30%茶皂素水劑對茶脊冠網蝽及2種蜘蛛的室內毒力測定

彭宇聰 高 源 王夢思 崔清梅 徐 卓 彭 宇

(1.湖北大學資源環境學院 湖北武漢 430062；2.湖北大學生命科學學院 湖北武漢 430062；3.湖北省恩施州農業科學院茶葉研究所 湖北恩施 44500)

茶脊冠網蝽Stephanitischinensis又名茶網蝽，是我國西南茶區主要害蟲[1]。茶脊冠網蝽具有體積小、易繁殖、易擴散、易爆發、多重危害和難以控制等特點[2]。主要集中在成熟茶葉的背面刺吸葉片汁液，種群數量較大時也會危害到新生長出來的嫩葉，使受害茶樹葉片正面呈現許多白色斑點，危害嚴重時茶園整體遠看一片灰白[3]，影響茶樹生長，導致茶樹產量和質量下降[4]，甚至會導致茶樹枯死。

近年來，由于商貿往來、種苗采購、氣候變化等使得該蟲傳播速度增長較快[5]。2012年茶脊冠網蝽于陜西省紫陽縣、鎮巴縣向東北方向呈梯次的傳播形式進行擴散[6]。2013年底，茶脊冠網蝽已擴散到鎮巴縣的10個鎮，紫陽縣5個鎮，大片茶園受到不同程度的危害[3]。截止2017年，茶脊冠網蝽已蔓延到漢江流域、嘉陵江流域的十五個重點產茶鄉鎮，約7297hm2茶園發生了茶脊冠網蝽危害[5]。2016-2020年茶脊冠網蝽在恩施州及其周邊茶區大爆發，已成為當地茶葉生產中最嚴重的蟲害之一。

現階段茶脊冠網蝽的防治仍以化學防治為主，但化學防治會導致環境污染、農藥殘留、害蟲抗藥性和傷害天敵等問題[7-9]。30%茶皂素水劑為近年登記的植物源農藥，對環境的兼容性好、無污染、殘留低，對多種茶園害蟲具有較好的防控效果[10]。為探究30%茶皂素水劑對茶脊冠網蝽的防治效果，我們測定了30%茶皂素水劑對茶脊冠網蝽和蜘蛛的室內毒性，為利用30%茶皂素水劑防治茶脊冠網蝽提供理論依據。

1 材料與方法

1.1 供試昆蟲

供試昆蟲為茶脊冠網蝽Stephanitischinensis2至3齡若蟲，采自恩施州農科院茶葉所試驗基地。

供試蜘蛛為機敏異漏斗蛛Agelenadifficilis、白斑獵蛛Evarchaparalbaria，采自恩施州農科院茶葉所試驗基地。將采回的蜘蛛單頭飼養于玻璃管(長13cm，直徑2cm)中[11]。

1.2 供試殺蟲劑

30%茶皂素水劑，湖北信風作物保護有限公司提供。0.3%苦參堿水劑，河北沃德豐藥業有限公司提供。

1.3 30%茶皂素水劑對茶脊冠網蝽若蟲的室內毒力測定

采用葉片浸藥飼蟲法[12]測定30%茶皂素水劑對茶脊冠網蝽若蟲的毒性。將30%茶皂素水劑配置為10、20、40、80和160(單位：g/L)5個濃度。混配液為30%茶皂素水劑+0.3%苦參堿水劑。配置5個濃度梯度(單位：g/L)(5+2、10+4、20+8、40+16、80+32)。選用化學農藥2.5%聯苯菊酯配置5個濃度梯度(單位：mg/L)(1、2、4、8和16)作為對照。

將新鮮茶葉用蒸餾水洗凈晾干，浸入藥液30s取出瀝干至茶葉表面不再形成水珠。用脫脂棉包住茶葉柄基部，滴加相對應濃度的藥液以防葉片失水干枯。將浸藥茶葉置于直徑9cm培養皿中，每皿接入茶脊冠網蝽2-3齡若蟲20頭，置于培養箱中(T=28±1℃、RH=80%±5%、L：D=14：10)。每個濃度重復5次，以清水為空白對照。處理24h、48h和72h后觀察茶脊冠網蝽的死亡數。

1.4 30%茶皂素水劑對2種蜘蛛的毒性測定

使用藥膜法[13]測定30%茶皂素水劑及混配液對機敏異漏斗蛛、白斑獵蛛的毒性。將30%茶皂素水劑和混配液按照田間使用濃度進行稀釋。即30%茶皂素水劑用水稀釋300倍，30%茶皂素水劑和0.3%苦參堿水劑等體積混合，用水稀釋500倍。用滴管向玻璃管(長度13cm、直徑2cm)中分別滴加稀釋過的30%茶皂素水劑和混配液。轉動玻璃管至玻璃管內壁均被藥液潤濕后將其倒置，等待玻璃管內壁自然風干。向風干的玻璃管中接入1頭蜘蛛。24h和48h后檢查蜘蛛是否存活。每種藥劑處理蜘蛛30頭。

1.5 30%茶皂素水劑對2種蜘蛛的驅避率測定

參照秦燕妮的方法測定供試藥劑對蜘蛛的驅避作用[14]。供試藥劑及處理包括：30%茶皂素水劑300×、混配液同上和2.5%聯苯菊酯乳油1500×，以清水作為對照。先將直徑12cm的圓形濾紙對折分成4等份。用滴管將供試藥劑滴加到濾紙上，待藥液干后，將濾紙放入直徑12cm的培養皿中。每皿接入1頭蜘蛛，每1h觀察并記錄蜘蛛的所在位置。每種蜘蛛共測定30頭，每個處理重復5次。試驗過程于安靜環境下進行。

1.6 數據處理及統計分析

死亡率=試蟲死亡數/試蟲總數×100%

校正死亡率=(處理死亡率-對照死亡率)/(1-對照死亡率)×100%

驅避率=(對照試蟲數-處理試蟲數)/對照試蟲數×100%

運用SPSS 22.0統計軟件對數據進行統計分析。按照Finney幾率值分析法[15]，求毒力回歸方程、致死中濃度、95%置信限。在不同濾紙上蜘蛛的停留頭數差異采用單因素方差分析，平均數的多重比較采用最小顯著性極差法。

2 結果與分析

2.1 30%茶皂素水劑對茶脊冠網蝽若蟲的毒力測定

30%茶皂素水劑對茶脊冠網蝽若蟲具有一定的毒殺活性。24h后，茶脊冠網蝽在取食了供試藥劑處理的葉片后其活動減弱，觸碰蟲體其反應強度降低。供試藥液濃度越高茶脊冠網蝽致死性越強，且隨時間延長，死蟲數增加。30%茶皂素水劑處理24h、48h和72h后，對茶脊冠網蝽若蟲的致死中濃度LC50(單位：g/L)分別為98.74、55.66和43.11(表1)。30%茶皂素水劑與0.3%苦參堿水劑混配液對茶脊冠網蝽若蟲的作用效果與30%茶皂素水劑一樣，隨時間延長，毒殺效果逐漸增加。但LC50與30%茶皂素水劑相差不明顯，表明混配增效作用不明顯。2.5%聯苯菊酯處理后，迅速有若蟲死亡。隨時間延長，死亡數逐漸增加。其對茶脊冠網蝽若蟲的速效性及毒力均高于30%茶皂素水劑。

表1 30%茶皂素水劑對茶脊冠網蝽若蟲的毒力回歸方程

表2 2.5%聯苯菊酯乳油對茶脊冠網蝽若蟲的毒力回歸方程

2.2 30%茶皂素水劑對2種蜘蛛的毒性

30%茶皂素水劑300倍稀釋液及其混配液處理的機敏異漏斗蛛和白斑獵蛛在24h、48h后均活動正常。說明30%茶皂素水劑300倍稀釋液及其混配液對供試的2種蜘蛛均無直接毒殺作用。

2.3 30%茶皂素水劑對2種蜘蛛的驅避作用

藥劑對蜘蛛驅避程度的大小可用該種試劑處理區域內停留蜘蛛的數量表示，驅避程度大則該種試劑處理區域停留的蜘蛛數量少[16]。30%茶皂素水劑處理濾紙上蜘蛛的停留數與對照無差異，表明30%茶皂素水劑對機敏異漏斗蛛的驅避作用與對照沒有差異，極顯著低于化學藥劑2.5%聯苯菊酯處理，但混配液對機敏異漏斗蛛有一定的驅避作用(表3)。

表3 機敏異漏斗蛛在不同殺蟲劑處理濾紙上的停留數量

不同藥劑處理對白斑獵蛛的驅避作用與機敏異漏斗蛛類似(表4)。30%茶皂素水劑處理濾紙上白斑獵蛛的停留數與對照并無差異，但白斑獵蛛的在混配液處理的濾紙上停留的頭數顯著低于對照。表明30%茶皂素水劑對白斑獵蛛沒有驅避作用，但混配液對白斑獵蛛存在一定的驅避作用。30%茶皂素水劑及混配液對白斑獵蛛驅避作用均極顯著低于2.5%聯苯菊酯。

表4 白斑獵蛛在不同殺蟲劑處理濾紙上的停留數量

3 討論

茶脊冠網蝽的爆發已經嚴重影響恩施州的茶葉產量與質量，成為恩施州茶葉產業發展被制約的主要因素之一。30%茶皂素水劑作為植物源農藥，具有純天然且環保、作用方式繁多、殺蟲針對性更強等諸多特點[17，18]。

本研究表明，30%茶皂素水劑對茶脊冠網蝽3齡及以下若蟲表現出毒殺活性，且隨時間延長，處理藥劑濃度增加，其作用效果逐漸增強。盡管30%茶皂素水劑及混配液對茶脊冠網蝽的毒性比化學農藥2.5%聯苯菊酯低，但對茶園蜘蛛的影響小[19]，對供試的機敏異漏斗蛛和白斑獵蛛沒有毒性，也無明顯的驅避作用，表明30%茶皂素水劑對茶脊冠網蝽的田間防治具有一定的潛力。

Pekar and Benes 認為殺蟲劑對不同類型的蜘蛛的影響可能不同，由于蛛網的作用，結網型蜘蛛可能比游獵型蜘蛛具有更大的生存優勢[20]。本研究的兩種蜘蛛均為恩施州茶園優勢種蜘蛛[21]，其中，機敏異漏斗蛛為結網型蜘蛛，白斑獵蛛為游獵型蜘蛛，供試殺蟲劑對這兩種蜘蛛的驅避作用并沒有差異。由于本研究測定的蜘蛛種類較少，30%茶皂素水劑對蜘蛛的影響還有待進一步研究。