血清I 型膠原C 末端肽在女性原發性骨質疏松癥中的運用意義研究

王全浪，唐彥

重慶市中醫骨科醫院檢驗科，重慶 400010

骨質疏松癥是系統性骨骼疾病， 該疾病的主要病癥是骨強度降低，患者骨折風險增加，該疾病發病率較高，已經成為全球共同關注的一項健康問題。現今無準確數據，因人口基數較大，老齡化嚴重，骨質疏松癥人數增多[1]。 現階段，臨床在對骨密度（BMD）進行測量時，最常見的檢測方式為雙能X 線，但是在對骨質疏松的危險因素進行評估時， 骨密度并不能對此作出全面的評估。 骨組織本身的代謝產物主要是骨轉換標志物，將該標志物與BMA 結合，共同對骨質疏松進行診斷，能夠有效提升診斷準確度[2-3]。在血液循環過程中或是在尿液中， 骨轉換標志物水平改變，以評估全身骨骼動態狀況。 骨形成標志物、骨吸收標志物均是主要的骨轉換標志物， 對于大部分的骨轉換標志物而言，I 型前膠原氨基端前肽（PINP)、血清I 型膠原C 末端肽（CTX）兩者屬于敏感性指標[4-5]。 CTX 不可有效評估骨代謝情況，對骨質疏松癥藥物治療效果進行監測。有研究指出，相較于骨密度指標而言， 骨轉換標志物指標鑒別診斷疾病應用時間更早[6]。 該文隨機選取2018 年1 月—2020 年1 月期間該院收治的80 例骨折和筋傷患者，探討CTX 在女性原發性骨質疏松癥中的診斷意義。 現報道如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料

從該院收治的骨折和筋傷患者中隨機抽取80例，均為女性；年齡65～85 歲，平均（77.32±2.15）歲。收集患者病史，為其檢查骨密度，依照臨床癥狀和骨密度對患者進行分組，分別為骨質疏松組、骨量減少組、骨量正常組。 骨質疏松組25 例，年齡65～82 歲，平均（77.28±2.17）歲；合并高血壓8 例，高血糖7 例。骨量減少組25 例，年齡66～84 歲，平均（77.3±2.14）歲；合并高血壓6 例，高血糖6 例。 骨量正常組30例，年齡67～85 歲，平均（77.32±2.15）歲；合并高血壓7 例，高血糖7 例。3 組一般資料對比，差異無統計學意義（P＞0.05），具有可比性。 抽取所有患者的空腹靜脈血4 mL，放在促凝管中，其離心提取血清1 mL，放在-20℃環境下冷凍，等待檢測。 所有患者均了解研究內容，并自愿簽署知情同意書，并經過該院倫理委員會批準通過。

1.2 方法

使用磁微粒化學發光法儀檢測CTX 和PINP 水平。

使用泰州澤成生物技術有限公司生產的化學發光儀對指標進行檢測。

檢測樣本左骨骨徑、大粗隆BMD 值，對其相關指標進行準確記錄。 設定骨密度儀器測定精密度為1.7%，骨質疏松癥診斷參數依照WHO 標準進行。

將待測樣本取出放在室溫下解凍， 混合所有試劑盒待測樣本。 將溶液放置在室溫中，并在18～22℃下進行研究。

①在研究前需將所有試劑放至室溫， 儀器開機預熱至少30 min。 ②按儀器操作指引， 進行反應管（杯）的裝載，配套試劑的添加或更換，廢液、廢管的清理和液路充滿操作。③在試劑裝載前，將要用到的試劑放置在混勻設備上充分混勻， 目視檢查試劑溶液組分應澄清，無異物、沉淀物和絮狀物，磁微粒試劑應為均勻懸濁液，無明顯凝集。④準備異硫氰酸熒光素（FITC）標記的抗體、堿性磷酸酶（AP）標記的配對抗體及樣本，各劑量均為30 μl，三者結合生成“三明治” 復合物。 ⑤于“三明治” 復合物內加含有抗FITC 抗體的磁微粒（劑量為30 μl），通過抗FITC 抗體特異性結合FITC，使抗原抗體免疫復合物結合在磁微粒上。⑥借助外加磁場作用，分離免疫反應形成的復合物、未結合的其他物質，之后對復合物進行清洗，并加入酶促化學發光底物。 ⑦因酶作用，底物發生催化、裂解等一系列變化，最終產生處于不穩定狀態的激發態中間體，當其回到基態時發出光子，產生發光反應，此時借助化學發光儀可檢測其發光強度。⑧在檢測范圍內，發光強度與樣本內含量呈正比，使用改良的四參數Logistic 方程擬合可計算出樣本中濃度。

1.3 觀察指標

使用化學發光儀對不同靜脈血清中CTX 和PINP 水平實施測定，對其水平和BMD 進行比較。

1.4 統計方法

采用SPSS 22.0 統計學軟件處理數據， 計量資料符合正態分布，以（±s）表示，組間差異比較采用t檢驗和方差分析；計數資料以頻數和百分率（%）表示，組間差異比較采用χ2檢驗。 P＜0.05 為差異有統計學意義。

2 結果

對比3 組BMD 指標和血清I 型膠原C 末端肽水平，相比于骨質疏松組，骨量正常組、骨量減少組的BMD 水平較高，CTX 水平和PINP 較低， 組間差異有統計學意義（P＜0.05）。 見表1。

表1 3 組BMD 指標、CTX 水平、PINP 對比（±s）Table 1 Comparison of BMD indicators, CTX, and PINP among the three groups（±s）

表1 3 組BMD 指標、CTX 水平、PINP 對比（±s）Table 1 Comparison of BMD indicators, CTX, and PINP among the three groups（±s）

注：與骨質疏松組對比，*P＜0.05

組別 BMD 指標（g/cm3）CTX（pmol1L）PINP（μg/mL）骨質疏松組(n=25)骨量正常組(n=30)骨量減少組(n=25)F 值P 值0.54±0.02（0.98±0.03）*（0.74±0.02）*2 374.766＜0.001 1.08±0.02（0.24±0.01）*（0.26±0.05）*6 722.867＜0.001 67.31±31.54（42.34±17.75）*（48.46±20.24）*7.884 0.001

3 討論

骨質疏松癥屬于常見疾病，患者常見骨痛、腰背疼痛以及骨折等癥狀， 并且骨質疏松癥患者發生骨折的風險較高，且如果患者發生骨折現象，長期接受臥床治療可能會對患者的泌尿系統、 呼吸系統等產生影響，危及患者生命安全[7-8]。骨質疏松癥具有一定的發病隱匿特征， 早期骨丟失患者不會出現明顯的癥狀或是體征表現，大部分患者并未對此提高重視，耽誤了疾病的最佳治療時機。 骨折多發部位主要是股骨轉子以及脊柱椎體部位，一旦確診，治療難度較高，對社會、家庭造成負擔[9-10]。

流行病學調查可明確BMD 和髖部骨折相關危險因素。現階段臨床診斷中，主要依賴于骨礦物質密度以及雙能X 線對骨質疏松程度進行判定，在對骨質疏松癥進行分級以及診斷時， 大多是按照世界衛生組織的骨密度峰值降低標準進行判定[11]。 BMD 不能對骨代謝情況進行準確反映，并且不能對骨微結構進行說明，同時還極易受到骨大小形狀的影響[12]。 在絕經期女性中，骨質疏松癥發生率較高。臨床上年齡為影響臨床骨質疏松癥的因素，與BMD 聯合檢測可提高骨折風險度的評估準確性。 有關學者認為骨量丟失的反轉以及靜吸在一定程度上決定了抗吸收治療效果[13]。 骨質主要依照骨內部結構形態將其分為松骨質和密骨質， 成年人骨有機質占骨干重1/3，主要為膠原纖維。隨年齡增長，分布在骨骼中的有機質與無機質也在不斷發生變化， 且二者之間的比例也有所改變。 就老年人而言，其機體內成骨細胞I 型膠原形成因子的合成較少，骨有機質量逐漸減少。 因I型膠原的合成低，所以容易減少膠原纖維的排列，降低骨礦化形成風險[14]。I 型膠原的走向與骨強度之間存在密切聯系，如果縱向膠原纖維較多，則能夠使骨抗張力強度有所增加， 而混合性較遠較多則能夠促使骨抗壓力強度增[15-16]。骨轉換可控制骨數量和骨質量， 骨量獲得與丟失在一定程度上會受到骨形成與骨吸收失衡的影響[17]。 骨轉換量高會出現骨量丟失現象，影響骨骼微結，使之改變，同時，骨轉換低亦會出現骨量丟失現象，導致骨脆性提高[18-19]。

楊國君等[20]學者研究中選取的89 例患者中，分為3 組，分別為骨量正常組、骨量減少組、骨量疏松組，其中骨量正常組的BMD 指標、CTX 指標分別為（0.996±0.021）g/cm3、（0.784±0.008）pmol/L；骨量減少組的BMD 指標、CTX 指標分別為（0.754±0.012）g/cm3、（0.924±0.008）pmol/L； 骨 量 疏 松 組 的BMD 指 標、CTX 指標分別為（0.551±0.013）g/cm3、（1.090±0.016）pmol/L，對比結果顯示，相比骨量正常組、骨量減少組，骨質疏松組CTX 明顯更高，BMD 明顯更低（P＜0.05），說明CTX、BMD 可以作為骨質疏松診斷的重要指標。 對該次研究結果分析，骨質疏松組的BMD 為（0.54±0.02）g/cm3、CTX 水平為（1.08±0.02）pmol/L；骨量正常組的BMD 為（0.98±0.03）g/cm3、CTX 水平為（0.24±0.01）pmol/L； 骨量減少組的BMD 為 （0.74±0.02）g/cm3、CTX 水平為（0.26±0.05）pmol/L；骨質疏松BMD 明顯較其他兩組低，而CTX 水平明顯較其他兩組高（P＜0.05），在BMD、CTX 方面，該次研究結果與上述報道結果具有一致性， 再次對BMD、CTX 水平診斷的有效性予以證實。 此外該次研究發現， 骨質疏松組PINP 為（67.31±31.45）μg/mL；骨量正常組PINP 為（42.34±17.75）μg/mL； 骨量減少組PINP 為（48.46±20.24）μg/mL，相比骨量正常組、骨量減少組，骨質疏松組PINP 水平更高（P＜0.05），由此可見，較之骨量正常組，骨質疏松、骨量減少組的BMD 水平下降，骨質疏松、 骨量減少組的CTX、PINP 水平上升。 表明BMD 水平的下降會導致骨質疏松，CTX、PINP 水平增加會影響間骨質中有機量的減少。 膠原纖維合成有所減少，會導致無機質不能沉積礦化，最終促使骨吸收量增加。

綜上所述，導致骨質疏松癥的因素有多種，存在嚴重差異性，其與年齡、激素水平存在一定差異性。骨轉換標志物屬于敏感性指標， 在女性原發性骨質疏松癥中， CTX 的診斷具有重要價值， 可廣泛推廣應用。