微柱凝膠法檢測(cè)ABO血型正反定型不符的影響因素分析

趙妮 蘭愛(ài)俠

(銅川市人民醫(yī)院輸血科,陜西 銅川 727031)

為提升臨床ABO血型鑒別水平，需對(duì)導(dǎo)致血型正反定型不符合的影響因素實(shí)施分析，本研究對(duì)本院80例ABO血型正反定型不符合患者開(kāi)展分析，了解導(dǎo)致不符合情況發(fā)生的影響因素，現(xiàn)報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇本院接收的80例實(shí)施ABO血型檢查患者為研究樣本，其檢查時(shí)間均在2018年4月至2020年4月之間。80例患者中，男45例、女35例；年齡(56.37±6.89)歲；體質(zhì)指數(shù)(23.36±0.47) kg/m2。全部患者在實(shí)施微柱凝膠法檢測(cè)后均出現(xiàn)ABO血型正反定型不符合情況，通過(guò)向患者全面介紹研究目的以及方法后，取得患者同意，為每位患者均采集血液樣本5 mL。

1.2方法 檢測(cè)儀器為HHS-21-6型數(shù)字顯示恒溫水浴鍋(采購(gòu)至常州諾基儀器有限公司)、JIDI-18D型離心機(jī)(采購(gòu)至廣州吉迪儀器有限公司)、SA-60型全自動(dòng)血型分析儀(采購(gòu)至蘇州長(zhǎng)光華醫(yī)生物醫(yī)學(xué)工程有限公司)。檢測(cè)試劑為ABO血型以及RhD血型定型試劑采購(gòu)至南京信帆生物技術(shù)有限公司；抗A、抗B、抗H、抗AB以及抗A1標(biāo)準(zhǔn)血清采購(gòu)至上海橋星貿(mào)易有限公司；反定型A1型、B型、O型以及A2型標(biāo)準(zhǔn)紅細(xì)胞采購(gòu)至上海艾研生物科技有限公司；不規(guī)則抗體篩選紅細(xì)胞采購(gòu)至長(zhǎng)春博訊生物技術(shù)有限責(zé)任公司。全部試劑經(jīng)檢查后均符合研究需求且在保質(zhì)期內(nèi)。使用全自動(dòng)血型分析儀對(duì)每位患者ABO血型實(shí)施檢測(cè)，全自動(dòng)血型分析儀工作原理為微柱凝膠法。當(dāng)發(fā)現(xiàn)正反定型不符合情況時(shí)，可根據(jù)ABO疑難血型三步分析法對(duì)正反定型不符合的標(biāo)本實(shí)施鑒定。在排除因人為因素、操作錯(cuò)誤和試劑不符合檢測(cè)要求等問(wèn)題后，為患者重新采集血液樣本5 mL，在采集血液樣本時(shí)需嚴(yán)格遵循操作原則，避免出現(xiàn)采集錯(cuò)誤和血液樣本不規(guī)范等情況。分析患者臨床資料，探尋可能會(huì)引起正反定型不符合的因素，隨后依據(jù)分析結(jié)果實(shí)施針對(duì)性驗(yàn)證試驗(yàn)。在篩查不規(guī)則抗體時(shí)，可選擇全自動(dòng)血型分析儀、抗人球蛋白試管法以及鹽水法等操作措施。最終依據(jù)可能會(huì)導(dǎo)致正反定型不符合的因素和試驗(yàn)結(jié)果實(shí)施全面判斷。

1.3觀察項(xiàng)目 分析正反定型不符合原因。觀察導(dǎo)致正反定型減弱或缺失的影響因素。分析ABO血型抗原抗體出現(xiàn)額外反應(yīng)的影響因素。

2 結(jié) 果

2.1正反定型不符合原因 依據(jù)ABO疑難血型三步分析方式對(duì)患者實(shí)施核實(shí)分析后，對(duì)80例患者再次采集血液樣本實(shí)施ABO血型檢測(cè)，結(jié)果顯示同首次檢測(cè)結(jié)果相同，均出現(xiàn)正反定型不符情況。在80例ABO正反定型不符合的患者中，有42例(52.50%)為造血干細(xì)胞移植不符合、有18例(22.50%)為ABO血型正反定型不符合、有17例(21.25%)為抗原減弱或缺失不符合、僅有3例(3.75%)為抗體減弱或缺失不符合。在42例造血干細(xì)胞移植不符合患者中，21例(50.00%)移植供受者出現(xiàn)ABO血型不符合、15例(35.71%)出現(xiàn)次要不合、6例(14.29%)出現(xiàn)主次要不合。

2.2導(dǎo)致正反定型減弱或缺失的影響因素 在38例非造血干細(xì)胞移植ABO正反定型不符合患者中，有17例(44.74%)出現(xiàn)抗原減弱。其中低丙種球蛋白血癥、年齡>60歲以及惡性血液疾病是導(dǎo)致抗體減弱或缺失的主要影響因素。惡性血液疾病、試劑干擾、ABO亞型以及惡性實(shí)體腫瘤是導(dǎo)致抗原減弱或缺失的主要影響因素。見(jiàn)表1。

表1 導(dǎo)致血型抗原/抗體減弱或缺失的影響因素分析[n(%)]

2.3ABO血型抗原抗體出現(xiàn)額外反應(yīng)的影響因素 80例患者中，有18例為ABO正反定型額外反應(yīng)患者，并且其中反定型額外反應(yīng)者有13例(72.22%)、正定型額外反應(yīng)者有3例(16.67%)、正反定型同時(shí)額外反應(yīng)者有2例(11.11%)。由于自身抗體所導(dǎo)致額外反應(yīng)者有8例(44.44%)，由于同種抗體所導(dǎo)致額外反應(yīng)者有5例(27.78%)。其中有1例ABO亞型患者，通過(guò)實(shí)施分子生物學(xué)監(jiān)測(cè)后判斷是B(A)血型。見(jiàn)表2。

表2 ABO血型抗原抗體出現(xiàn)額外反應(yīng)的影響因素分析[n(%)]

3 討 論

微柱凝膠法主要是指紅細(xì)胞抗原同相應(yīng)抗體在凝膠微柱介質(zhì)中出現(xiàn)凝集反應(yīng)的免疫學(xué)檢測(cè)方式。ABO正反定型不符合主要是指通過(guò)觀察正定型和反定型結(jié)果后無(wú)法實(shí)施相關(guān)驗(yàn)證，進(jìn)而無(wú)法準(zhǔn)確地進(jìn)行ABO血型鑒定[1-4]。開(kāi)展ABO血型鑒定具有以下幾點(diǎn)優(yōu)勢(shì)：(1)對(duì)于機(jī)體循環(huán)血量不足或出現(xiàn)大量失血、貧血癥狀的患者，當(dāng)其需要實(shí)施輸血治療時(shí)，在輸血前必須使用血型相同的供血者，隨后開(kāi)展交叉配血試驗(yàn)，確定兩種血型完全相同后才可進(jìn)行輸血[5]。(2)當(dāng)進(jìn)行皮膚或腎移植等器官移植時(shí)，需要選擇ABO血型相符合的供體[6]。(3)分析影響不孕癥的原因以及導(dǎo)致新生兒出現(xiàn)溶血癥的影響因素[7]。(4)親子鑒定。因此，了解導(dǎo)致出現(xiàn)ABO正反定型不符合的原因，并采取相應(yīng)干預(yù)措施，可提升臨床對(duì)ABO血型的鑒定能力。

臨床有研究[8]指出，ABO血型不符合造血干細(xì)胞移植、自身抗體和惡性血液疾病是導(dǎo)致ABO正反定型不符合的重要因素，并且其認(rèn)為通過(guò)實(shí)施相應(yīng)輔助試驗(yàn)和掌握患者臨床資料可一定程度上提升血型鑒定水平。在本次研究中，發(fā)現(xiàn)以下幾點(diǎn)因素是導(dǎo)致ABO正反定型不符合的重要因素：(1)ABO血型不符合造血干細(xì)胞移植，在實(shí)施造血干細(xì)胞移植時(shí)，血型可出現(xiàn)復(fù)雜改變，通過(guò)掌握患者臨床資料，提供患者血型和正反定型反應(yīng)強(qiáng)度，可協(xié)助臨床醫(yī)師對(duì)移植存活情況有正確判斷。(2)惡性血液疾病，對(duì)于再生障礙性貧血的患者而言，其血液中成熟紅細(xì)胞數(shù)量有明顯下降，有大量不規(guī)則形態(tài)紅細(xì)胞形成，從而導(dǎo)致抗原能力下降。對(duì)于急性粒細(xì)胞白血病患者而言，由于疾病對(duì)半乳糖轉(zhuǎn)移酶合成產(chǎn)生抑制，導(dǎo)致紅細(xì)胞A抗原或是B抗原出現(xiàn)缺失或弱化，最終出現(xiàn)抗原缺失或弱抗原情況[9]。(3)自身抗體，對(duì)于因自身抗體而發(fā)生溶血的患者，當(dāng)血液樣本儲(chǔ)存溫度低于37℃時(shí)，血細(xì)胞則會(huì)出現(xiàn)凝集，進(jìn)而對(duì)正反定型判斷產(chǎn)生不利影響。為避免因自身抗體所產(chǎn)生的影響，通過(guò)使用37℃生理鹽水洗滌三次血液樣本，或者是將反定型試管置于37℃溫水中進(jìn)行10～30 min水浴處理，之后再實(shí)施血型鑒定[10]。

綜上所述，在將試驗(yàn)操作技術(shù)以及人為因素排除后，發(fā)現(xiàn)導(dǎo)致ABO正反定型不符合的主要影響因素是ABO血型不符合造血干細(xì)胞移植、惡性血液疾病和自身抗體，通過(guò)實(shí)施針對(duì)性輔助試驗(yàn)和全面掌握患者臨床資料，可對(duì)血型進(jìn)行準(zhǔn)確區(qū)分。