鄭丹妮,陳思哲,吳芷玥,張一涵,崔 瑜,薛 闖,康 巍*
(1.大連理工大學生物工程學院,遼寧 大連 116024;2.大連理工大學寧波研究院,浙江 寧波 116038;3.石家莊第三醫院,石家莊 050011)
α-法尼烯(C15H24)是一種倍半萜烯[1],多項研究表明其在多種中草藥,如姜黃[2-4]、陳皮[5]、江香薷[6]、檀香[7]發揮著重要功能。例如,姜黃具有抗腫瘤、抗氧化、降血糖等作用,其主要功效成分為酚酸類和萜烯類物質[3],已有研究對姜黃的功能成分及主要藥理活性進行分析,結果表明姜黃揮發油中的倍半萜類物質可以起到抗氧化、抗感染的良好功效,其中的倍半萜主要為α-法尼烯[2]。α-法尼烯主要存在于水果表皮[8]。利用合成生物學方法在異源微生物細胞工廠中生產α-法尼烯具有安全、節能、綠色環保、產物純度高等優勢[9]。已有研究利用大腸桿菌[9]、畢赤酵母[10]實現α-法尼烯在異源微生物中的合成。
目前,α-法尼烯的主要檢測方法有固相萃取-比色法[11]、氣相色譜法[12-13]、高效液相色譜法[14]、氣相色譜質譜聯用法 [15]等。2011 年,Seon-Won Kim 團隊設計了一種人工合成α-法尼烯合酶的基因,但是該研究間接的用反式α-法尼烯為標準化合物對產物進行定量分析[16]。2021 年,江南大學石貴陽研究團隊采用高效液相色譜法(HPLC)對α-法尼烯進行定量分析[14],但是α-法尼烯沸點為260 ℃,是一種具有揮發性的物質,因此基于GC-MS 的分析方法更適合用于分析該揮發性產物。然而,目前還缺乏一種快速、靈敏的基于GC-MS 的α-法尼烯檢測方法,特別是針對于成分復雜的細胞提取液中的法尼烯的檢測。
本研究選……