南方根結線蟲與土壤理化性質對不同外源物的響應

毛佳， 吳險平， 王宏寶*， 王曉飛， 高玉俠

(1.江蘇徐淮地區淮陰農業科學研究所，江蘇 淮安 223001； 2.淮安市農業科技實業總公司，江蘇 淮安 223001；3.淮安市淮安區農業技術推廣中心，江蘇 淮安 223200)

根結線蟲(Meloidogyneincognita)是危害最嚴重的植物病原線蟲之一，在世界各地廣泛分布，可寄生于3 000多種植物，尤以茄科、葫蘆科和十字花科等植物受害嚴重[1]。據估計，全世界農業生產每年因各類災害造成的總損失中，根結線蟲的危害約占到5%左右，多達500億美元。黃瓜作為我國重要蔬菜種類，近年來隨著日光溫室黃瓜栽培面積的逐步擴大和復種指數的提高，根結線蟲危害日趨嚴重，并已成為黃瓜生產中的主要障礙，一般危害造成減產20%～30%，嚴重的達70%以上，甚至絕收[2-3]。近年來，由于根結線蟲危害嚴重，給蔬菜產量造成極大損失，對當地農業的可持續發展帶來極大影響，有一些關于中低毒藥劑和生防菌防治根結線蟲病方面的試驗報道[4-8]，然而在氯溴異氰尿酸及植物源材料檳榔粉等方面的報道較少。為解決生產中根結線蟲病的防治難題，本文通過不同外源物對根結線蟲室內活性及盆栽等藥效進行測定，研究了南方根結線蟲與土壤理化性質對不同外源物的響應，以期為南方根結線蟲病綜合防控提供技術參考。

1 材料與方法

1.1 供試藥劑

試驗供試外源物為40%辛硫磷乳油(連云港立本作物科技有限公司)，1.8%阿維菌素乳油(連云港立本作物科技有限公司)，50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑(南京南農科技發展有限公司)，25%噻蟲嗪水分散粒劑(江蘇寶靈化工股份有限公司)，檳榔粉(提取比例15∶1，質量比，寶雞市方晟生物開發有限公司)。

1.2 幼蟲準備

在溫室內盆栽番茄繁殖南方根結線蟲。將番茄種子播種在育苗床中，20 d后稍顯粗壯時移為盆栽。接種南方根結線蟲，1個月后，根部會產生大量卵囊。將根取出并洗去泥土，用鑷子挑取卵囊置于培養皿中，用0.5%的次氯酸鈉處理3 min，再用無菌水沖洗3次，置于25 ℃培養箱中進行孵化。3 d左右就會孵化出大量2齡幼蟲(J2)，生物檢測備用[9]。

1.3 外源物對南方根結線蟲活性試驗

各種藥劑分別配制100倍液和150倍液2份母液備用，同時配置約200條·mL-1的線蟲懸浮液備用。用移液槍吸取0.5 mL線蟲懸浮液置入5 mL離心管后，各濃度線蟲處理液容積統一設定為2 mL，根據總容量分別計算對應400、600、800、1 200、1 600、2 400倍液所需要的母液量和用水量。配置處理液時，先將計算好的用水量加入離心管的線蟲懸浮液中，接著加入不同稀釋倍數所需的母液量。將配置好的不同倍數處理液搖勻后置于試管架上，在25 ℃黑暗培養箱中分別處理24 h，鏡檢觀察線蟲死亡率。鏡檢時分別將處理液倒入凹面皿中并置于體視顯微鏡下統計存活狀態，線蟲存活狀態通過針刺法測定，即線蟲僵直不動為死蟲，彎曲蠕動狀態為活蟲[10]。試驗通過計算不同外源物對線蟲的擊倒率(矯正死亡率)來測定線蟲對各外源物的敏感性。空白對照設為清水組，每個處理重復3次，每個處理的線蟲數量約為100條。

1.4 外源混合物對南方根結線蟲盆栽藥效試驗

試驗作物：黃瓜，品種為冬美906，由天津德瑞特種業有限公司生產。將黃瓜種子(盆栽3顆種子)種在透明塑料杯中(口徑10 cm，高15 cm)，每盆土樣重0.5 kg，土壤中每100 g干土中2齡幼蟲數量為38.4條。出苗后保留2株用于試驗，待黃瓜苗2葉期進行灌根處理，共設5個盆栽處理和1個空白對照，每個處理用藥情況見表1，處理期間每2 d澆少許水以保持土壤濕度，處理30 d后觀察統計根部侵染情況，每個處理重復10盆。藥效調查采用數根瘤法，每個處理取5盆統計根結(瘤)量，計算根結減退率[11]。

表1 各處理不同外源物的混合比例

1.5 土壤理化指標測定

方法1.4中統計根結數量后的盆栽土壤按照不同處理分別混合均勻后自然陰干過篩、分裝、檢測，測定指標及測定方法參照王宏寶等[12-13]報道的土壤理化指標測定方法，即土壤多酚氧化酶活力測定采用紫色沒食子素比色法，土壤脲酶活力采用靛酚藍比色法，蔗糖酶活力采用3,5-二硝基水楊酸比色法，纖維素酶活力采用蒽酮比色法，土壤有機質采用重鉻酸鉀容量法，全氮采用凱氏定氮法，全磷采用鉬銻抗比色法，pH采用pH計測定，每個指標測定重復3次。

1.6 數據處理

采用Excel 2019和DPS 7.05軟件進行數據統計和差異顯著性分析。

2 結果與分析

2.1 外源物對南方根結線蟲J2活性的影響

表2顯示，線蟲在氯溴異氰尿酸和阿維菌素不同濃度下時對線蟲活性高，2種藥劑在稀釋2 400倍液時擊倒率仍達70%左右；而噻蟲嗪僅在400倍液下對線蟲的擊倒率為97.0%，其他濃度下擊倒率較低；檳榔粉在400～600倍液處理下表現出較好的擊倒率，辛硫磷在800倍液下擊倒率為51.7%，其他濃度處理擊倒率低。

表2 不同外源物對南方根結線蟲J2的擊倒率

2.2 各處理對南方根結線蟲的盆栽藥效

圖1、圖2顯示，隨著氯溴異氰尿酸含量的增加，根結線蟲侵染引起的根結數量逐漸降低，其中，20%和40%的氯溴異氰尿酸混合物處理(圖1中處理4和處理5)后根結數量減退率顯著降低，防控效果達到了68.4%和77.9%(圖2中處理4和處理5)。

1—2.5%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；2—5%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；3—10%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；4—20%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g；5—40%氯溴異氰尿酸混劑0.1 g。圖2 同。圖1 各處理對黃瓜根部根結數量的影響

圖2 各處理對盆栽黃瓜線蟲病的防控效果

2.3 土壤生物酶及理化性質對各處理的響應

土壤生物酶對氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應見表3，土壤多酚氧化酶除了處理2有所下降外，其他處理土壤多酚氧化酶與對照相比，含量均有所提高；土壤纖維素酶變化顯示，處理1、4、5與對照相比，促進了纖維素酶含量的增加，而處理2、3則抑制了土壤纖維素酶含量的增加。土壤脲酶含量變化顯示，不同處理正向促進了土壤脲酶含量增加，但各處理與對照間差異不顯著；土壤蔗糖酶變化顯示，不同處理作用下，土壤蔗糖酶含量均有所增加，其中，處理2、3、4、5對土壤中蔗糖酶正向促進效應顯著。

表3 土壤生物酶對氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應

土壤理化性質對氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應見表4，氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物促進了土壤全磷含量的增加，其中處理1、2、3、4土壤全磷含量與對照相比顯著增加。土壤pH變化顯示，與對照相比，混合物處理后，pH有所下降，處理2和處理3達到顯著性差異，其他處理不顯著。土壤有機質變化顯示，混合物處理后，有機質有所增加，差異不顯著；土壤全氮分析顯示，處理2、4、5與對照相比差異顯著，即氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物(外源物)施用后對土壤全氮起到了正向效應，表現為土壤全氮含量有所增加。

表4 土壤理化性質對氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物的響應

3 小結與討論

王金柱等[13-14]報道了50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑對小麥、大豆、西瓜、生姜等作物土傳病害有較好的防效，且在試驗劑量內對作物安全。50%氯溴異氰尿酸可溶粉劑37.5～45.0 kg·hm-2處理對小麥紋枯病、小麥根腐病、大豆根腐病、西瓜枯萎病、西瓜蔓枯病、姜瘟病和姜莖基腐病的防效分別為85.7%、64.4%、70.4%、90.0%、80.0%、100.0%和100.0%。本試驗發現，氯溴異氰尿酸單劑及混配制劑對根結線蟲的防控效果明顯，同時分析了不同比例氯溴異氰尿酸與檳榔粉混合物對土壤理化性質的影響，發現該混合物施用后對土壤全氮、全磷、有機質、土壤脲酶、土壤蔗糖酶起到了正向促進效應，同時對土壤pH有一定調控作用，可以作為一種土壤調理劑在生產中運用。