糖飲食共同誘導構建糖尿病小鼠模型）結果，探討杜仲黃酮對T2DM 小鼠胰腺凋亡因子的影響。

1 材料與方法

1.1 動物 雄性昆明小鼠，SPF 級，體質量18～22 g，購自浙江大學實驗動物中心，合格證號：SCXK（浙）2019-0023。小鼠飼養(yǎng)于通風良好環(huán)境，室溫18～25 ℃，相對濕度40%～70%，12 h 光照晝夜循環(huán)。實驗開始前小鼠進行適應性喂養(yǎng)1 周。

1.2 藥物及試劑 鹽酸二甲雙胍片（京豐制藥有限公司，批號：191115）；STZ（美國Sigma 公司，批號：B1863）；白介素-6（IL-6）、腫瘤壞死因子-α（TNF-α）、細胞凋亡因子Fas、可溶性細胞凋亡因子配體Fasl、C-肽、氧自由基（ROS）試劑盒（南京建成生物工程研究所，批號：20200918、20200925、20200927、20200908、20200911、20200906）；Bcl-2、Bax 一抗（英國Abcam 公司，批號：B2011、B2017）；杜仲黃酮提取：采用醇提取法提取杜仲黃酮。首先將干燥杜仲進行充分粉碎，粉碎藥材置于容器中采用70%乙醇（藥材:70%乙醇=1:15），在80 ℃條件下加熱回流提取2 h，連續(xù)提取3 次。將提取液進行過濾濃縮，獲得干燥杜仲黃酮提取物。

1.3 主要儀器 9602A-酶標儀（北京艾普生物設備有限公司）；羅氏卓越型血糖儀（瑞士ACCU-CHEK Performa）；……