過敏性紫癜腎損害患者尿微量白蛋白、尿沉渣小圓上皮細(xì)胞檢測(cè)的價(jià)值

劉程程

過敏性紫癜是一種由過敏原誘發(fā)的一系列不良表現(xiàn)。主要臨床癥狀是毛細(xì)血管通透性增加和各種出血,并波及許多內(nèi)臟組織［1］。30%～70%的過敏性紫癜患者可能出現(xiàn)各種程度的腎損傷,而且以幼兒為主。早期的過敏性紫癜腎損傷其表現(xiàn)不典型,腎功能異常特征也不是很大,難以監(jiān)測(cè)［2］。尿中沉積物中的mALB和小圓形上皮細(xì)胞是具有高特異性和敏感性的腎功能的重要指標(biāo)。此次試驗(yàn)的目的是比較過敏性紫癜出現(xiàn)腎損害的患者中尿mALB、尿沉渣小圓上皮細(xì)胞濃度,并評(píng)估其鑒別及病情程度的價(jià)值。現(xiàn)將詳細(xì)結(jié)果報(bào)告如下。

1 資料與方法

1.1 一般資料 選取2019 年6 月～2020 年6 月在中國(guó)人民解放軍第967 醫(yī)院收治的40 例過敏性紫癜患者作為觀察組,另選取40 例同期于本院體檢者作為對(duì)照組。觀察組男12 例,女28 例；年齡2～44 歲,平均年齡(24.6±7.6)歲。對(duì)照組男14 例,女26 例；年齡4～46 歲,平均年齡(26.4±7.5)歲。兩組一般資料比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＞0.05),具有可比性。診斷標(biāo)準(zhǔn)：根據(jù)《血液病診斷及療效標(biāo)準(zhǔn)》制定的診斷過敏性紫癜的要求［3］。觀察組納入標(biāo)準(zhǔn)：①滿足診斷標(biāo)準(zhǔn)；②患者均了解研究項(xiàng)目,并簽署知情同意書。排除標(biāo)準(zhǔn)：①患有嚴(yán)重肝腎功能不全者；②其他自身免疫性疾病者；③繼發(fā)性血小板減少性疾病者；④長(zhǎng)期使用抗凝藥物者。

1.2 方法 檢測(cè)兩組研究對(duì)象的血清CysC、24 h mALB 及尿沉渣小圓上皮細(xì)胞水平。留取兩組研究對(duì)象的尿液,且必須晨尿。尿液中mALB 運(yùn)用化學(xué)試帶法進(jìn)行測(cè)量。運(yùn)用甲苯的防腐敗作用處置尿液,留10 ml 尿液上離心機(jī),離心后測(cè)量尿液的24 h mALB。同時(shí)晨起采集空腹靜脈血約3 ml,對(duì)其離心后運(yùn)用乳膠顆粒增強(qiáng)免疫投射比濁法測(cè)量血清CysC 水平,其操作過程均按照說明書進(jìn)行,同時(shí)記錄結(jié)果。震蕩尿樣后,用1500 r/min 運(yùn)行5 min 后丟棄上清液,留0.2 ml 尿沉渣,將尿沉渣搖勻后用微量毛細(xì)吸管吸取,再注入到計(jì)數(shù)池內(nèi),在高倍顯微鏡下用9 個(gè)大格為參照,觀察并統(tǒng)計(jì)細(xì)胞數(shù)。

1.3 觀察指標(biāo) 記錄并比較兩組研究對(duì)象CysC、24 h mALB 陽性率及CysC、24 h mALB 與尿沉渣小圓上皮細(xì)胞水平。

1.4 統(tǒng)計(jì)學(xué)方法 采用SPSS20.0 統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件處理數(shù)據(jù)。計(jì)量資料以均數(shù)±標(biāo)準(zhǔn)差()表示,采用t檢驗(yàn)；計(jì)數(shù)資料以率(%)表示,采用χ2檢驗(yàn)。P＜0.05 表示差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。

2 結(jié)果

2.1 兩組CysC、24 h mALB 陽性率比較 觀察組的CysC、24 h mALB 陽性率均高于對(duì)照組,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表1。

表1 兩組CysC、24 h mALB 陽性率比較［n(%)］

2.2 兩組CysC、24 h mALB 與尿沉渣小圓上皮細(xì)胞水平比較 觀察組的CysC、24 h mALB 與尿沉渣小圓上皮細(xì)胞水平均高于對(duì)照組,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。見表2。

表2 兩組CysC、24 h mALB 與尿沉渣小圓上皮細(xì)胞水平比較()

表2 兩組CysC、24 h mALB 與尿沉渣小圓上皮細(xì)胞水平比較()

注：與對(duì)照組比較,aP＜0.05

3 討論

我國(guó)過敏性紫癜中過敏性紫癜性腎炎的發(fā)病率為30%～50%［4］,過敏性紫癜發(fā)生時(shí),25%～60%的患者有腎損害。前期輕微的腎損傷很難從尿蛋白和尿常規(guī)檢測(cè)中判斷［5］。因此,需要一個(gè)高靈敏度和特異性的相關(guān)檢測(cè)指標(biāo)。臨床觀察提示腎移植后,過敏性紫癜性腎炎的發(fā)病幾率偏高,證實(shí)過敏性紫癜性腎炎是免疫結(jié)合產(chǎn)物誘發(fā)的全身系統(tǒng)疾病。在過敏性紫癜和過敏性紫癜性腎炎患者的血液中均檢測(cè)到免疫球蛋白(Ig)A1,包括IgA1 的免疫復(fù)合物和IgA 類風(fēng)濕因子的增加,而IgA2 少見。陸曉萍等［6］經(jīng)研究證實(shí),30%以上的過敏性紫癜患者的IgA 濃度上升,而過敏性紫癜性腎炎與過敏性紫癜的IgA 濃度無明顯差別。崔張莉等［7］證實(shí)了糖基化IgA1 是過敏性紫癜性腎炎和IgA 腎病相同的遺傳基因。糖基化IgA1 主要的作用是過敏性紫癜性腎炎起病后糖基化IgA1 基因被IgA1 或IgG 抗原消除。但是因?yàn)轶w積太大,導(dǎo)致半乳糖缺陷IgA1(Gd-IgA1)免疫結(jié)合產(chǎn)物無法被糖蛋白受體發(fā)現(xiàn),故無法被消除,并不斷在血管組織中堆積。這些免疫結(jié)合產(chǎn)物可堆積在腎小球膜上,使腎小球測(cè)量細(xì)胞過度增殖,分泌細(xì)胞外基質(zhì)成分,從而損傷腎小球。試驗(yàn)證實(shí),CD71 代表了腎小球膜系細(xì)胞的IgA1 的受體。IgA1 和IgA2 的鉸鏈區(qū)域包含部分甘露糖和N-丙酮葡萄糖,并合成甘露糖與凝集素(MBL)的結(jié)合物,與絲氨酸蛋白酶(MASP)相結(jié)合。當(dāng)病毒或細(xì)菌侵入機(jī)體時(shí),會(huì)誘發(fā)生成許多的IgA2,IgA2 參與MBL 和MASP 的反應(yīng),再生成更龐大的MASP-1 結(jié)合產(chǎn)物,最后生成IgA2-MBL-MSPA-1 結(jié)合物,堆積于腎小球膜內(nèi),激發(fā)凝血素的Glomerulusin 原位標(biāo)志,導(dǎo)致腎小球受損,白蛋白是血漿蛋白的重要組成部分。正常情況下,白蛋白體積巨大,不能通過腎小球基膜,尿中的尿極低,血液中的蛋白質(zhì)≤20 mg,但如果患者腎小球基膜出現(xiàn)受損時(shí),腎小球基膜通透性增加,導(dǎo)致蛋白通透性上升,此時(shí)白蛋白會(huì)大量滲入尿液中,導(dǎo)致尿液蛋白濃度上升,可以用酶聯(lián)免疫吸附法和放射免疫法測(cè)出尿蛋白。當(dāng)腎功能受損時(shí),一系列小分子蛋白質(zhì),如β2微球蛋白、尿視黃醇結(jié)合蛋白(RBP)和 N-乙酰-β-D-氨基葡萄糖苷酶(NAG)等,這些小分子蛋白往往能自由地通過腎小球?yàn)V過膜,幾乎所有的腎小管重新吸收。RBP 屬于lipocalin 超家族,主要在肝臟合成,分布于尿、血清、腦脊液等,通常與前白蛋白形成復(fù)合物。游離RBP 被腎小球?yàn)V過,大部分被腎小管上皮吸收和降解,章建娜等［8］的研究表明,尿RBP 可作為腎小管功能障礙的標(biāo)志物。NAG 的相對(duì)分子質(zhì)量為130 kd,不能從腎小球中自由過濾。主要存在于近曲小管上皮細(xì)胞的溶酶體中。近端腎小管上皮細(xì)胞受損時(shí),尿NAG 明顯升高。任少敏等［9］發(fā)現(xiàn)NAG 是腎小管活動(dòng)性損傷的敏感指標(biāo)之一,可以顯示腎臟的早期毒性損傷。但對(duì)過敏性紫癜腎損傷標(biāo)志物的研究主要集中在腎小球損傷的早期診斷,如尿微量白蛋白、胱氨酸血癥等,對(duì)過敏性紫癜性腎炎腎小管損傷的早期診斷研究較少,因此綜合監(jiān)測(cè)腎小管損傷以預(yù)測(cè)腎早期蜜腺功能,尿路膠原是一種大分子基質(zhì)膠原,屬于非纖維膠原,由3 條a肽鏈、3 個(gè)螺旋結(jié)構(gòu)組成,是一種小腎臟中最重要的膠原,在球上皮基膜和基質(zhì)膠原中起重要作用,當(dāng)基膜受損時(shí),尿路尿布Ⅳ型膠原明顯增多。近年來,越來越多的研究表明腎小管間質(zhì)損傷在腎臟疾病的發(fā)展中起著重要作用。其損傷的嚴(yán)重程度直接關(guān)系到腎臟疾病的發(fā)展速度和預(yù)后,甚至超過腎小球病變本身。研究顯示,在成人中53.49%的糖尿病患者、48.98%的高血壓患者尿NAG 水平與尿蛋白定性檢測(cè)陰性的52.38%的系統(tǒng)性紅斑狼瘡患者明顯升高。同時(shí),韓媛等［10］發(fā)現(xiàn)糖尿病患者尿RBP 水平仍處于正常水平,且早于尿β2微球蛋白水平。黃丹林等［11］研究還表明尿NAG 酶與血清肌酐呈正相關(guān),可預(yù)測(cè)糖尿病腎病腎損害的嚴(yán)重程度。本研究結(jié)果顯示：記錄并比較兩組研究對(duì)象血清CysC、24 h mALB 陽性率；檢測(cè)兩組研究對(duì)象CysC、24 h mALB 與尿沉渣小圓上皮細(xì)胞水平。結(jié)果顯示觀察組的CysC、24 h mALB 陽性率分別為87.5%、90.0%,均高于對(duì)照組的5.0%、7.5%,差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。觀察組的CysC、24 h mALB與尿沉渣小圓上皮細(xì)胞水平分別為(2.32±0.38)mg/L、(789.52±46.92)mg/L、(3.20±2.90)個(gè)/μl,均高于對(duì)照組 的(0.53±0.04)mg/L、(78.71±12.97)mg/L、(0.80± 0.30)個(gè)/μl,差異均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P＜0.05)。所以尿mALB 和CysC 濃度能夠體現(xiàn)過敏性紫癜出現(xiàn)腎損害的程度。小圓上皮細(xì)胞有管狀上皮細(xì)胞和基底流動(dòng)上皮細(xì)胞［12］。如果腎小管型可見小而圓的上皮細(xì)胞,可作為診斷腎輸卵管炎的可靠依據(jù)。現(xiàn)階段,目視篩查是唯一檢測(cè)尿沉渣的方法。此次試驗(yàn)結(jié)果證實(shí),觀察組的尿沉渣中,上皮細(xì)胞濃度比健康組顯著上升,而尿沉渣小圓上皮細(xì)胞可作為過敏性紫癜損害的診斷標(biāo)準(zhǔn)。

綜上所述,通過檢測(cè)過敏性紫癜腎損害患者的尿mALB、尿沉渣小圓上皮細(xì)胞濃度,可以評(píng)估其腎損傷的程度,對(duì)臨床治療提供極大幫助。