基于網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)研究婦科千金片/膠囊治療盆腔炎性疾病后遺癥的作用機(jī)制

吳夢瑤 張鵬 凌勇根 鄭元青 白璐 趙毅 章澤恒

〔摘要〕 目的 通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)結(jié)合文獻(xiàn)驗證的方法，探討婦科千金片/膠囊治療盆腔炎性疾病后遺癥（sequelae of pelvic inflammatory disease， SPID）的作用機(jī)制。方法 基于TCMSP、TCMID等數(shù)據(jù)庫及文獻(xiàn)收集婦科千金片/膠囊的化學(xué)成分，篩選后獲得活性成分及對應(yīng)靶點;采用GeneGards數(shù)據(jù)庫獲得SPID相關(guān)靶點;采用STRING數(shù)據(jù)庫對兩者交集靶點進(jìn)行蛋白互作分析;采用DAVID數(shù)據(jù)庫進(jìn)行基因功能和通路富集分析;采用Cytoscape軟件構(gòu)建“活性成分-靶點-通路”網(wǎng)絡(luò)，結(jié)合文獻(xiàn)進(jìn)行評價。結(jié)果 從婦科千金片/膠囊中篩選得到活性成分88個，對應(yīng)靶點597個，與SPID交集靶點169個;黃芩素、小檗堿、木犀草素等77個化學(xué)成分可能為婦科千金片/膠囊的主要活性成分;雌激素受體1（estrogen receptor 1， ESR1）、前列腺素內(nèi)過氧化物合酶2（prostaglandin endoperoxide synthase 2， PTGS2）、一氧化氮合酶2（nitric oxide synthase 2， NOS2）等80個靶點可能為婦科千金片/膠囊治療SPID的關(guān)鍵靶點;磷脂酰肌醇-3-激酶/絲蘇氨酸蛋白激酶（phosphateidylinositol 3 kinase/serine-threonine kinase， PI3K-Akt）、缺氧誘導(dǎo)因子1（hypoxia inducible factor-1， HIF-1）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor， TNF）等9條信號通路可能為婦科千金片/膠囊發(fā)揮治療作用的主要途徑。結(jié)論 婦科千金片/膠囊可通過多成分、多靶點協(xié)同治療SPID，其作用機(jī)制可能與調(diào)控PI3K-Akt通路、改善血液循環(huán)及調(diào)節(jié)炎癥、免疫反應(yīng)和凋亡有關(guān)。

〔關(guān)鍵詞〕 婦科千金片;婦科千金膠囊;盆腔炎性疾病后遺癥;靶點;網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)

〔中圖分類號〕R285.5? ? ? ?〔文獻(xiàn)標(biāo)志碼〕A? ? ? ? 〔文章編號〕doi：10.3969/j.issn.1674-070X.2022.02.008

The mechanism of Fuke Qianjin Tablet/Capsule in treating sequelae of pelvic

inflammatory disease based on network pharmacology

WU Mengyao1， ZHANG Peng1， LING Yonggen1， ZHENG Yuanqing1， BAI Lu1， Zhao Yi1， ZHANG Zeheng2*

（1. Zhuzhou Qianjin Pharmaceutical Co.， Ltd.， Zhuzhou， Hunan 412000， China; 2. Hunan Provincial Center for

Drug Evaluation， Certification and Adverse Reaction Monitoring， Changsha， Hunan 410013， China）

〔Abstract〕 Objective To investigate the effect of Fuke Qianjin Tablet/Capsule on sequelae of pelvic inflammatory disease （SPID） by network pharmacology combined with literature validation. Methods The chemical constituents of Fuke Qianjin Tablet/Capsule were collected based on TCMSP， TCMID and other databases and literatures， and the active constituents and corresponding targets were obtained after screening. GeneGards database was used to obtain SPID related targets. STRING database was used to analyze the protein interactions of the intersection targets. DAVID database was used for gene function and pathway enrichment analysis. Cytoscape software was used to construct an “active component-target-pathway” network， which was evaluated in conjunction with the literature. Results 88 active components were screened from Fuke Qianjin Tablet/Capsule， with 597 corresponding targets and 169 intersection targets with SPID. Wogonin， berberine， luteolin and other 77 chemical components may be the main active components of Fuke Qianjin Tablet/Capsule; the 80 targets such as estrogen receptor 1， prostaglandin endoperoxide synthase 2 and nitric oxide synthase 2 may be the key targets for the treatment of SPID by Fuke Qianjin Tablet/Capsule. Nine signaling pathways， including phosphateidylinositol 3 kinase/serine-threoninekinase， hypoxia inducible factor-1 and tumor necrosis factor may be the main pathways for the therapeutic effect of Fuke Qianjin Tablet/Capsule. Conclusion Fuke Qianjin Tablet/Capsule can treat SPID through multi-component and multi-target synergistic therapy， and its mechanism may be related to regulating PI3K-Akt pathway， improving blood circulation， regulating inflammation， immune response and apoptosis.

〔Keywords〕 Fuke Qianjin Tablet; Fuke Qianjin Capsule; sequelae of pelvic inflammatory disease; target; network pharmacology

盆腔炎性疾病（pelvic inflammatory disease， PID）是指女性上生殖道及周圍組織常見的一種感染性疾病，若未接受規(guī)范、及時有效的治療，可導(dǎo)致一系列后遺癥的發(fā)生，即盆腔炎性疾病后遺癥（sequelae of pelvic inflammatory disease， SPID），主要包括慢性盆腔痛、PID反復(fù)發(fā)作、不孕癥和異位妊娠等，曾稱為慢性盆腔炎（chronic pelvic inflammatory disease， CPID）[1]。血瘀濕熱被認(rèn)為是SPID的主要病機(jī)[2]，其核心為血瘀[3]。

婦科千金片/膠囊為株洲千金藥業(yè)股份有限公司的獨家品種，由千斤拔、金櫻根、雞血藤、單面針、功勞木、穿心蓮、當(dāng)歸、黨參8味中藥組成，具有清熱除濕、益氣化瘀的功效，用于治療SPID[4-6]、CPID[7-9]等療效顯著。《中成藥治療盆腔炎性疾病后遺癥臨床應(yīng)用指南（2020年）》[10]推薦婦科千金片/膠囊治療SPID濕熱瘀結(jié)證，可緩解SPID慢性盆腔疼痛，改善陰道分泌物量多、色黃、有異味及神疲乏力等。

為了探討婦科千金片/膠囊治療SPID的作用機(jī)制，本研究擬通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)找到婦科千金片/膠囊作用的關(guān)鍵蛋白靶點及相關(guān)信號通路，構(gòu)建其網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，篩選可能與靶點有關(guān)的藥效組分，探索婦科千金片/膠囊藥物組成治療SPID的作用機(jī)制，為后續(xù)實驗研究的開展提供方向，為其臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)和數(shù)據(jù)支撐。

1 材料和方法

1.1? 活性成分獲取

本研究采用中藥系統(tǒng)藥理學(xué)數(shù)據(jù)庫與分析平臺（Traditional Chinese Medicine Systems Pharmacology Database and Analysis Platform，TCMSP，https：//old.tcmsp-e.com/tcmsp.php）和中醫(yī)藥研究綜合數(shù)據(jù)庫（Traditional Chinese Medicines Integrated Database， TCMID， https：//www.megabionet.org/tcmid/）檢索婦科千金片/膠囊中8味中藥的化學(xué)成分，通過2020年版《中華人民共和國藥典》[11]和文獻(xiàn)對檢索結(jié)果進(jìn)行補(bǔ)充。將化合物的口服生物利用度（oral bioavailability，OB）篩選閾值均設(shè)為≥30%，類藥性閾值設(shè)為≥0.18，選取同時滿足這兩個條件的化學(xué)成分作為候選活性成分。

1.2? 潛在靶點篩選

采用TCMSP、中醫(yī)藥百科全書數(shù)據(jù)庫（The Encyclopedia of Traditional Chinese Medicine， ETCM，

http：//www.tcmip.cn/ETCM/index.php/Home/）和中醫(yī)藥癥候關(guān)聯(lián)數(shù)據(jù)庫（Symptom Mapping， SymMAP， http：//www.symmap.org）獲得活性成分對應(yīng)的靶點，應(yīng)用蛋白質(zhì)序列數(shù)據(jù)庫（Universal Protein， UniProt， https：//www.uniprot.org/）將靶點名稱轉(zhuǎn)換成對應(yīng)的基因簡稱，物種限定為“Human”。以“Sequelae of Pelvic Inflammatory Disease”為檢索詞，采用人類基因數(shù)據(jù)庫（GeneGards，https：//www.genecards.org/）獲得SPID的疾病靶點。將婦科千金片/膠囊活性成分的靶點與SPID相關(guān)靶點取交集，即為婦科千金片/膠囊治療SPID的潛在作用靶點，采用VENNY 2.1.0繪制交集圖。

1.3? 蛋白-蛋白相互作用（protein-protein interaction， PPI）網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將上述潛在作用靶點上傳到STRING數(shù)據(jù)庫（https：//string-db.org），搜索靶點間相互作用關(guān)系，限定物種為“Homo spaiens”，設(shè)置置信度為最高0.9，隱藏游離的點，獲得靶點相互作用關(guān)系，篩選出核心靶點。

1.4? 基因本體（gene oncology，GO）分析

采用DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫（https：//david-d.ncifcrf.

gov/）對靶點進(jìn)行GO分析，將靶點導(dǎo)入到基因列表中，對應(yīng)的基因標(biāo)示符選擇“OFFICIAL_GENE_SYMBOL”，將基因物種和背景設(shè)定為人，設(shè)定閾值P≤0.01進(jìn)行篩選，對靶點進(jìn)行生物過程（biological process， BP）、細(xì)胞組成（cellular component， CC）及分子功能（molecular function， MF）3個方面基因功能的詳細(xì)注釋，采用Hiplot平臺（https：//hiplot.com.cn/）對靶點的GO分析結(jié)果進(jìn)行可視化處理。

1.5? 京都基因和基因組百科全書（Kyoto encyclopedia of genes and genomes， KEGG）分析

采用DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫對靶點進(jìn)行KEGG代謝通路富集分析。將基因物種和背景限定為人，選擇Pathways下的KEGG_PATHWAY，并設(shè)定P≤0.01，獲得KEGG代謝通路富集結(jié)果。篩選出與SPID相關(guān)的信號通路，并采用Hiplot平臺對篩選后的通路可視化。

1.6? “活性成分-靶點-通路”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

根據(jù)篩選后的信號通路，采用可視化軟件Cytoscape 3.9.0構(gòu)建中藥調(diào)控網(wǎng)絡(luò)（“活性成分-靶點-通路”），以探索婦科千金片/膠囊治療SPID的潛在作用機(jī)制。

2 結(jié)果

2.1? 婦科千金片/膠囊活性成分獲取

基于TCMSP、TCMID等中藥數(shù)據(jù)庫收集婦科千金片中8味中藥的化學(xué)成分，再結(jié)合文獻(xiàn)檢索進(jìn)行補(bǔ)充，共收集化學(xué)成分1071個，其中：千斤拔142個[12-14]，金櫻根42個[15-18]，穿心蓮105個，功勞木73個，單面針24個[19-27]，當(dāng)歸261個，雞血藤156個，黨參268個。

經(jīng)過篩選后共獲得88個潛在活性成分，其中：千斤拔3個，金櫻根5個，單面針5個，功勞木6個，雞血藤27個，穿心蓮26個，當(dāng)歸7個，黨參20個。基本信息見表1。

2.2? 潛在作用靶點篩選

采用TCMSP、SymMAP、ETCM和UniProt進(jìn)行婦科千金片/膠囊活性化合物潛在靶點的篩選，共獲得597個靶蛋白基因;采用GeneGards數(shù)據(jù)庫查詢SPID相關(guān)疾病靶點，共獲得738個靶蛋白基因;將兩者取交集，得到169個潛在作用靶點（見圖1）。

2.3? PPI網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

將上述得到的169個潛在作用靶點導(dǎo)入到STRING數(shù)據(jù)庫中，即可得到PPI網(wǎng)絡(luò)，結(jié)果見圖2。該網(wǎng)絡(luò)中共包含294個節(jié)點，792條邊，平均局部聚類系數(shù)為0.472，平均節(jié)點度為9.37，P值<1.0e-16。從圖中可以看出，該網(wǎng)絡(luò)線條相互交錯、多而復(fù)雜，即各個靶點間關(guān)聯(lián)性較強(qiáng)，表示婦科千金片/膠囊在治療SPID的過程中各靶點間相互聯(lián)系密切，可能通過作用于多個靶點協(xié)同發(fā)揮藥效。圖3為度值排名前10的靶點，提示這些靶點可能在婦科千金片/膠囊治療SPID中起到關(guān)鍵調(diào)控作用。

2.4? GO功能分析

采用DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫對婦科千金片/膠囊169個潛在作用靶點進(jìn)行GO分析，根據(jù)P≤0.01共確定了522個GO條目，其中，BP相關(guān)條目405個，占比77.59%，這些靶點主要涉及了藥物反應(yīng)、RNA聚合酶II啟動子的轉(zhuǎn)錄正調(diào)控、凋亡過程的負(fù)調(diào)控、基因表達(dá)的正調(diào)控、對缺氧的反應(yīng)、一氧化氮生物合成過程的正調(diào)控、ERK1和ERK2級聯(lián)正調(diào)控、DNA模板轉(zhuǎn)錄正調(diào)控、細(xì)胞增殖的正調(diào)控、對乙醇的反應(yīng)等。

CC相關(guān)條目44個，占比8.43%，這些靶點主要存在于細(xì)胞外空間、細(xì)胞外區(qū)域、胞質(zhì)、細(xì)胞質(zhì)、核漿、細(xì)胞核、細(xì)胞表面、膜筏、受體復(fù)合體、胞漿核周區(qū)、等離子體膜等。

MF相關(guān)條目73個，占比13.98%，這些靶點主要參與了相同蛋白結(jié)合、蛋白結(jié)合、蛋白質(zhì)同源二聚體活動、酶結(jié)合、蛋白質(zhì)異源二聚體活動、轉(zhuǎn)錄因子結(jié)合、絲氨酸型內(nèi)肽酶活性、RNA聚合酶Ⅱ轉(zhuǎn)錄因子活性，配體激活的序列特異性DNA結(jié)合、類固醇激素受體活性、序列特異性DNA結(jié)合等。見圖4。

2.5? KEGG分析

采用DAVID 6.8數(shù)據(jù)庫對篩選出的169個潛在作用靶點進(jìn)行KEGG信號通路富集分析，根據(jù)P≤0.01，共獲得114條富集通路，篩選出基因數(shù)≥20的9條可能與SPID相關(guān)的信號通路，包括磷脂酰肌醇-3-激酶/絲蘇氨酸蛋白激酶（phosphateidylinositol 3 kinase/serine-threoninekinase， PI3K-Akt）、缺氧誘導(dǎo)因子1（hypoxia inducible factor-1， HIF-1）、腫瘤壞死因子（tumor necrosis factor， TNF）、黏著斑（focal adhesion， FA）、甲狀腺激素（thyroid hormone， TH）、絲裂原活化蛋白激酶（mitogen-activated protein kinase， MAPK）、趨化因子（chemokine）、toll樣受體（toll-like receptor， TLR）、雌激素（estrogen）等信號通路。采用Hiplot對以上信號通路進(jìn)行可視化處理，見圖5。

2.6? “活性成分-靶點-通路”網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建

采用Cytoscape 3.9.0構(gòu)建“活性成分-靶點-信號通路”網(wǎng)絡(luò)，見圖6。該網(wǎng)絡(luò)共包含166個節(jié)點（77個活性成分，80個靶點，9條信號通路）和766條邊。由網(wǎng)絡(luò)可知，婦科千金片/膠囊88個潛在活性成分中，有77個參與網(wǎng)絡(luò)構(gòu)建，M38黃芩素（wogonin）度值最大，與43個靶點相連;M8小檗堿（berberine）與36個靶點相連;M31木犀草素（luteolin）與31個靶點相連。80個靶點中，雌激素受體1（estrogen receptor 1，ESR1）度值最大，與71個化合物相連;其次是前列腺素內(nèi)過氧化物合酶2（prostaglandin endoperoxide synthase 2， PTGS2），與56個化合物相連;然后是一氧化氮合酶2（nitric oxide synthase 2， NOS2），與44個化合物相連。提示這些度值比較高的活性成分和靶點可能在婦科千金片/膠囊治療SPID中發(fā)揮著相對重要的作用。

3 討論

SPID多由急性盆腔炎轉(zhuǎn)變而來，具有病程長、復(fù)發(fā)率高的特點，且西藥治療療效不確切。婦科千金片/膠囊中千斤拔可祛風(fēng)除濕、活血解毒，金櫻根可清熱利濕、活血化瘀，單面針可活血散瘀、理氣止痛，功勞木可清熱燥濕，雞血藤可行血補(bǔ)血、舒筋活絡(luò)，穿心蓮可清熱解毒、消炎止痛，當(dāng)歸可補(bǔ)血調(diào)經(jīng)、活血止痛，黨參可生津止渴、補(bǔ)中益氣，諸藥合用可達(dá)到清熱除濕、益氣化瘀、抗炎增免的功效。

本研究通過網(wǎng)絡(luò)藥理學(xué)的方法分析了婦科千金片/膠囊治療SPID的主要活性成分，預(yù)測了其作用靶點，構(gòu)建了“活性成分-靶點-通路”網(wǎng)絡(luò)。從網(wǎng)絡(luò)中可以推測，婦科千金片/膠囊中黃芩素、小檗堿、木犀草素等77個主要活性成分可能通過調(diào)控ESR1、PTGS2、NOS2等80個靶點，介導(dǎo)PI3K-Akt、HIF-1、TNF等信號通路，從而發(fā)揮治療SPID的作用。

3.1? 活性成分

網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果顯示，黃芩素、小檗堿、木犀草素度值較高，與較多靶點相連。黃芩素已被證明具有廣泛的抗炎和抗腫瘤活性[28]，其可通過激活人骨關(guān)節(jié)炎軟骨細(xì)胞中的ROS/ERK/Nrf2信號通路發(fā)揮強(qiáng)大的抗炎和軟骨保護(hù)作用，完全抑制IL-6、COX-2、PGE2、iNOS和NO等炎癥介質(zhì)的表達(dá)和產(chǎn)生[29];可調(diào)節(jié)PI3K-Akt、p53、NF-κB、MAPK等多種細(xì)胞信號通路[30]。小檗堿是一種異喹啉類生物堿，具有抗炎、抗過敏、抗血管生成和抗腫瘤等藥理特性。有研究表明小檗堿能顯著抑制脂多糖誘導(dǎo)的異位子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞增殖，抑制子宮內(nèi)膜基質(zhì)細(xì)胞中IL-6、IL-8、TGF-β、EGF、VEGF和MMP2的表達(dá)[31];還有臨床證據(jù)表明小檗堿能減少內(nèi)皮細(xì)胞炎癥[32]。現(xiàn)代藥理學(xué)研究表明，木犀草素是一種天然的類黃酮化合物，具有強(qiáng)大的抗炎活性[33]，包括抑制促炎介質(zhì)（如IL-1β、IL-6、IL-8、IL-17、IL-22、TNF-α、COX-2），調(diào)節(jié)多種信號通路（如NF-κB、JAK-STAT、TLR信號通路）[34-35]。以上研究提示黃芩素、小檗堿和木犀草素可能是婦科千金片/膠囊的主要活性成分。

3.2? 關(guān)鍵靶點

網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果顯示，ESR1、PTGS2、NOS2等靶點與婦科千金片/膠囊中較多化合物相連。ERS1是一種雌激素受體，可能與ESR2形成二聚體，并影響靶組織中的細(xì)胞增殖和分化，對性發(fā)育和生殖功能至關(guān)重要，同時也負(fù)責(zé)骨骼的生長和維持心血管和神經(jīng)系統(tǒng)的正常，也參與包括乳腺癌、子宮內(nèi)膜癌和骨質(zhì)疏松癥在內(nèi)的病理過程。PTGS2又叫環(huán)氧合酶2（cyclooxygenase-2， COX-2），是一種參與前列腺素生成的酶在各種細(xì)胞中可被促炎細(xì)胞因子、腫瘤促進(jìn)劑、有絲分裂原和生長因子等高度誘導(dǎo)，從而參與炎癥反應(yīng)、細(xì)胞增殖、細(xì)胞凋亡等多種病理過程[36];有研究表明，雌激素在子宮中可反向調(diào)節(jié)COX-2的表達(dá)[37];子宮內(nèi)膜異位患者慢性、非月經(jīng)相關(guān)的盆腔疼痛與COX-2的表達(dá)增加具有相關(guān)性[38]，使用COX-2特異性抑制劑可有效治療子宮內(nèi)膜異位引起的盆腔疼痛[39]。NOS2是一種同工酶，在細(xì)胞受到刺激被激活后發(fā)揮作用，所生成的NO數(shù)量較多[40]。以上均提示PTGS2、NOS2、ESR1等靶點可能是婦科千金片/膠囊發(fā)揮藥效的關(guān)鍵作用靶點。

前期研究表明，婦科千金膠囊可抑制NF-κB激活和通路的活化，下調(diào)下游因子轉(zhuǎn)錄來抑制iNOS表達(dá)和NO產(chǎn)生，阻斷COX-2/PEG2與TNF-α、IL-6、IL-8等炎癥因子間的分子信號傳遞，改善炎性細(xì)胞浸潤及子宮組織水腫程度，阻止炎癥反應(yīng)的級聯(lián)擴(kuò)大及對生殖系統(tǒng)的損傷[41]。本課題組基于婦科千金膠囊對COX-2的抑制活性建立了抗炎生物效價測定方法，以確保其臨床療效穩(wěn)定可控[42]。

3.3? 信號通路

網(wǎng)絡(luò)分析結(jié)果顯示，PI3K-Akt、HIF-1、TNF、甲狀腺激素、MAPK、toll樣受體等可能為婦科千金片/膠囊治療SPID的主要信號通路。PI3K-Akt信號通路是一種細(xì)胞內(nèi)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)途徑，響應(yīng)細(xì)胞外信號，促進(jìn)代謝、增殖、細(xì)胞存活、生長和血管生成，在炎癥反應(yīng)的調(diào)節(jié)以及慢性疼痛中也發(fā)揮著重要作用[43];在細(xì)胞中，HIF-1主要調(diào)控對氧氣的感知和反應(yīng)，還可誘導(dǎo)控制葡萄糖代謝、細(xì)胞增殖和血管形成的蛋白質(zhì)表達(dá)[44];甲狀腺激素是重要的生長發(fā)育和代謝調(diào)節(jié)劑[45]，甲狀腺激素轉(zhuǎn)運體和受體在卵巢、早期胚胎、子宮內(nèi)膜、子宮和胎盤中表達(dá)[46]，甲狀腺功能減退或亢進(jìn)都與卵巢功能改變、月經(jīng)不規(guī)律等有關(guān)[47]。TNF可參與全身炎癥反應(yīng)，是組成急性期反應(yīng)的細(xì)胞因子之一，可觸發(fā)許多途徑的激活，包括NF-κB和MAPK途徑。前期研究表明，婦科千金片可通過降低TLR4-PI3K/Akt信號表達(dá)從而抑制盆腔炎大鼠的炎癥反應(yīng)[48]，婦科千金膠囊可通過調(diào)節(jié)TGF-β1-PI3K/Akt信號通路發(fā)揮抗子宮內(nèi)膜纖維化功效，達(dá)到治療宮腔粘連大鼠的作用[49]。

綜上，本研究從生物信息學(xué)的角度初步分析了婦科千金片/膠囊活性成分可通過多靶點、多途徑協(xié)同治療SPID，其作用機(jī)制可能與調(diào)控PI3K-Akt通路、改善血液循環(huán)及調(diào)節(jié)炎癥、免疫反應(yīng)和凋亡有關(guān)，本研究為后續(xù)更精準(zhǔn)地研究其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)和作用機(jī)制提供了理論基礎(chǔ)和研究方向。

參考文獻(xiàn)

[1] BU X L， LIU Y X， LU Q D， et al. Effects of “Danzhi decoction” on chronic pelvic pain， hemodynamics， and proinflammatory factors in the murine model of sequelae of pelvic inflammatory disease[J]. Evidence Based Complementary and Alternative Medicine， 2015， 2015： 547251.

[2] 王小娟，蔣? 燕.蔣燕教授活血清熱法治療盆腔炎性疾病后遺癥經(jīng)典驗案[J].中國社區(qū)醫(yī)師，2021，37（7）：91-92.

[3] 王? 妍，史? 昭，尹小蘭，等.中藥調(diào)控盆腔炎性疾病后遺癥免疫機(jī)制研究進(jìn)展[J].實用中醫(yī)藥雜志，2020，36（9）：1237-1238.

[4] 顏利玲，石? 玲，王秋鳳，等.婦科千金膠囊治療盆腔炎性疾病后遺癥216例臨床研究[J].中醫(yī)臨床研究，2017，9（9）：84-85.

[5] 王吉菊，王小云，龔? 云，等.婦科千金膠囊治療盆腔炎性疾病后遺癥疼痛臨床研究[J].新中醫(yī)，2019，51（6）：199-201.

[6] 李進(jìn)喜，楊云云，孫秀蘭.婦科千金膠囊治療盆腔炎性疾病后遺癥疼痛的臨床研究[J].中外醫(yī)療，2020，39（19）：91-93.

[7] 佘建霞，柯玉霞.觀察婦科千金膠囊治療慢性盆腔炎合并卵巢囊腫的臨床療效[J].世界最新醫(yī)學(xué)信息文摘，2016，16（1）：177，180.

[8] 陳文麗.婦科千金膠囊治療慢性盆腔炎的臨床療效觀察[J].現(xiàn)代診斷與治療，2015，26（3）：523-524.

[9] 劉佩琦.婦科千金膠囊治療慢性盆腔炎44例臨床觀察[J].中國民族民間醫(yī)藥，2014，23（22）：52.

[10] 《中成藥治療優(yōu)勢病種臨床應(yīng)用指南》標(biāo)準(zhǔn)化項目組.中成藥治療盆腔炎性疾病后遺癥臨床應(yīng)用指南（2020年）[J].中國中西醫(yī)結(jié)合雜志，2021，41（3）：286-299.

[11] 國家藥典委員會.中華人民共和國藥典[S].北京：中國醫(yī)藥科技出版社，2020.

[12] 陳? 敏，羅思齊，陳鈞鴻.蔓性千斤拔化學(xué)成分的研究[J].藥學(xué)學(xué)報，1991，26（1）：42-48.

[13] 年曉莉，徐海波，王明煜，等.蔓性千斤拔總黃酮提取工藝的研究[J].時珍國醫(yī)國藥，2008，19（2）：433-434.

[14] 劉建華，高麗欣，高玉瓊，等.千斤拔揮發(fā)性成分的研究[J].中成藥，2003，25（6）：485-487.

[15] 韋熹苑，鄧? 琦，盧小玲，等.廣西不同產(chǎn)地金櫻根及炮制品中沒食子酸和兒茶素的含量差異分析[J/OL].廣物植物：1-14[2021-10-25].

http：//kns.cnki.net/kcms/detail/45.1134.Q.20210324.1428.006.html.

[16] 丁? 陽，黃永林，劉金磊，等.金櫻根化學(xué)成分的研究[J].廣西植物，2017，37（2）：255-259.

[17] 汪玉梅，蘇賢君，符? 崖，等.金櫻根化學(xué)成分研究（Ⅰ）[J].中山大學(xué)學(xué)報（自然科學(xué)版），2016，55（2）：76-80，84.

[18] FAN X R， BAI L， LIN L M， et al. Studies on the chemical constituents and quality evaluation of Rosa cymosa Tratt. root[J]. Journal of Separation Science， 2020， 43（24）： 4379-4389.

[19] 劉倩倩，雷思敏，胡玉珍，等.單面針HPLC指紋圖譜及質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[J].中國中醫(yī)藥信息雜志，2020，27（10）：73-79.

[20] 吳潤菁.單面針質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)研究[D].廣州：廣州中醫(yī)藥大學(xué)，2014.

[21] 韋熹苑，裴? 剛，袁園.單面針莖中氯化兩面針堿和橙皮苷含量測定[J].中國現(xiàn)代藥物應(yīng)用，2014，8（3）：24-25.

[22] 吳潤菁，王? 歡，祝晨蔯，等.高效液相色譜法測定單面針中木蘭花堿的含量[J].廣州中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2014，31（3）：443-447.

[23] 宋玉霞.單面針根莖的化學(xué)成分研究[J].中國現(xiàn)代應(yīng)用藥學(xué)，2018，35（11）：1694-1697.

[24] 楊? 鵬，卿志星，向? 鋒，等.HPLC-Q-TOF/MS法鑒定兩面針和單面針中的生物堿[J].中成藥，2017，39（8）：1646-1650.

[25] 宛玉祥，李家宇，秦&nbsp; 優(yōu)，等.液質(zhì)聯(lián)用鑒定單面針中的化學(xué)成分[J].中國現(xiàn)代中藥，2017，19（4）：496-499，508.

[26] 肖? 燦，袁? 園，丁揚洲，等.單面針莖中生物堿類成分研究[J].中藥材，2011，34（4）：551-553.

[27] 劉? 韶，章? 偉，何桂霞，等.單面針莖化學(xué)成分的研究[J].中國中藥雜志，2009，34（5）：571-573.

[28] FAN L， QIU D B， HUANG G， et al. Wogonin suppresses IL-10 production in B cells via STAT3 and ERK signaling pathway[J]. Journal of Immunology Research， 2020， 2020： 3032425.

[29] KHAN N M， HASEEB A， ANSARI M Y， et al. Wogonin， a plant derived small molecule， exerts potent anti-inflammatory and chondroprotective effects through the activation of ROS/ERK/Nrf2 signaling pathways in human Osteoarthritis chondrocytes[J]. Free Radical Biology and Medicine， 2017， 106： 288-301.

[30] CHU Y， LV X， ZHANG L F， et al. Wogonin inhibits in vitro Herpes simplex virus type 1 and 2 infection by modulating cellular NF-κB and MAPK pathways[J]. BMC Microbiology， 2020， 20（1）： 227.

[31] LIU L， CHEN L， JIANG C X， et al. Berberine inhibits the LPS-induced proliferation and inflammatory response of stromal cells of adenomyosis tissues mediated by the LPS/TLR4 signaling pathway[J]. Experimental and Therapeutic Medicine， 2017， 14（6）： 6125-6130.

[32] CICERO A F G， BAGGIONI A. Berberine and its role in chronic disease[M]//Advances in Experimental Medicine and Biology. Cham： Springer International Publishing， 2016： 27-45.

[33] WANG S X， CAO M， XU S H， et al. Luteolin alters macrophage polarization to inhibit inflammation[J]. Inflammation， 2020， 43（1）： 95-108.

[34] GENDRISCH F， ESSER P R， SCHEMPP C M， et al. Luteolin as a modulator of skin aging and inflammation[J]. BioFactors， 2021， 47（2）： 170-180.

[35] YANG Y， TAN X， XU J G， et al. Luteolin alleviates neuroinflammation via downregulating the TLR4/TRAF6/NF-κB pathway after intracerebral hemorrhage[J]. Biomedicine & Pharmacotherapy， 2020， 126： 110044.

[36] 王訓(xùn)翠，儲明星，陳宏權(quán).前列腺素內(nèi)過氧化物合酶2基因的研究進(jìn)展[J].生命科學(xué)，2004，16（1）： 31-34.

[37] HERTRAMPF T， SCHMIDT S， LAUDENBACH-LESCHOWSKY U， et al. Tissue-specific modulation of cyclooxygenase-2 （Cox-2） expression in the uterus and the v. cava by estrogens and phytoestrogens[J]. Molecular and Cellular Endocrinology， 2005， 243（1/2）： 51-57.

[38] BUCHWEITZ O， STAEBLER A， WüLFING P， et al. COX-2 overexpression in peritoneal lesions is correlated with nonmenstrual chronic pelvic pain[J]. European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology， 2006， 124（2）： 216-221.

[39] COBELLIS L， RAZZI S， DE SIMONE S， et al. The treatment with a COX-2 specific inhibitor is effective in the management of pain related to endometriosis[J]. European Journal of Obstetrics & Gynecology and Reproductive Biology， 2004， 116（1）： 100-102.

[40] 秦艷麗.Nos2在小鼠肝損傷中的作用研究[D].新鄉(xiāng)：河南師范大學(xué)，2016.

[41] 張?zhí)曳瑥垊P強(qiáng)，李亞梅，等.婦科千金膠囊的抗炎作用與其調(diào)節(jié)NF-κB信號通路的關(guān)系[J].湖南中醫(yī)藥大學(xué)學(xué)報，2020，40（7）：834-840.

[42] MA R R， YANG X J， HUANG Y， et al. Study on the bioassay of anti-inflammatory effects of fuke Qianjin capsule based on COX-2 inhibiting activity[J]. Evidence Based Complementary and Alternative Medicine， 2021， 2021： 6620124.

[43] CHEN S P， ZHOU Y Q， LIU D Q， et al. PI3K/Akt pathway： A potential therapeutic target for chronic pain[J]. Current Pharmaceutical Design， 2017， 23（12）： 1860-1868.

[44] SEMENZA G L. Hypoxia-inducible factor 1 （HIF-1） pathway[J]. Science's STKE， 2007， 2007（407）： cm8.

[45] MULLUR R， LIU Y Y， BRENT G A. Thyroid hormone regulation of metabolism[J]. Physiological Reviews， 2014， 94（2）： 355-382.

[46] VISSENBERG R， MANDERS V D， MASTENBROEK S， et al. Pathophysiological aspects of thyroid hormone disorders/thyroid peroxidase autoantibodies and reproduction[J]. Human Reproduction Update， 2015， 21（3）： 378-387.

[47] KRASSAS G E， POPPE K， GLINOER D. Thyroid function and human reproductive health[J]. Endocrine Reviews， 2010， 31（5）： 702-755.

[48] 易麗貞，劉? 欣，吳雪芬，等.婦科千金片對盆腔炎大鼠TLR4、PI3K、AKT表達(dá)的影響[J].中國處方藥，2021，19（1）：31-34.

[49] 譚雅莉，徐? 佳，蔣? 冬，等.從TGF-β1-PI3K/Akt信號通路研究婦科千金膠囊治療宮腔粘連大鼠作用機(jī)制[J].中國中藥雜志， 2020，45（19）：4705-4711.