血清CCL11、GPX3和Gal-1水平在分化型甲狀腺癌診斷中的臨床價值

左 華，周 冬，陳曉軍

上海市寶山區(qū)仁和醫(yī)院甲乳外科，上海 200431

甲狀腺癌是一種常見的內(nèi)分泌系統(tǒng)惡性腫瘤，流行病學(xué)調(diào)查顯示，甲狀腺癌占全身惡性腫瘤的1%～5%，其發(fā)病率每年約遞增4%[1]。患者以女性居多，不同病理分型中以分化型甲狀腺癌的預(yù)后最好，其5年生存率高達97%，早期確診并規(guī)范化治療分化型甲狀腺癌成為改善預(yù)后的關(guān)鍵[2]。近年來甲狀腺超聲、CT和細針穿刺等手段在甲狀腺癌的評估和初步篩選方面得到廣泛的運用，但其對于甲狀腺結(jié)節(jié)的良惡性判斷還是有一定的假陽性率和假陰性率，同時，CT的輻射性和穿刺的創(chuàng)傷性降低了部分患者的依從性。隨著分子生物學(xué)研究的深入，血清學(xué)指標在惡性腫瘤的診斷、監(jiān)測和預(yù)后評估中越來越受到重視[3]。嗜酸性粒細胞趨化因子(CCL11)是重要的趨化因子，在結(jié)腸癌、胃癌和肺癌等惡性腫瘤中呈高表達，而在甲狀腺癌中是否呈異常表達尚不清楚[4]；谷胱甘肽過氧化物酶3(GPX3)為活性氧的清除劑，對細胞自由基損傷具有保護作用，在乳腺癌和胃癌的發(fā)生發(fā)展過程中具有作用[5-6]；半乳糖凝集素-1(Gal-1)是一種低聚糖結(jié)構(gòu)，對細胞生長、分化、黏附和凋亡具有重要作用，在胃癌和甲狀腺癌中呈高表達，對甲狀腺癌的診斷有一定的臨床價值[7]。本研究通過檢測分化型甲狀腺癌患者血清CCL11、GPX3和Gal-1水平，觀察其在診斷分化型甲狀腺癌中的臨床價值。

1 資料與方法

1.1一般資料 選擇2019年1月至2020年12月在本院經(jīng)手術(shù)病理確診為分化型甲狀腺癌的患者97例為分化型甲狀腺癌組，組織類型：乳頭狀癌66例，濾泡狀癌31例；分化程度：高分化31例，中分化43例和低分化23例；淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移：有52例，無45例；臨床分期：Ⅰ～Ⅱ期65例，Ⅲ～Ⅳ期32例。納入標準：均符合分化型甲狀腺癌的診斷標準[8]；均經(jīng)病理學(xué)確診。排除標準：具有局部和全身性感染；合并橋本甲狀腺炎、甲狀腺彌漫性病變和甲狀腺功能亢進等疾病；其他惡性腫瘤；肝、腎、肺等重要臟器功能不全；精神性疾病和智力下降者；妊娠期或哺乳期女性；合并血液系統(tǒng)和免疫系統(tǒng)疾病。選擇同期在本院就診的良性甲狀腺疾病者65例為甲狀腺良性疾病組，病理類型：結(jié)節(jié)性甲狀腺腫5例，濾泡狀腺瘤58例，甲狀腺乳頭狀囊性腺瘤1例和甲狀腺囊腫1例。選擇本院同期體檢健康者45例為健康對照組。3組年齡、性別和體質(zhì)量指數(shù)(BMI)等基線資料比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)，具有可比性，見表1。本研究經(jīng)醫(yī)院倫理委員會審核通過，所有受試者均簽署知情同意書。

表1 各組基線資料比較[n(%)或

1.2方法

1.2.1血清標本留取及檢測 入院后抽取所有受試者肘靜脈血約5 mL，在室溫下靜置約20 min，然后以3 000 r/min離心10 min，離心半徑為15 cm，去上清液約3 mL，放置于-80 ℃的冰箱中待測。使用酶聯(lián)免疫檢測儀(型號DG5033A，南京華東電子集團醫(yī)療裝備有限責任公司)按照酶聯(lián)免疫吸附試驗測定血清CCL11、GPX3和Gal-1水平，所有試劑盒采用R&D公司產(chǎn)品，嚴格按照試劑盒說明書操作。

1.2.2觀察指標 各組血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較；分化型甲狀腺癌組手術(shù)前后血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較；血清CCL11、GPX3和Gal-1水平與分化型甲狀腺癌臨床病理資料的關(guān)系，診斷甲狀腺癌的效能及各指標的相關(guān)性分析。

2 結(jié) 果

2.1各組血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較 分化型甲狀腺癌組血清CCL11和Gal-1水平高于甲狀腺良性疾病組和健康對照組(P<0.05)，甲狀腺良性疾病組CCL11和Gal-1水平高于健康對照組(P<0.05)； 而分化型甲狀腺癌組血清GPX3水平低于甲狀腺良性疾病組和健康對照組(P<0.05)，甲狀腺良性疾病組GPX3水平低于健康對照組(P<0.05)。見表2。

表2 各組血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較

2.2分化型甲狀腺癌組手術(shù)前后血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較 分化型甲狀腺癌組手術(shù)后血清CCL11和Gal-1水平較手術(shù)前降低，而血清GPX3水平較手術(shù)前升高，差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P<0.05)。見表3。

表3 分化型甲狀腺癌組手術(shù)前后血清CCL11、GPX3和Gal-1水平比較

2.3分化型甲狀腺癌組血清CCL11、GPX3和Gal-1水平與臨床病理資料的關(guān)系 分化型甲狀腺癌組患者血清CCL11、GPX3和Gal-1水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、浸潤深度和TNM分期有關(guān)(P<0.05)，而與性別、年齡、腫瘤最大直徑、組織學(xué)類型和分化程度無關(guān)(P>0.05)。見表4。

表4 分化型甲狀腺癌組血清CCL11、GPX3和Gal-1水平與臨床病理資料的關(guān)系

2.4血清CCL11、GPX3和Gal-1對分化型甲狀腺癌的診斷效能 血清CCL11、GPX3和Gal-1對分化型甲狀腺癌均具有較高的診斷效能，3項指標聯(lián)合檢測的靈敏度為91.8%，特異度為92.3%，曲線下面積(AUC)為0.962，高于CCL11(Z=4.770，P<0.05)、GPX3(Z=4.585，P<0.05)和Gal-1(Z=4.137，P<0.05)單獨檢測，而CCL11、GPX3和Gal-1之間比較，差異無統(tǒng)計學(xué)意義(P>0.05)。見表5、圖1。

表5 血清CCL11、GPX3和Gal-1對分化型甲狀腺癌的診斷效能

圖1 血清CCL11、GPX3和Gal-1診斷分化型甲狀腺癌的ROC曲線

2.5分化型甲狀腺癌患者血清CCL11、GPX3和Gal-1水平的相關(guān)性分析 分化型甲狀腺癌患者血清CCL11(r=-0.625，P<0.05)和Gal-1(r=-0.716，P<0.05)水平與GPX3水平呈負相關(guān)，而血清CCL11水平與Gal-1水平呈正相關(guān)(r=0.647，P<0.05)。

3 討 論

分化型甲狀腺癌由于早期缺乏典型的臨床癥狀，術(shù)前與甲狀腺良性結(jié)節(jié)難以鑒別。現(xiàn)有的B超、CT和組織學(xué)活檢單獨使用均不能達到滿意的鑒別良惡性的效果，存在一定的假陰性或假陽性率。影像學(xué)檢查對于檢出甲狀腺結(jié)節(jié)的靈敏度較高，但對于結(jié)節(jié)良惡性鑒別的特異度較低。甲狀腺結(jié)節(jié)細針穿刺作為細胞學(xué)檢查手段雖被廣泛使用，但也存在一定的假陽性和假陰性率，同時為有創(chuàng)操作，導(dǎo)致部分患者的依從性較差。隨著分子生物學(xué)的發(fā)展，血清學(xué)指標往往較癥狀提前3～6個月出現(xiàn)異常，因此血清學(xué)指標的檢測已經(jīng)成為腫瘤早期診斷的重要方法。

CCL11是趨化因子的1種，其表達具有器官的差異性，位于人類染色體17q11，是趨化因子超家族成員的重要組成部分，在腫瘤組織和腫瘤患者的體液中均有異常表達，往往被用于腫瘤的診斷、監(jiān)測和預(yù)后判斷[9]。在1項對前列腺癌的研究中發(fā)現(xiàn)，前列腺癌組織中的CCL11水平明顯高于癌旁組織和良性前列腺組織，體外實驗證實CCL11能夠通過使前列腺癌細胞的上皮細胞間質(zhì)化，從而促進前列腺癌細胞的侵襲和轉(zhuǎn)移能力[10]。在一項對胃癌的研究中顯示，胃癌患者血清CCL11水平明顯高于健康對照者，并發(fā)現(xiàn)血清CCL11水平與高TNM分期有關(guān)[11]。本研究結(jié)果顯示，分化型甲狀腺癌組血清CCL11水平也明顯高于甲狀腺良性疾病組和健康對照組，并且發(fā)現(xiàn)手術(shù)后血清CCL11水平較術(shù)前出現(xiàn)明顯降低，說明CCL11參與分化型甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展過程，其血清水平升高與分化型甲狀腺癌具有明顯的關(guān)系。本研究還顯示血清CCL11水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、浸潤深度和TNM分期有關(guān)，而與性別、年齡、腫瘤最大直徑、組織學(xué)類型和分化程度無關(guān)，說明血清CCL11是甲狀腺癌預(yù)后評估的重要指標，與文獻[12]所報道的結(jié)腸癌患者血清CCL11基因表達水平升高與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移和高TNM分期有關(guān)一致。本研究還發(fā)現(xiàn)當血清CCL11水平取截斷值為62.84 pg/mL時，其診斷分化型甲狀腺癌的靈敏度為63.9%，特異度為92.3%，AUC為0.835，說明CCL11對分化型甲狀腺癌具有較高的診斷效能。

GPX3是一種細胞外糖基化酶，對細胞穩(wěn)態(tài)的維持具有重要作用，通過對強氧化物的降解，清除氧自由基，起到抗氧化的作用，從而避免DNA的損傷，保持基因的完整性[13]。當機體GPX3水平降低時，清除氧自由基的能力下降，導(dǎo)致DNA損傷，從而參與腫瘤的形成過程，體外實驗證實GPX3能夠明顯抑制腫瘤細胞的增殖、遷移和侵襲等生物學(xué)行為，從而抑制腫瘤的發(fā)展[14]。本研究顯示，分化型甲狀腺癌組血清GPX3水平明顯低于甲狀腺良性疾病組和健康對照組，分化型甲狀腺癌患者術(shù)后血清GPX3水平較術(shù)前出現(xiàn)明顯升高，說明GPX3是甲狀腺癌的保護因子。本研究還顯示，血清GPX3水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、浸潤深度和TNM分期有關(guān)，而與性別、年齡、腫瘤最大直徑、組織學(xué)類型和分化程度無關(guān)，說明血清GPX3水平與腫瘤的惡性程度具有密切聯(lián)系，提示血清GPX3可作為甲狀腺癌惡性程度的評價指標，與文獻[15]所報道的血清GPX3水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、腫瘤TNM分期具有相關(guān)性一致。本研究結(jié)果還顯示，當血清GPX3水平取截斷值為93.57 μg/L時，其診斷分化型甲狀腺癌的靈敏度為95.9%，特異度為72.3%，AUC為0.806，診斷效能較高，與文獻[16]報道結(jié)果相符。

Gal-1是1種半乳糖結(jié)合家族蛋白，在細胞和組織中分布廣泛，對細胞增殖和惡性轉(zhuǎn)化具有明顯的調(diào)節(jié)作用，對腫瘤細胞轉(zhuǎn)移具有促進作用[17]。Gal-1能夠與細胞外的糖類配體結(jié)合，促進腫瘤細胞與細胞外基質(zhì)的黏附，對腫瘤細胞的遷移和侵襲具有促進作用。同時Gal-1能夠誘導(dǎo)T淋巴細胞發(fā)生凋亡，導(dǎo)致腫瘤細胞發(fā)生免疫逃逸，促進腫瘤的發(fā)生發(fā)展[18]。本研究結(jié)果顯示，分化型甲狀腺癌組血清Gal-1水平明顯高于甲狀腺良性疾病組和健康對照組，術(shù)后血清Gal-1水平較術(shù)前出現(xiàn)明顯降低，說明Gal-1參與了分化型甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展，與既往文獻報道的血清Gal-1水平可以作為甲狀腺良惡性疾病鑒別的重要指標的結(jié)果一致[19]。本研究結(jié)果顯示，血清Gal-1水平與淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移情況、浸潤深度和TNM分期有關(guān)，而與性別、年齡、腫瘤最大直徑、組織學(xué)類型和分化程度無關(guān)。本研究結(jié)果還顯示，當血清Gal-1水平取截斷值為217.44 ng/mL時，其診斷分化型甲狀腺癌的靈敏度為63.9%，特異度為98.5%，AUC為0.853，顯示出對分化型甲狀腺癌具有較高的診斷效能，與文獻[20]報道一致。

本研究結(jié)果顯示，血清CCL11、GPX3和Gal-1聯(lián)合檢測對分化型甲狀腺癌具有更高的診斷效能，均高于各指標單獨檢測，說明3項指標聯(lián)合檢測具有某種互補性，能夠增加對分化型甲狀腺癌的診斷效能。分化型甲狀腺癌患者血清CCL11和Gal-1水平與GPX3水平呈負相關(guān)，而血清CCL11水平與Gal-1水平呈正相關(guān)，進一步說明3項指標之間具有一定的相關(guān)性，其具體內(nèi)在聯(lián)系機制尚不清楚。

綜上所述，血清CCL11、GPX3和Gal-1參與了分化型甲狀腺癌的發(fā)生發(fā)展過程，聯(lián)合影像學(xué)和細胞學(xué)檢查有助于提高對分化型甲狀腺癌的診斷效能。