楊侃侃
(遼寧省農業經濟學校 121000)
隨著仔豬斷奶日齡的不斷提前,斷奶后仔豬的應激現象越來越明顯,主要表現為采食量下降,生長速度減慢,腹瀉率升高,成活率下降,另外對機體免疫功能、血液循環系統及內分泌系統也會產生一定影響[1]。通過安全有效的免疫調節劑來緩解仔豬斷奶后的應激現象將會非常有效地促進養豬業的健康發展。刺五加多糖(Acathopanas senticosus polysaccharides,ASPS) 作為一種生物活性多糖,主要是從刺五加的根莖及籽實中提取所得。ASPS 不但能提高機體免疫力及抗氧化能力,同時具有抗感染、抗腫瘤等作用[2]。近年來有關ASPS 的應用在生物醫藥領域較廣泛,其在養豬生產中的應用研究卻很少。因此,本試驗旨在通過研究不同水平的ASPS 對早期斷奶仔豬血清酶及血清激素指標的影響,為更好地將新型免疫調節劑應用于仔豬養殖過程中提供指導依據。
試驗以刺五加根為原料,經過提取后所得的ASPS 為棕黃色粉末。采用苯酚-硫酸法測得多糖純度為87.5%。
試驗采用單因素完全隨機化設計,選取80 頭平均體重為(7.65±0.86)kg 為(26±2)d 的“杜×長×大”三元雜交斷奶仔豬,隨機分為5 個處理,每個處理4 次重復,每個重復4 頭仔豬。其中處理1 為對照組,飼喂基礎飼糧,其為參照NRC(1998) 仔豬營養需要量標準進行配制的飼料,日糧組成及營養水平見表1。處理2~5 組為試驗組,分別將300、500、800、1000mg/kg 的ASPS 添加于基礎飼糧中。

表1 基礎飼糧組成及營養水平(風干基礎,單位:%)
粗蛋白質、鈣、磷含量為實測值,其他營養水平均為計算值。
仔豬采用地面飼養方式,自由采食和飲水,仔豬舍為半開放式,通風和采光良好,溫度、濕度適宜。按照豬場常規程序進行消毒、免疫、驅蟲。試驗期為28d。
1.4.1 血液樣品制備
試驗第14 天從每個重復隨機取1 頭仔豬,為每頭仔豬肌肉注射1mg/kg 雞卵清白蛋白(OVA)。試驗第28 天,取第14天注射過OVA 的仔豬前腔靜脈采血5mL,用冷凍離心機離心10min,分離血清,放于-20℃冰箱凍存,用于測定血清皮質醇水平。
試驗第28 天從余下的3 個重復中每個重復隨機取1 頭仔豬,共20 頭,對每頭仔豬進行前腔靜脈采血10mL,離心后分離血清,置于-4℃和-20℃冰箱凍存,分別用于酶類指標和血清激素指標的測定。
1.4.2 測定指標及方法
1.4.2.1 血清酶指標測定
采用南京建成生物工程研究所提供的試劑盒測定谷草轉氨酶(GOT)活性、谷丙轉氨酶(GPT)活性、堿性磷酸酶(AKP)活性,嚴格按照說明進行操作。
1.4.2.2 血清激素指標測定
生長激素(GH)、胰島素樣生長因子(IGF-I)、甲狀腺素(T4)、皮質醇(Cor)均采用豬的酶聯免疫吸附試劑盒(ELISA)測定。
試驗采用SPSS 17.0 進行數據統計分析,再用LSD 法進行多重比較,<0.05 表示差異顯著。
由表2 可知,與對照組相比,各試驗組血清谷草轉氨酶活性均有所提高,其中處理3、4 組酶活性顯著高于對照組(>0.05),處理2、5 組酶活性與對照組差異不顯著(<0.05);各試驗組谷丙轉氨酶活性與對照組相比有升高趨勢,其中處理4組酶活性最高,但各組之間差異不顯著(>0.05);在堿性磷酸酶活性方面,處理2、3、4、5 組酶活性均顯著高于對照組(<0.05),其中處理3 組酶活性最高,與對照組相比顯著提高25.44% (<0.05)。

表2 ASPS 對斷奶仔豬血清GOT、GPT 和AKP 的影響(單位:IU/L)
由表3 可知,各試驗組生長激素水平與對照組相比均有所提高,處理2 組與對照組相比差異不顯著(>0.05),處理3、4、5 組生長激素水平顯著高于對照組(<0.05);各試驗組胰島素樣生長因子水平均顯著高于對照組(<0.05),其中處理4 組胰島素樣生長因子水平最高;各試驗組甲狀腺素水平均高于對照組,處理2 組與對照組差異不顯著(>0.05),處理3、4、5組甲狀腺素水平顯著高于對照組(<0.05);各試驗組皮質醇水平與對照組相比均有所下降,處理2 組與對照組差異不顯著(>0.05),處理3、4、5 組皮質醇水平顯著低于對照組(<0.05)。

表3 ASPS 對斷奶仔豬部分血清激素指標的影響
谷丙轉氨酶(GPT)和谷草轉氨酶(GPT)是氨基酸參加轉氨基作用時最重要的酶。谷氨酸與丙酮酸之間的轉氨作用由GPT 催化,其中以肝臟中GPT 活力最大,GPT 活力可作為診斷肝細胞功能的指標。谷氨酸與草酰乙酸轉變成α-酮戊二酸和天冬氨酸時由GOT 催化,其中以心臟中GOT 活力最大,GOT 活力可以作為心臟病變診斷的指標。劉合軍等[3]研究發現,0.1%刺五加水提物可提高斷奶仔豬血清中谷草轉氨酶和谷丙轉氨酶活性,與本試驗結果相一致。本試驗結果顯示,整個試驗期ASPS 對斷奶仔豬血清谷丙轉氨酶活性沒有產生顯著影響(>0.05),說明ASPS 對斷奶仔豬肝臟功能無不良影響;日糧中添加500mg/kg 與800mg/kg ASPS 組仔豬血清谷草轉氨酶活性顯著高于對照組(<0.05),說明ASPS 能提高氨基酸的分解利用率。
血清堿性磷酸酶(AKP) 廣泛分布于肝臟、骨骼、腸、腎等組織經肝臟向膽外排出的一種酶,AKP 作為一種非特異性磷酸單酯酶,其對機體骨骼發育、脂肪代謝及糖類和蛋白質的吸收轉運過程非常重要。Yablanski 指出,AKP 活性增強有利于仔豬日增重及生產性能提高[4]。燕富永[5]研究結果表明,刺五加提取物組血清AKP 水平高于對照組(>0.05),這與動物生長速度有關。本試驗結果顯示,添加ASPS 的各組AKP 活力顯著高于對照組,日糧中添加500mg/kg ASPS 組AKP 活力最高(<0.05),這正好與上述研究結果相符合。
生長激素(GH)是腺垂體細胞分泌的一種蛋白質,GH 處于生長軸的中心環節,對機體蛋白質沉積、骨骼生長等具有促進作用。胰島素樣生長因子(IGF)包括IGF-Ⅰ和IGF-Ⅱ兩種,IGF-Ⅰ依賴于GH,可促進體外培養的多種細胞增殖,對蛋白質和DNA 合成均具有促進作用。熊文中等[6]研究發現,用豬生長激素處理的育肥豬,其日增重顯著增加(<0.05)。燕富永等[7]試驗研究表明,將刺五加提取物添加到仔豬日糧中,對下丘腦-垂體-腎上腺軸功能及與生長相關的激素水平具有調節作用,與本試驗結果相一致。李愛菊[8]試驗研究發現,日糧添加刺五加多糖可提高斷奶仔豬的采食量、日增重。本試驗結果顯示,添加ASPS 后,仔豬血清GH 和IGF-Ⅰ水平均高于對照組,其中添加800mg/kg 組GH 和IGF-Ⅰ水平最高,說明ASPS 能通過調節GH、IGF-Ⅰ水平來發揮其促生長作用,提高仔豬生長速度。
T4 的生理作用十分廣泛,生理劑量的T4 能增強腸道對半乳糖和葡萄糖的吸收,促進肝糖原的合成與糖原異生;另外對脂肪分解也有一定的促進作用,進而減少脂肪儲存。T4 能通過刺激mRNA 的形成對蛋白質及各種酶的生成起到促進作用,尿素氮水平下降[9]??梢奣4 具有調節機體糖、蛋白質和脂肪代謝的作用。另有報道稱,T4 能促進機體GH 和IGF-Ⅰ的分泌。本研究結果發現,仔豬日糧中添加ASPS 后血清T4 水平高于對照組(<0.05),其中800mg/kg 組的T4 水平最高,說明ASPS 對下丘腦-垂體-甲狀腺軸活性具有促進作用,從而提高了機體基礎代謝。而且隨著血清T4 水平的升高,血清堿性磷酸酶活性也會隨之升高,這體現了T4 對機體的促生長作用,尤其是促進了骨骼的發育。
皮質醇(Cor)是下丘腦-垂體-甲狀腺軸在應激反應里分泌的一種類激素,屬于糖皮質激素的一種,其水平可反映動物遭受應激程度。Founderburke 等研究了28 日齡斷奶仔豬受到應激影響(主要包括溫度應激、心理應激、營養應激)后血清皮質醇水平顯著升高[10]。張金枝在蛋雞熱應激狀態下向飼料中添加刺五加水提物后的產蛋率和飼料轉化率均有所提高[11]。張一然等[12]研究認為,刺五加多糖對免疫應激仔豬的生長抑制具有緩解作用,與本試驗結果相一致。本試驗結果顯示,日糧中添加ASPS 使仔豬血清皮質醇水平產生下降趨勢,其中500、800 和1000mg/kg ASPS 組能顯著降低仔豬血清皮質醇水平,說明ASPS 對仔豬斷奶后的應激具有一定的緩解作用,有利于仔豬生長發育。
(1)ASPS 可提高斷奶仔豬血清中GOT、GPT 和AKP 活性,促進仔豬胃腸對營養物質的消化吸收,減弱營養應激。
(2)ASPS 可提高斷奶仔豬血清中GH、IGF-I 和T4 水平,降低血清皮質醇水平,在促進仔豬生長的同時能降低仔豬應激反應。
(3)綜合本試驗各項指標,斷奶仔豬飼糧中ASPS 的最適宜添加量為800mg/kg。