院內制劑消腎顆粒的藥學研究

初洪波，丁 濤，陳 銳

(1.長春中醫藥大學附屬醫院，長春 130021；2.吉林省中醫藥科學院，長春 130012；3.長春中醫藥大 學，長春 130117）

消腎顆粒處方的理論基礎源于國家名中醫南征教授的解毒通絡保腎法，具有保護腎功能的作用，同時兼顧降低血糖和血脂，是在仝小林院士和南征教授指導下的陳銳教授治療糖尿病腎病的經驗方[1-6]。制備工藝和質量標準研究目的是為了保證消腎顆粒臨床療效的傳遞及方便患者使用，現報道如下。

1 材料與儀器

1.1 實驗儀器 小試設備：小型混合槽、小型擺式顆粒機（上海天和制藥機械廠）；電子分析天平：千分之一天平（島津），萬分之一天平（賽多利斯）；冷卻、烘干、粉碎和超聲設備：冷卻水循環裝置（上海愛朗儀器有限公司），鼓風干燥箱（上海精宏），真空干燥箱（上海一恒）；薄層照相設備：瑞士CAMAG 薄層色譜成像系統。

1.2 對照品、對照藥材和試劑 黃連對照藥材（批號：121752-201801）、赤芍對 照藥材（批號：121093-201 803）、大黃對照藥材（批號：120902-201912）、鹽酸小檗堿對照品（批號：110713-201814）、芍藥苷對照品（批號：110736-201807）；試劑均為分析純；消腎顆粒樣品1～3。

2 消腎顆粒的工藝研究

2.1 工藝參數 提取工藝參數：煎煮3 次，加8 倍量水，每次2 h，合并提取液；成型性工藝參數：提取液濃縮至稠膏，加入藥用糊精制 成顆粒（稠膏60℃時的相對密度為1.15～1.20，稠膏與藥用糊精的重量比為1:2）。

2.2 提取工藝的優選 考察指標：出膏率?？疾煲蛩兀ˋ：加水量；B：時間；C：次數；D：空白），見表1。

表1 L9（34）正交試驗因素及水平

總量稱定處方中的藥材，進行L9（34）正交試驗。條件按表2，共進行9 次實驗。計算干浸膏提取率。結果見表2。

表2 L9（34）正交試驗安排及結果分析

2.3 成型工藝研究 考察消腎顆粒的稠膏的密度及測定溫度，考察加入的輔料種類和比例。

2.3.1 稠膏的制備 提取液濃縮至稠膏。在60℃時測定相對密度，根據實驗結果和以往的經驗確定相對密度為1.15～1.20［7-12］。

2.3.2 選擇輔料 選擇4 種常用輔料，稠膏與輔料的比例見下表，軟材與輔料種類的關系見表4。乳糖、蔗糖和藥用糊精的試驗結果較好，但是乳糖的成本高，蔗糖的用量大。同時考慮做成無糖顆粒，藥用糊精被確定為制粒輔料[13-16]。

表4 制粒輔料選擇的考察

分別運用直觀分析和方差分析的方法，剖析表2 和表3 的數據，可知B 因素（提取時間）無顯著性，A 因素（加水量）的P＜0.05（具有統計學意義）、C因素（提取次數）的P＜0.01（具有統計學意義）。確定提取工藝的因素與水平組合為A3B3C3，即煎煮3 次，8 倍量水，每次2 h［17-27］。

表3 方差分析表

3 薄層色譜鑒別方法

3.1 黃連薄層色譜鑒別 供試品溶 液：消腎顆粒的研細粉末15 g，超聲處理（時間為30 min，溶劑為甲醇50 mL），濾液 蒸干。加水10 mL 溶解殘渣，調pH 值=10（滴加濃氨 試液）。振搖提取3 次（提取溶劑為乙醚10 mL），蒸干乙醚液，加甲醇2 mL 溶解殘渣。對照品溶液：每1 mL 含0.5 mg 鹽酸小檗堿的 甲醇溶液。對照藥材溶液：對照藥材0.5 g，超聲處理（時間為30 min，溶劑為甲醇25 mL），制備方法同供 試品溶液制備方法。黃連的陰性對照溶液：消腎顆粒的黃連陰性樣品粉末15 g 超聲處理（時間為30 min，溶劑為甲醇50 mL），制備方法同供試品溶液制備方 法。點樣方式和點樣量：5 μL 定量毛細管，點狀，各5 μL 溶液。薄層板類 型：硅膠G。展開條件：用濃氨試液預飽和20 min，環己烷-乙酸乙酯-異丙醇-甲醇-水-三乙胺=3:3.5:1:1.5:0.5:1。顯色方式：365 nm 紫外光燈[28-31]。結果見圖1。

圖1 黃連薄層鑒別

3.2 赤芍薄層色譜鑒別 供試品溶液：消腎顆粒的研細粉末10 g，超聲處理（時間為30 min，溶劑為水飽和的正丁醇50 mL），濾液蒸干。加10%乙醇5 mL溶解殘渣，通過大孔吸附樹脂柱（D101 型，內徑為2.0 cm，長15 cm），分別以10%乙醇100 mL、50%乙醇200 mL 洗脫，棄去10%乙醇洗脫液，蒸 干50%乙醇洗脫液，加甲醇2 mL 溶 解殘渣。對照品溶液：每1 mL 含2 mg 芍藥苷的乙醇溶液。對照藥材溶液：赤芍對照藥材1 g，超聲處理（時間為30 min，溶劑 為水飽和的正丁醇25 mL），制備方法同供試品溶液制備方法。赤芍的陰性對照溶液：消腎顆粒的赤芍陰性樣品粉末10 g，超聲處理（時間為30 min，溶劑為水飽和的正丁醇50 mL），制備方法同供試品溶液制備方法。點樣方式和點樣量：5 μL定量毛細管，點狀，各5 μL 溶液。薄層板類型：硅膠G。展開條件：三氯甲 烷-甲醇-水（13:7:2）10℃以下放置的下層溶液。顯色方式：5%香草醛硫酸溶液，加熱至斑點清晰[32-34]。結果見圖2。

圖2 赤 芍薄層鑒別

3.3 大黃薄層色譜鑒別 供試品溶液：消腎顆粒的研細粉末10 g，超聲處理（時間為30 min，溶劑為甲醇50 mL），濾液蒸干，加水20 mL 溶解殘渣。振搖提取3 次，提取溶劑為乙酸乙酯20 mL，蒸干乙酸乙酯液，加甲醇2 mL 溶解殘渣。對照藥材溶液：大黃對照藥材0.5 g，超聲處理（時間為30 min，溶劑為甲醇25 mL），制備方法同供試品溶液制備方法。大黃的陰性對照溶液：消腎顆粒的大黃陰性 樣品粉末10 g，超聲處理（時間為30 min，溶劑為甲醇50 mL），制備方法同供試品溶液制備方法。點樣方式和點樣量：5 μL 定量毛細管，點狀，各10 μL 溶液。薄層板類型：硅膠G。展開條件：石油醚（30～60℃）-甲酸乙酯-甲酸=15:5:1 的上層溶液。顯色方式：365 nm 紫外光燈[35-36]。結果見圖3。

圖3 大黃薄層鑒別

4 小結

消腎顆粒采用傳統的水提工藝，通過工藝優化保證了處方中有效成分的提取。采用藥用糊精作為制劑輔料，消腎顆粒實驗成品成型好，粒度合格，溶化性好。代表性藥材的薄層色譜鑒別專屬性和重現性良好，保證制劑的質量的穩定可控。上述研究，保證了臨床療效的傳遞，方便患者使用。