王 森,黃宇希,彭 歡,黎睿君
(大連海洋大學(xué)水產(chǎn)與生命學(xué)院,遼寧省海洋動物免疫學(xué)與疫病防控重點(diǎn)實(shí)驗(yàn)室,大連海洋大學(xué)水生動物醫(yī)院,遼寧 大連 116023)
2021年3月中旬,遼寧省莊河市某養(yǎng)殖場循環(huán)水系統(tǒng)養(yǎng)殖的大竹莢魚出現(xiàn)離群緩游、體表出血等癥狀。病魚經(jīng)顯微鏡檢測、組織內(nèi)細(xì)菌分離及優(yōu)勢細(xì)菌鑒定,結(jié)果表明引起大竹莢魚死亡的主要病原為格氏乳球菌(Lactococcus gar vieae)。筆者通過藥敏試驗(yàn)篩選抑菌藥物的臨床指導(dǎo),使該病得到有效控制。
大竹莢魚于3月中旬開始發(fā)病,患病魚體長約35厘米,胸鰭基部、背鰭、臀鰭、眼球外緣、上顎均有出血情況,尾部嚴(yán)重出血(圖1),解剖可見肝臟發(fā)黃,脾臟充血腫大,腎臟充血(圖2),鰓部鏡檢未見寄生蟲。

圖1 患病大竹莢魚體表

圖2 患病大竹莢魚解剖
肉眼觀察患病魚體表,多個部位出血情況嚴(yán)重;取鰓絲進(jìn)行鏡檢,未見寄生蟲,排除由寄生蟲引起的發(fā)病。將病魚解剖后分別取腦部、肝臟、腎臟、脾臟組織于NA培養(yǎng)基上進(jìn)行細(xì)菌接種分離,28℃恒溫培養(yǎng)12小時,組織中均分離到菌落形態(tài)特征一致的細(xì)菌。菌落為乳白色、圓形、較透明、表面光滑、邊緣整齊,生長較為緩慢。將純化后的細(xì)菌進(jìn)行革蘭氏染色鑒定,染色結(jié)果為紫色,細(xì)菌呈球狀或球桿狀、散狀分布或呈不規(guī)則短鏈狀排列,鑒定為革蘭氏陽性菌(圖3);使用細(xì)菌DNA提取試劑盒分別提取腦部、肝臟、腎臟、脾臟處分離純化后的細(xì)菌DNA,進(jìn)行16S r DNA鑒定,分子鑒定結(jié)果結(jié)合生理生化鑒定結(jié)果,表明該優(yōu)勢細(xì)菌為格氏乳球菌。

圖3 革蘭氏染色結(jié)果
對分離到的格氏乳球菌進(jìn)行藥敏試驗(yàn),選擇8種獸醫(yī)行政管理部門已批準(zhǔn)的水產(chǎn)抗菌類藥物測定該細(xì)菌對藥物的敏感性,結(jié)果表明格氏乳球菌對鹽酸多西環(huán)素(水產(chǎn)用)、恩諾沙星(水產(chǎn)用)兩種抗菌藥敏感;對氟甲喹藥物中敏;對余下5種抗菌藥呈耐藥(表1)。

表1 藥敏試驗(yàn)結(jié)果
1.清除病原 患病魚與未發(fā)病魚分池隔離飼養(yǎng),養(yǎng)魚用具應(yīng)徹底消毒,患病魚池與健康魚池工具禁止混用,死魚應(yīng)及時打撈處理,不得隨意丟棄。
2.藥物殺菌 使用鹽酸多西環(huán)素粉(水產(chǎn)用)藥物進(jìn)行拌料投喂,每千克魚體重投喂20毫克鹽酸多西環(huán)素粉,每天1次,連續(xù)投喂5天。
3.加強(qiáng)營養(yǎng) 在餌料中適量添加維生素C等營養(yǎng)物質(zhì),增強(qiáng)魚體免疫力與抗應(yīng)激能力。
采用上述方案對該病進(jìn)行防治,大竹莢魚死亡數(shù)量逐日減少,表明該治療措施對大竹莢魚細(xì)菌性疾病治療正確有效,可供大竹莢魚等其他海水魚類細(xì)菌性疾病防治提供參考。