微柱凝膠法輸血相容性檢測弱凝集現象的影響因素分析

祁曉倩 曹華琳

(1.安康市人民醫院檢驗科，陜西 安康 725000；2.安康市中心血站業務管理科，陜西 安康 725000)

微柱凝膠法屬于血液免疫學上較為多見的檢測方式，不僅能夠準確檢出IgM類抗體，同時可檢出IgG類抗體，與以往常規試管法進行對比，存在敏感度較高、血標本用量較少、自動化、操作簡便、長時間保存、結果易觀察等優勢，受到臨床廣泛認可[1-2]。臨床工作中發現，部分患者的血漿標本或者紅細胞中，利用微柱凝膠法實施抗體篩查、血型鑒定、交叉配血時易產生弱凝集現象，直接影響檢驗結果，給臨床輸血帶來一定困難及安全隱患。由此本文展開實驗，報告如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2018年4月至2020年4月我院126例對微柱凝膠法在ABO血型鑒定、抗體篩查、交叉配血實驗中顯示弱凝集的患者標本，其中男70例，女56例；年齡(51.69±1.25)歲。

1.2方法 收集患者的EDTA鉀鹽抗凝全血(3 mL)，置于試管后搖晃均勻，并放在37℃條件下進行水浴，時間控制在30 min，以3 000 r/min的速度進行離心，分離紅細胞與血漿，制備成不同劑量的懸液；分別在A、B、D、對照凝膠卡中放入10 mL/L的紅細胞懸液(10 μL)。以3 000 r/min速度進行離心，時間10 min，對結果進行判定；選擇血漿置于A1、B凝膠卡上，再次添加A1、B細胞，給予離心操作，時間控制10 min，對結果進行判定；主側配血中，將受血者血漿與供血者紅細胞懸液相聯合；而次側配血中將受血者紅細胞懸液加入供血者血漿內，存放在37℃條件下，孵育15 min，并以3 000 r/min速度進行離心，時間10 min，對結果進行判讀；重復洗滌患者紅細胞，并調配成紅細胞懸液，并置于凝膠卡，以3 000 r/min速度進行離心，時間10 min左右；抽取25 μL血漿置于凝膠卡，并添加抗體篩選細胞，存放在37℃條件下孵育15 min，以3 000 r/min速度進行離心，時間10 min，另外針對抗體篩選陽性標本，選擇譜細胞實施抗體特異性檢查；分別通過兩次離心血清標本、提升紅細胞或者血清量、37℃洗滌紅細胞、吸收放散實驗等方式進行處理，同時選擇間接抗人球蛋白法、鹽水法進行對照。

1.3觀察指標 分析微柱凝膠法輸血相容性檢測弱凝集現象的影響因素，其中1+～4+表示凝集強度或者陽性2+w表示凝集強度低于2+；-表示陰性；+/-表示低于22℃凝集，但37℃未發生凝集；1+w表示凝集強度低于1+。

2 結 果

本次研究中共126例對微柱凝膠法在ABO血型鑒定、抗體篩查、交叉配血實驗中顯示弱凝集的患者標本，其中ABO抗原性弱共30例(23.81%)；ABO抗體效價低共12例(9.52%)；ABO亞型血共13例(10.32%)；高效價冷凝集素共23例(18.25%)；纖維蛋白提升共26例(20.63%)；自身免疫性抗體共22例(17.46%)。見表1。

表1 微柱凝膠法輸血相容性檢測弱凝集現象的影響因素分析(n=126)

3 討 論

本文主要探討微柱凝膠法輸血相容性檢測弱凝集現象的影響因素并對此展開實驗，結果顯示，ABO抗原性弱共30例(23.81%)；ABO抗體效價低共12例(9.52%)；ABO亞型血共13例(10.32%)；高效價冷凝集素共23例(18.25%)；纖維蛋白提升共26例(20.63%)；自身免疫性抗體共22例(17.46%)，提示影響微柱凝膠法輸血相容性檢測弱凝集現象的因素較多，若能夠及時選擇相關處理方式進行干預，可有效避免影響因素對檢驗結果的影響。針對血型抗原減弱者，提升其紅細胞懸液濃度后，可利用吸收放散實驗證明血型抗原[3]。為抗體效價較低的患者進行ABO血型反定型，利用增加反應時長、置換血清、提升血清量等方式，存放在4℃條件下反應15 min左右，并提供離心操作，最終保證正、反定型的相似性。ABO亞型是因為A、B基因位點突變，形成氨基酸序列后引發變異，其中包含A、B、A(B)、B(A)亞型等[4]。一旦患者A抗原以及抗A抗體在ABO血型正、反定型中未出現凝集或者弱凝集現象，容易將A、B亞型血誤診成O型。經分析發現，影響微柱凝膠法輸血相容性檢測弱凝集現象的因素中，部分肝臟疾病、多發性骨髓瘤患者的血漿中纖維蛋白水平較高，極易造成血型正、反定型存在差異，或者導致交叉配血不符，可能與血標本抗凝效果不理想存在密切關聯，其中紅細胞纖維蛋白可能堆積在凝膠卡上端，但大多數紅細胞可堆積在凝膠卡底端[5]。臨床為了避免血液凝固對檢驗結果造成影響，當血液吸出后，應快速搖勻抗凝管，并將其置于37℃條件下水浴，使血液完全凝固，并實施離心操作，即可有效免除干擾[6]。當機體血清中存在高效價冷集素，即可在交叉配血或者反定型的主側中產生弱凝集現象。隨著冷凝集素效價不斷升高，患者應避開輸血，若必須輸血時，應優先選擇同型洗滌的紅細胞，并保持緩慢輸注速度[7]。通常自身免疫性疾病中進行直接抗人球蛋白實驗，獲得的血清中通常伴有自身抗體，從而使自身紅細胞被吸附，同時造成供血者紅細胞出現凝集，尤其在次側配血凝集中較為常見[8]。因此若能夠通過相關干預處理，可為臨床輸血的安全性提供前提保障。