氣相色譜-質譜法測定新會陳皮中甲氨基苯甲酸甲酯含量

◎ 高綺倩

（廣東省江門市質量計量監督檢測所，廣東 江門 529000）

陳皮為蕓香科植物橘及其栽培變種的干燥成熟果皮。藥材分為陳皮和廣陳皮，其中廣陳皮中又以新會陳皮獨居道地藥材特色，是廣陳皮的上品[1-2]。研究表明，陳皮所含的化學成分較多，其中以黃酮類成分為主，此外還含有檸檬苦素類、生物堿類及揮發油類等。廣陳皮和新會陳皮在化學成分如黃酮類、生物堿類、揮發油類的種類和含量略有差異[3]。在揮發油中，新會陳皮含有含量較高的2-甲氨基苯甲酸甲酯成分，與其他產地的陳皮區分顯著[4-5]。但陳皮揮發油的提取耗時較長，且其中的2-甲氨基苯甲酸甲酯的含量并不能直觀體現新會陳皮中的含量。因此，建立直接測定新會陳皮中2-甲氨基苯甲酸甲酯含量的方法，具有較大的實際意義。

1 材料與方法

1.1 儀器與試劑

氣相色譜質譜聯用儀：GCMS-QP2010，島津；2-甲氨基苯甲酸甲酯：5 g，95.0%，CAS 號為85-91-6，上海安譜；無水乙醇：色譜純，德國CNW。

1.2 儀器條件

1.2.1 色譜條件

SH-I-5Sil MS 石英毛細管柱（30 m×0.25 mm×0.25 μm）；進樣口溫度：250 ℃；升溫程序：初始柱溫130 ℃，保持4 min；以20 ℃·min-1升溫至280 ℃，保持5 min；載氣：氦氣（純度99.99%）。

1.2.2 質譜條件

電離方式：電子轟擊電離源（EI）；電離能量0.3 kV；接口溫度：250 ℃；離子源溫度：230 ℃；選擇離子監測模式（SIM）；保留時間：6.33 min；定性離子（m/z）：165、105、104、132；定量離子（m/z）：165；溶劑延遲：2.5 min。

1.3 標準溶液的配制

準確稱取0.052 6 g 2-甲氨基苯甲酸甲酯，用無水乙醇溶解并定容于50 mL 容量瓶中，配制成1 000 mg·L-1標準儲備溶液，于4 ℃冰箱中避光保存。使用前根據需要稀釋成所需濃度的系列標準溶液。

1.4 試樣的制備與處理

1.4.1 試樣的制備

取約100 g樣品，經粉碎后過二號篩（孔徑0.85 mm，24 目），混勻后裝入密封袋待用。

1.4.2 試樣的處理

準確稱取1.0 g 試樣于250 mL 具塞碘量瓶中，加入100 mL 無水乙醇，渦旋混勻1 min，超聲提取30 min，上清液用慢速濾紙過濾。吸取過濾后的試液2.00 mL于10 mL 容量瓶中，加入無水乙醇至刻度，搖勻后上機測定。

1.5 樣品的測定

將試樣溶液注入氣相色譜質譜儀，得到2-甲氨基苯甲酸甲酯的定量離子（m/z）165 的峰面積，根據濃度繪制外標法標準曲線，結合前處理稀釋倍數，得出樣品中2-甲氨基苯甲酸甲酯的含量。離子相同保留時間的相對偏差不大于0.5%，定性離子各離子豐度與標準品相差不大于20%，可定性確證目標物。

2 結果與分析

2.1 提取溶劑的選擇

2-甲氨基苯甲酸甲酯幾乎不溶于水和甘油，溶于大多數揮發性油、乙醇等。本研究以實驗室常用的甲醇、乙醇和正己烷作為樣品提取溶劑，結果表明，各提取溶劑的提取效果相近，均可滿足分析要求。根據實際條件和操作安全，本研究選擇乙醇作為樣品提取溶劑。

2.2 色譜條件的選擇

新會陳皮的化學成分以黃酮類為主，還含有檸檬苦素類、生物堿類及揮發油類等。2-甲氨基苯甲酸甲酯的沸點為252.4 ℃，性質較穩定，可選擇較高的進樣口溫度，采取分流進樣。新會陳皮成分復雜，需要通過程序升溫分離目標物與雜質。選用SH-I-5Sil MS石英毛細管色譜柱，優化條件后得到較理想的分離效果，如圖1 所示。

圖1 新會陳皮樣品的選擇離子質量色譜圖

2.3 質譜選擇離子監測

為了減少干擾，提高方法選擇性和靈敏度，采用選擇離子監測模式（SIM），如圖2 所示，2-甲氨基苯甲酸甲酯的質譜圖中，強度較高的峰為m/z165、105、104、132，選取高質量端的4 個離子進行測定：m/z165（基峰，100%），m/z105（分子離子峰，相對豐度98.16%），m/z104（相對豐度82.54%），m/z132（相對豐度52.02%）。新會陳皮樣品的選擇離子質量色譜圖見圖1。目標物峰的峰形較好，附近干擾峰少，測定結果準確度高。

圖2 2-甲氨基苯甲酸甲酯標樣的質譜圖

2.4 檢出限和檢測范圍

取1.3 項下配制的2-甲氨基苯甲酸甲酯標準溶液稀釋成濃度為0.05 mg·L-1、0.50 mg·L-1、1.00 mg·L-1、1.50 mg·L-1和2.00 mg·L-1的系列標準工作溶液，進行GC-MS/SIM 分析。以基峰離子m/z165 的峰面積（Y）和標準點的濃度（X）作定量標準曲線，線性方程為y=17 772.3x，相關系數R2=0.999 4，2-甲氨基苯甲酸甲酯在0.05 ～2.00 mg·L-1線性關系良好。結合樣品處理的稀釋倍數，以3 倍信噪比計算得方法檢出限為0.82 mg·kg-1，以10 倍信噪比計算得定量限為270 mg·kg-1。

2.5 精密度與回收率試驗

取一款不含2-甲氨基苯甲酸甲酯的柑橘皮樣品，分別加入不同濃度的標準溶液，按試驗方法進行回收率試驗。每個水平濃度重復測定7 次，考察方法的精密度，結果見表1。結果表明，2-甲氨基苯甲酸甲酯的平均加標回收率為92.8%～98.5%，相對標準偏差為0.24%～0.46%。表明本法具有良好的準確度和精密度。

表1 2-甲氨基苯甲酸甲酯加標回收率與精密度試驗結果表（n=7）

2.6 實際樣品分析

根據本法確定的試驗條件對市售的7 個新會陳皮樣品進行測定，2-甲氨基苯甲酸甲酯的檢測結果 分 別 為536 mg·kg-1、287 mg·kg-1、446 mg·kg-1、651 mg·kg-1、840 mg·kg-1、597 mg·kg-1和383 mg·kg-1。對市售的云南蜜桔、巴西柑的果皮曬干后進行測定，均未檢出2-甲氨基苯甲酸甲酯。

3 結論

本研究建立了快速測定新會陳皮中2-甲氨基苯甲酸甲酯的氣相色譜-質譜分析方法。該方法穩定可靠，靈敏度高，操作簡單，適用于新會陳皮中2-甲氨基苯甲酸甲酯的定性定量分析，有利于新會陳皮的質量指標鑒別與評價，完善相關驗收標準。