口腔清潔護理用品 牙膏功效評價 去除外源性色斑效果實驗室評價方法(T/ COCIA 7-2020)

前言

本文件按照《標準化工作導則 第1部分：標準化文件的結構和起草規則(GB/T1.1-2020)》的規定起草。

本文件由口腔清潔護理用品工業協會提出。

本文件由全國口腔護理用品標準化技術委員會牙膏分技術委員會(SAC/TC 492/SC1)歸口。

本文件主要起草單位：國家輕工業牙膏蠟制品質量監督檢測中心、廣州質量監督檢測研究院、廣州薇美姿實業有限公司、好來(中山)化工有限公司、納愛斯集團有限公司。

本文件主要起草人：孫東方、謝宇、吳謙、郭長虹、賴海珍、鄭偉、陳敏珊、何琪瑩、徐項亮、劉文玉。

本文件為首次發布。

1 范圍

本文件規定了牙膏去除外源性色斑效果的實驗室評價方法。

本文件適用于牙膏去除外源性色斑效果能力的測定。

2 規范性引用文件

下列文件中的內容通過文件中的規范性引用而構成本文件必不可少的條款。其中，注日期的引用文件，僅該日期對應的版本適用于本文件；不注日期的引用文件，其最新版本(包括所有的修改單)適用于本文件。

GB/T 6682 分析實驗室用水規格和試驗方法

GB 19342 牙刷

3 原理

牙齒表面存在一層附著力強的獲得性膜，細菌在牙齒分解食物或日常飲食中帶有深色的食物或飲料，如紅茶、醬油、巧克力、咖啡等會使獲得性膜著色，逐漸積累形成較難去除的外源性色斑。本方法采用牛牙作為底物，經切割、樹脂鑲嵌、拋光制成規則磨塊，將其人工染色獲得外源性色斑，通過模擬刷牙過程，利用色差計測量牙齒顏色差異，評價牙膏去除外源性色斑效果能力。

4 試劑與材料

4.1 除另有規定外，本方法所用試劑均為分析純，實驗用水均為GB/T 6682中規定的一級水。

4.2 胃粘蛋白：CAS號84082-64-4。

4.3 鹽酸。

4.4 無水碳酸鈉(Na2CO3)：純度≥99.8%。

4.5 植酸(C6H18O24P6)：(CAS號83-86-3)純度≥70.0%。

4.6 六水合三氯化鐵(FeCl3·6H2O)：純度≥90.0%。

4.7 義齒基托樹脂：Ⅱ型，Ⅰ類(自凝型，液)。

4.8 義齒基托樹脂：Ⅱ型，Ⅰ類(自凝型，粉)。

4.9 標準磨液。

4.10 牙膏漿液配制：稱取樣品牙膏600g(精確至0.01g)于2000mL的燒杯中，用960g的水溶解并攪拌至牙膏分散均勻。牙膏與水的質量比為1∶1.6。

4.11 標準牙刷：質量符合GB 19342的平毛牙刷，牙刷頭應由約10mm長的尼龍絲制成，公稱絲徑0.2mm，尼龍絲末端全部處于同一個平面。

5 儀器和設備

5.1 刷磨儀：V8或L8刷磨儀或其他等效產品。刷磨儀機位至少8個，刷磨載荷及次數可調，刷磨載荷可控(精度0.1g)。

5.2 分析天平：精確至0.0001g。

5.3 染色儀：具有與電動機相連的轉輪，轉輪上有可以容納牙磨塊的載具，轉輪下方配有一定容量的水槽。

5.4 恒溫箱。

5.5 色差計：具有符合牙釉質塊規格的孔徑。

5.6 自動攪拌器。

5.7 低速精密切割機。

5.8 磨拋機：具有連續型號的碳化硅研磨盤(最小600目)。

6 處理步驟

6.1 牙磨塊的制備

6.1.1 篩選及保存

挑選牛上頜恒切牙若干顆，要求根部無齲壞，頰側無白堊色斑塊、氟斑及肉眼可見缺陷、裂縫，牙齒至少14mm長，2mm寬，刮除所有軟組織殘留物，貯存于0.1%麝香草酚溶液或其他具有消毒作用但不改變牙齒物理性質的中性溶液。

6.1.2 牙釉質塊制備和鑲嵌

切除牛牙根部后，將牛牙釉質部分切成5mm寬若干段，最終切割成5mm×5mm×2mm的牙釉質塊(牙釉質塊的規格可根據刷磨儀樣品裝載臺規格而定)。

根據所使用刷磨儀的樣品裝載臺規格，訂制合適的模具，將牙釉質塊放入模具中，釉質面朝外，倒入自凝樹脂(使用方法參照所購自凝樹脂說明書)使牙釉質塊被完全包埋，且液面與模具厚度相平，待樹脂完全凝固后即制成牙磨塊。

6.1.3 牙磨塊拋光和酸蝕

水冷條件下，在磨拋機上使用P180砂輪將牙磨塊釉質面打磨至完全露出，且牙磨塊表面水平，接著使用P600砂輪拋光(需注意避免過度磨蝕露出牙本質)。制備好的牙磨塊保存于去離子水中備用。

牙磨塊應經過輕微酸蝕以加快染色過程。取若干拋光后的牙磨塊，浸入1%鹽酸溶液中，攪拌60s，清水沖洗干凈；然后浸入飽和碳酸鈉溶液中，攪拌60s，清水沖洗干凈；最后浸入1%植酸溶液中，攪拌60s，清水沖洗干凈。

每次酸蝕需在染色前進行，酸蝕后即放入染色儀中進行染色。

6.2 染色

6.2.1 染色液的配制

首先用熱水將胃粘蛋白溶解，隨后加入咖啡、醬油、紅茶和氯化鐵，攪拌均勻，2℃～8℃保存備用。染色液保質期為3天。其他組分可按實際需求添加。

配制染色液體積按染色儀實際需要量確定，各組分最終濃度：胃粘蛋白2.5g/L、咖啡4.0g/L、醬油4.0g/L、紅茶4.0g/L、氯化鐵20mg/L。

6.2.2 牙磨塊染色

將酸蝕后的牙磨塊放入染色機中染色，染色過程環境保持37℃以模擬口腔環境，調節染色機轉速為2r/min使牙磨塊在染色液與空氣中循環交替，染色液應每天更換。

染色后未開展試驗的牙磨塊保存于去離子水中備用。

6.3 刷磨處理

將標準牙刷頭和牙磨塊裝上刷磨儀后，設定刷磨儀往返頻率為100r/min，調節牙刷頭和桿總重量為(150±2)g，往各個漿料杯加入適量牙膏漿，使其浸沒牙磨塊。樣品組使用對應樣品牙膏漿刷磨，標準磨液組使用標準磨液刷磨。啟動機器，往返刷牙800次。

7 計算結果與統計分析

刷牙前后牙釉質白度值差值(ΔL*)按式(1)計算：

(1)

式中：ΔL*——刷牙前后牙釉質白度值差值；

若樣品組與標準磨液組的差值(ΔL*)均符合正態分布，采用獨立樣本t檢驗分析顯著性差異，雙尾檢驗，檢驗水平α=0.05。若樣品組與標準磨液組的差值(ΔL*)不符合正態分布，采用兩獨立樣本秩和檢驗分析顯著性差異，雙尾檢驗，檢驗水平α=0.05。

8 評價結果

樣品組ΔL*小于標準磨液組ΔL*，但樣品組與標準磨液組差值(ΔL*)比較沒有顯著性差異(P>0.05)，或樣品組ΔL*大于標準磨液組ΔL*，可認為樣品牙膏具有去除外源性色斑效果。