益生菌治療難治性原發免疫性血小板減少癥的效果觀察

黃曉春a，莫秋玉a，黃銀燕b， 秦麗娟

(桂林市人民醫院a.血液科；b.檢驗科，廣西 桂林 541002)

原發免疫性血小板減少癥(primary immune thrombocytopenia，ITP)是臨床最常見出血性疾病，是獲得性自身免疫性疾病。該病發病率為5～10/10萬，60歲以上是高發群體[1]，其中難治性患者治療效果較差，有大出血風險。臨床病例常表現血清T淋巴細胞亞群異常和血清炎性因子水平升高。基于此，本研究探討益生菌治療難治性原發免疫性血小板減少癥的效果。

1 資料與方法

1.1 一般資料

選取2018 年1 月至 2020年8月桂林市人民醫院收治的符合成人難治性ITP 診斷標準[1]的患者24例，按照隨機數字表法分為益生菌組和對照組，每組各12例。益生菌組男5例，女7例；年齡19～74歲，平均51.5歲。對照組男7例，女5例；年齡25～80歲，平均46.3歲。兩組一般資料比較差異無統計學意義(P>0.05)。本研究經本院醫學倫理委員會審核批準，所有患者均簽署知情同意書。

1.2 方法

對照組口服達那唑(江蘇聯環藥業股份有限公司，國藥準字：H20023116)治療，400 mg/d， 2次/d；口服環孢素(杭州中美華東制藥有限公司，國藥準字：H10960122)，3 mg·kg-1·d-1， 2次/d。益生菌組口服雙歧桿菌乳桿菌三聯活菌片(內蒙古雙奇藥業股份有限公司，國藥準字：S19980004，規格：0.5 g/片)，2片/次，2次/d，口服達那唑400 mg/d，2次/d，口服環孢素3 mg·kg-1·d-1， 2次/d。兩組均連續治療8周。

1.3 觀察指標

①血小板計數。采用DxFLEX流式細胞儀檢測。②血清T淋巴細胞亞群。治療前后抽取靜脈血標本6 ml，以3 500 r/min的速度離心5 min，分離得到血清，采用免疫熒光法檢測兩組患者治療前后T淋巴細胞CD3+、CD4+、CD8+、 CD25+、CD19+水平。③血清炎性因子。血清檢測方法同上，采用酶聯免疫吸附法測定。

1.4 統計學方法

2 結果

2.1 血小板計數

治療前，兩組血小板計數比較差異無統計學意義(P>0.05)；治療后，益生菌組血小板計數高于對照組(P<0.05)，見表1。

表1 兩組血小板計數比較

2.2 血清T淋巴細胞亞群

治療前，兩組血清T淋巴細胞亞群水平比較差異無統計意義(P>0.05)；治療后，益生菌組CD3+、CD4+、CD25+水平高于對照組(P<0.05)，見表2。

表2 兩組血清T淋巴細胞亞群比較

續表

2.3 血清炎性因子

治療前，兩組血清炎性因子水平比較差異無統計意義(P>0.05)；治療后，益生菌組IL-12、TNF-α、IFN-γ水平低于對照組(P<0.05)，見表3。

表3 兩組血清炎性因子比較

3 討論

ITP是免疫功能紊亂導致的疾病，異常免疫活化介導破壞血小板加速和巨核細胞產生血小板不足[2]。治療關鍵是抑制異常免疫，其中細胞免疫是重點。難治性ITP存在持續免疫異常，常規治療效果差，血小板計數持續低于正常值，容易大出血，有生命危險。難治性ITP治療藥物常選擇達那唑、環孢素等，但效果不理想。本研究中難治性ITP患者血小板嚴重減少，治療前血清CD3+、CD4+及CD25+淋巴細胞亞群的比例明顯下降，炎性因子IL-12、TNF-α、IFN-γ表達明顯升高。本研究用雙歧桿菌乳桿菌三聯活菌聯合達那唑、環孢素口服治療8周，觀察到加用益生菌治療后，血小板計數升高比對照組明顯；血清CD3+、CD4+及CD25+淋巴細胞亞群比例較對照組增加明顯；隨著病情好轉，血清IL-12、TNF-α、IFN-γ表達水平比對照組均下降明顯，以上提示益生菌可通過改善細胞免疫，提高治療效果。

觀察異常的T淋巴細胞亞群及炎性因子對機體細胞免疫的作用機制發現，當CD4+亞群下降常出現免疫反應過度時，CD4+淋巴細胞可分化為調節性T細胞(regulatory T cells，Treg)，該亞群常表達CD25+，具有強大的免疫抑制性，在維持自身免疫耐受、免疫穩態中發揮重要作用[3]。炎性因子IL-12、TNF-α、IFN-γ等由淋巴細胞分泌參與細胞免疫[4]，淋巴細胞亞群異常導致炎性因子也處于異常表達水平，對機體細胞進行破壞。T淋巴細胞的損傷、血清炎性因子失衡成為ITP重要特點[2]。所以，改善淋巴細胞亞群失衡和降低炎性細胞因子有利于改善ITP的病情。

益生菌是指在攝入足夠量的條件下對宿主產生有益作用的活微生物，主要包括雙歧桿菌、乳酸桿菌、乳酸球菌及鏈球菌[5]。本研究用的雙歧桿菌乳桿菌三聯活菌片是益生菌。機體的腸道菌群能夠與宿主免疫系統互相作用[6]，健康狀態下，協助維持機體正常免疫功能。在疾病狀態下，腸道菌群發生失衡，益生菌減少，可以激活效應T細胞，破壞免疫抑制調節T細胞平衡，同時，炎性因子升高，形成惡性循環[7]。已有報告指出，用益生菌治療和免疫異常相關的疾病[8-9]，與本研究結果一致。益生菌可以降低炎性因子，包括TNF-α、IL-12[10]。目前，認為腸道菌群的代謝產物，如短鏈脂肪酸，乙酸丙酸丁酸通過不同的通路作用于T淋巴細胞，參與免疫狀態的改變[11]。

綜上所述，難治性ITP患者的血清CD3+、CD4+、CD25+淋巴細胞亞群比例持續下降，血清炎性因子IFN-γ、TNF-α、IL-12表達持續增高，在益生菌聯合常規藥物治療后，與對照組比較，異常免疫指標改善明顯，血小板計數有升高，未觀察到明顯不良反應。