非小細胞肺癌術(shù)后復發(fā)轉(zhuǎn)移與外周血CD4/CD8比值關(guān)系的研究

彭勇 李龍 楊松 張義晗 王元漢

(貴州醫(yī)科大學附屬腫瘤醫(yī)院(貴州省腫瘤醫(yī)院)胸外科,貴州 貴陽 550001)

2018年全球癌癥數(shù)據(jù)顯示，肺癌的發(fā)病率及死亡率均位居第一位[1-3]。多項相關(guān)研究顯示在惡性腫瘤形成過程中腫瘤細胞產(chǎn)生免疫抑制因子抑制淋巴細胞分化，使得T淋巴細胞中CD4+細胞比例降低，免疫反應誘導及效應不足，特異抗腫瘤效應下降，CD8+T細胞反應性增多，使得其直接作用于B細胞表面的同種異型受體，使與腫瘤抗原結(jié)合的受體被封閉，CD8+T細胞升高則免疫反應下降，CD4/CD8比值下降，免疫抑制效應高于免疫誘導，多提示預后不佳[4]。本研究納入不同分期、年齡、性別、吸煙史的可手術(shù)切除的非小細胞肺癌患者，采集其圍手術(shù)期及術(shù)后不同時期隨訪的相關(guān)資料及外周血T淋巴細胞亞群的數(shù)據(jù)，進行統(tǒng)計分析。報告如下。

1 資料與方法

1.1臨床資料 將2014年3月至2015年7月所有于我科進行根治手術(shù)的Ⅰa-Ⅲa期非小細胞肺癌納入研究，研究經(jīng)我院倫理委員會備案并批準。進行相關(guān)資料的收集，并按照計劃隨訪復查，隨訪滿5年或隨訪至復發(fā)轉(zhuǎn)移為觀察終點，最終從124名入組患者中篩選出77例能夠按照計劃完成隨訪的患者入組。所有患者根據(jù)術(shù)后病理分期，按照當時最新版本的NCCN肺癌治療指南進行不同的隨訪或后續(xù)治療，包括輔助化療、輔助放化療、輔助分子靶向治療等，放化療結(jié)束后進入定期隨訪，靶向治療持續(xù)到腫瘤進展。其中男性患者45人，女性患者32人，年齡36-72(54.2±9.0)歲。術(shù)后5年內(nèi)未發(fā)現(xiàn)復發(fā)轉(zhuǎn)移的患者54例，5年內(nèi)出現(xiàn)復發(fā)轉(zhuǎn)移的患者23例。肺腺癌42例，肺鱗癌35例，Ⅰa期患者8例，1例復發(fā)轉(zhuǎn)移，Ⅰb期患者23例，2例出現(xiàn)復發(fā)轉(zhuǎn)移，Ⅱa期患者22例，3例出現(xiàn)復發(fā)轉(zhuǎn)移，Ⅱb期患者16例，8例出現(xiàn)復發(fā)轉(zhuǎn)移，Ⅲa期患者10例，9例出現(xiàn)復發(fā)轉(zhuǎn)移。收集并整體所有入組患者每個隨訪時期的影像學資料及流式細胞學檢測報告。

1.2方法 我院檢驗科擁有獲得SFDA認證的FACSCantoⅡ型流式細胞計數(shù)儀，能夠進行淋巴細胞免疫學分析及多倍體分析。并配有專用的FACSCantoⅡclinical臨床軟件，實現(xiàn)了一管式淋巴細胞亞群全套分析，結(jié)果真實可靠。

2 結(jié) 果

2.1將77例患者分成未復發(fā)轉(zhuǎn)移組及復發(fā)轉(zhuǎn)移組，并按照病理分型及病理分期進行亞組的分類。見表1。

表1 所有患者的病理分型、分期及復發(fā)轉(zhuǎn)移情況

2.2將兩個組的患者按照年齡、病理類型、病理分期、性別、吸煙史進行相關(guān)性分析，結(jié)果顯示未復發(fā)轉(zhuǎn)移組及復發(fā)轉(zhuǎn)移組術(shù)前的CD4/CD8比值只與術(shù)后病理分期相關(guān)(P<0.05)，與其他各項因素無關(guān)(P>0.05)。見表2。

表2 未復發(fā)轉(zhuǎn)移組與復發(fā)轉(zhuǎn)移組術(shù)前CD4/CD8水平是否與年齡、癌種、分期、性別、吸煙史相關(guān)

2.3將所有患者按照病理分期分成早期(I期)組及中期組(II期、III期)，比較兩組患者術(shù)前的平均CD4/CD8比值，分別為(1.40±0.23)及(1.00±0.25)，P<0.01，有顯著差異。見表3。將復發(fā)轉(zhuǎn)移組術(shù)前的平均CD4/CD8比值(0.92±0.23)與未復發(fā)轉(zhuǎn)移組術(shù)前的平均CD4/CD8值(1.25±0.29)進行統(tǒng)計學分析，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表4。

表3 不同分期術(shù)前CD4/CD8比值

表4 復發(fā)轉(zhuǎn)移組與未復發(fā)轉(zhuǎn)移組術(shù)前CD4/CD8比值

2.4將所有患者術(shù)前的CD4/CD8值(1.15±0.31)與術(shù)后數(shù)天的(0.82±0.24)進行統(tǒng)計學分析，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。見表5。

表5 所有患者術(shù)前與術(shù)后數(shù)日的CD4/CD8對比

2.5復發(fā)轉(zhuǎn)移組中位復發(fā)轉(zhuǎn)移時間32個月，CD4/CD8比值0.73±0.16，選取未復發(fā)轉(zhuǎn)移組36個月CD4/CD8比值：(1.43±0.26)，進行兩組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P<0.01)。將所有復發(fā)轉(zhuǎn)移組患者各個隨訪時間節(jié)點的CD4/CD8值描繪成23條曲線圖，發(fā)現(xiàn)患者在復發(fā)轉(zhuǎn)移前，曲線都有下降的趨勢。見表6。

表6 復發(fā)轉(zhuǎn)移組患者復發(fā)轉(zhuǎn)移時與未復發(fā)轉(zhuǎn)移組相同時期CD4/CD8比值比較

3 討 論

非小細胞肺癌術(shù)后患者，根據(jù)術(shù)后不同的病理分期進行不同的隨訪或輔助治療，治療完成后需要進行計劃性隨訪，隨訪內(nèi)容包括顱腦核磁共振、胸部、上腹部增強CT、全身骨掃描等影像學檢查及包括腫瘤標志物、循環(huán)腫瘤細胞(CTC)、循環(huán)腫瘤DNA(ctDNA)[5]等相關(guān)實驗室檢查。依靠上述措施來“監(jiān)視”機體的無瘤狀態(tài)，然而影像學檢查具有“監(jiān)視滯后性”，腫瘤標志物具有非特異性，均無法起到滿意的復發(fā)前預判作用，ctDNA在預測肺癌術(shù)后復發(fā)轉(zhuǎn)移上有較為靈敏的優(yōu)勢[6]，但較為昂貴的費用及醫(yī)保政策的原因，目前仍難以大面積開展。機體本身具有抗腫瘤的免疫反應機制，由細胞免疫反應與體液免疫共同參與，淋巴細胞亞群在特異性細胞免疫殺傷和機體免疫功能調(diào)節(jié)等方面扮演十分重要的角色[7]。CD4和CD8T淋巴細胞在肺癌患者的免疫反應中發(fā)揮著重要作用[8]。本次研究針對不同分期不同病理的77例患者，經(jīng)過5年的隨訪，將患者分成復發(fā)轉(zhuǎn)移組及未復發(fā)轉(zhuǎn)移組。通過本組數(shù)據(jù)分析發(fā)現(xiàn)，患者術(shù)前的CD4/CD8與患者的年齡、病理學類型、吸煙史、性別等沒有關(guān)系，與國內(nèi)相關(guān)報道相似[9]，其與患者的術(shù)后病理分期有關(guān)，中晚期肺癌術(shù)前的CD4/CD8比值明顯低于早期肺癌術(shù)前的數(shù)值，相關(guān)報道也證實了這一點[4]，這也提示了中晚期非小細胞肺癌患者術(shù)前就處于免疫抑制狀態(tài)，腫瘤的負荷降低了患者的免疫應答。本研究發(fā)現(xiàn)，患者術(shù)后CD4/CD8比值普遍較術(shù)前下降，有顯著統(tǒng)計學意義，說明肺癌患者術(shù)后細胞免疫功能仍處于抑制狀態(tài)，這可能與手術(shù)創(chuàng)傷、麻醉打擊、機體應急有一定關(guān)系[10]。未復發(fā)轉(zhuǎn)移組顯示，手術(shù)1年后患者的CD4/CD8比值逐漸回升至術(shù)前水平或更高的水平，這與術(shù)后或放化療后機體恢復有關(guān)，亦與腫瘤負荷的消除從而導致免疫抑制緩解有關(guān)。復發(fā)轉(zhuǎn)移組的數(shù)據(jù)顯示，患者術(shù)后一段時間內(nèi)CD4/CD8比值得到一定程度的提升，但隨著體內(nèi)殘存腫瘤細胞的死灰復燃，并逐漸出現(xiàn)復發(fā)或轉(zhuǎn)移病灶，此時機體的免疫應答再次下降，通過對轉(zhuǎn)移組23例患者的相關(guān)分析，我們發(fā)現(xiàn)患者在復發(fā)轉(zhuǎn)移前6月至12月有明顯的CD4/CD8比值下降趨勢，并下降至一個相對較低的水平，隨后患者出現(xiàn)了被影像學證實的局部復發(fā)或遠處轉(zhuǎn)移病灶，因此此項指標在肺癌術(shù)后患者的復發(fā)轉(zhuǎn)移方面有一定的預測作用。

本次研究發(fā)現(xiàn)CD4/CD8比值的動態(tài)變化是一個重要的參考指標，連續(xù)的降低趨勢及較低的比值水平是肺癌術(shù)后患者復發(fā)轉(zhuǎn)移的高危因素，如果結(jié)合腫瘤標志物、ctDNA、CTC等指標的變化，可以進行復發(fā)前預警。如果能夠在高危時間節(jié)點前采取相應的治療措施，比如化療、靶向治療、免疫治療等，或許會對部分肺癌術(shù)后患者帶來益處。本次研究歷時周期較長，且納入病例較少，后續(xù)在臨床工作的價值仍需要相關(guān)大樣本研究的進一步證實。