電化學(xué)發(fā)光法和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)25-羥基維生素D評(píng)價(jià)分析

李沙

【摘要】目的：對(duì)電化學(xué)發(fā)光法和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)25-羥基維生素D進(jìn)行評(píng)價(jià)分析。方法：收集200份血清樣本，分別進(jìn)行液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)和電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)，評(píng)價(jià)相關(guān)性及一致性。結(jié)果：兩種方法檢測(cè)25-羥基維生素D總濃度無明顯差異性，P>0.05。相關(guān)性及一致性好。結(jié)論：電化學(xué)發(fā)光法和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法在25-羥基維生素D檢測(cè)中的相關(guān)性及一致性好。

關(guān)鍵詞：電化學(xué)發(fā)光法;液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法;25-羥基維生素D

【Abstract】Objective： To evaluate and analyze the detection of 25-hydroxyvitamin D by electrochemiluminescence and liquid chromatography-tandem mass spectrometry.Methods： 200 serum samples were collected and detected by liquid chromatography-tandem mass spectrometry and electrochemiluminescence respectively.Correlation and consistency were assessed. Results： There was no significant difference in the total concentration of 25-hydroxyvitamin D detected by the two methods， P>0.05. Good correlation and consistency. Conclusion： Electrochemiluminescence and liquid chromatography-tandem mass spectrometry have good correlation and consistency in the detection of 25-hydroxyvitamin D.

Key words： electrochemiluminescence; liquid chromatography-tandem mass spectrometry; 25-hydroxyvitamin D

維生素D是人體健康發(fā)展所必須的重要營(yíng)養(yǎng)元素，維生素D補(bǔ)充情況將會(huì)對(duì)人體正常的磷和鈣代謝產(chǎn)生影響，密切聯(lián)系人體健康，所以，維生素D水平測(cè)量結(jié)果的準(zhǔn)確對(duì)預(yù)防和治療多種代謝相關(guān)疾病具有積極意義。在人體血液中，維生素D主要是以25-羥基維生素D的形式運(yùn)輸，這也是評(píng)價(jià)人體內(nèi)部維生素D營(yíng)養(yǎng)情況的有效標(biāo)準(zhǔn)。電化學(xué)發(fā)光法和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法等可對(duì)25-羥基維生素D濃度進(jìn)行檢驗(yàn)，同時(shí)基于測(cè)定結(jié)果評(píng)價(jià)人體內(nèi)維生素D情況。

1.材料和方法

1.1一般材料

收集200份樣本進(jìn)行試驗(yàn)，并且按照試驗(yàn)需求均進(jìn)行液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)和電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)。

1.2實(shí)驗(yàn)方法

電化學(xué)發(fā)光法采用電化學(xué)發(fā)光全自動(dòng)免疫分析儀及相關(guān)配套試劑盒進(jìn)行，樣品檢測(cè)操作流程按照試劑盒說明標(biāo)準(zhǔn)進(jìn)行。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法設(shè)置色譜柱c18柱，流動(dòng)相A相為0.1%甲酸水溶液，B相為流速0.3ml/min甲醇，進(jìn)樣體積為1.5μL，柱溫為35℃進(jìn)行梯度洗脫。質(zhì)譜條件采用電噴霧電離，正離子模式 （ESI+）進(jìn)行多反應(yīng)監(jiān)測(cè)。

1.3統(tǒng)計(jì)學(xué)處理

采用SPSS24.0進(jìn)行數(shù)據(jù)統(tǒng)計(jì)，計(jì)量資料t檢驗(yàn)，P<0.05存在統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。Kappa分析比較兩種方法一致性。

2.結(jié)果

用兩種方法分別檢測(cè)200份血清樣本中25-羥基維生素D水平。結(jié)果顯示，電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)后25-羥基維生素D總濃度分布范圍為9.11～115.25nmol/L，平均（42.04±10.22）nmol/L;液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)后25-羥基維生素D總濃度分布范圍為9.24～113.76nmol/L，平均（42.55±10.24）nmol/L。兩組比較，t=1.320，P>0.05。Spearman相關(guān)系數(shù)r=0.811（95% CI：0.753～0.844），ICC=0.761（95% CI：0.712～0.805）。

3.討論

維生素D在人體內(nèi)可轉(zhuǎn)變成為25-羥基維生素D，在人體全血或者血清之中，25-羥基維生素D的含量可充分的將人體維生素D的營(yíng)養(yǎng)情況作出充分反應(yīng)。目前25-羥基維生素D常見檢測(cè)方法有酶聯(lián)免疫法、電化學(xué)發(fā)光法、放射免疫法以及液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法等。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法（LC-MS/MS）處理樣品之后選擇應(yīng)用液相色譜實(shí)現(xiàn)分離，使用串聯(lián)質(zhì)譜儀設(shè)備作為檢測(cè)儀器，在經(jīng)過多種反應(yīng)檢測(cè)掃描模式處理后，對(duì)碎片離子和分子離子展開兩次質(zhì)量選擇，同時(shí)凸顯出其對(duì)25-羥基維生素D檢測(cè)的靈活性、準(zhǔn)確性和特異性。液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法為目前最廣泛的定量測(cè)定方法，亦被視為金標(biāo)準(zhǔn)。

本次研究將液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法檢測(cè)和電化學(xué)發(fā)光法檢測(cè)同步用于25-羥基維生素D檢測(cè)，以評(píng)價(jià)兩者一致性。結(jié)果顯示，兩種方法檢測(cè)25-羥基維生素D總濃度無明顯差異性，P>0.05。相關(guān)性及一致性好。

綜上所述，電化學(xué)發(fā)光法和液相色譜-串聯(lián)質(zhì)譜法在25-羥基維生素D檢測(cè)中的相關(guān)性及一致性好。

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