外周血Treg、Th17及其比例在不同分期川崎病患兒中的變化及臨床意義

陳 飛,陳永萍

陜西省寶雞市第三醫院兒科,陜西寶雞 721004

川崎病(KD)是一種急性系統性血管綜合征，多發生于5歲以下兒童，患兒多表現為發熱、球結膜充血、皮疹等[1]。KD所致的冠狀動脈損害(CAL)是兒童獲得性心臟病常見的病因，嚴重威脅患兒的生命健康[2-3]。相關研究表明，KD的發生和發展與免疫系統功能紊亂密切相關，其中調節性T淋巴細胞(Treg)、輔助性T淋巴細胞17(Th17)作為細胞免疫的重要組成部分，也參與了KD的發生和發展[4-5]。目前，外周血Treg百分比、Th17百分比及其比值在不同分期KD患兒中的變化及對CAL的預測價值尚不清楚。本研究探討外周血Treg百分比、Th17百分比及其比值在不同分期KD患兒中的變化及臨床意義,現報道如下。

1 資料與方法

1.1一般資料 選取2018年9月至2020年10月本院收治的126例KD患兒作為研究組，另選取同期在本院體檢的60例健康兒童作為對照組。研究組男71例,女55例;年齡8個月至8歲，平均(3.21±1.52)歲。對照組男38例,女22例;年齡6個月至8歲，平均(3.15±1.46)歲。兩組研究對象性別、年齡等一般資料比較，差異均無統計學意義(P>0.05)，具有可比性。本研究經本院醫學倫理委員會批準同意。

1.2納入和排除標準

1.2.1納入標準 研究組患兒符合《美國心臟病學會川崎病診斷指南》[6]中關于KD的診斷標準；對照組均為健康兒童；年齡6個月至8歲；患兒家屬或監護人對本研究知情同意并簽署知情同意書。

1.2.2排除標準 合并先天性心臟病或其他先天性疾病患兒；合并惡性腫瘤患兒；腦膜炎或神經系統發育畸形患兒；智力低下、廣泛性發育障礙及癲癇者；入院治療前已發生CAL；合并精神疾病者；合并呼吸系統疾病或感染性疾病患兒。

1.3方法

1.3.1臨床資料收集 收集可能影響KD患兒CAL發生的有關資料，主要包括性別、年齡、KD類型、KD分期、IVIG治療前發熱持續時間、是否為IVIG抵抗、C反應蛋白(CRP)、白細胞計數(WBC)、血小板計數(PLT)、血紅蛋白(Hb)、清蛋白(ALB)、肌紅蛋白(Mb)、降鈣素原(PCT)、外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17。

1.3.2CAL發生情況及分組 入院治療2周后，統計CAL發生情況，依據《川崎病的冠狀動脈損害》[7]中有關標準對CAL的發生進行判斷，并經超聲檢查確診。依據是否發生CAL分為CAL發生組和CAL未發生組。

1.3.3外周血Treg和Th17百分比檢測方法 抽取所有研究對象空腹外周靜脈血5 mL，肝素抗凝，采用流式細胞儀及其配套試劑盒測定，采用堿性磷酸酶-抗堿性磷酸酶法測定Treg和Th17百分比，并計算Treg/Th17。

1.3.4治療方法 本研究中所有KD患兒確診后均靜脈輸注丙種球蛋白(IVIG，國藥準字：S20003024，廣東雙林生物制藥有限公司)2 g/kg，口服阿司匹林(國藥準字：J20171021，拜耳醫藥保健有限公司)每次10 mg，4次/天，連續治療2周。

2 結 果

2.1兩組研究對象外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比較 研究組外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于對照組,差異均有統計學意義(P<0.05)，見表1。

表1 兩組研究對象外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比較

2.2不同KD分期患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比較 急性期KD患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于恢復期,差異均有統計學意義(P<0.05)，見表2。

表2 不同分期KD患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17比較

2.3KD患兒CAL發生情況及CAL發生組和CAL未發生組KD患兒臨床資料比較 入院治療2周后，126例 KD患兒共有23例發生CAL，CAL發生率為18.25%。CAL發生組急性期KD占比、IVIG治療前發熱持續時間、IVIG抵抗占比、PLT、PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于CAL未發生組，差異均有統計學意義(P<0.05)，見表3。

表3 CAL發生組和未發生組KD患兒臨床資料比較[ n(%)或

組別nIVIG抵抗CRP(mg/L)WBC(×109/L)PLT(×109/L)Hb(g/L)CAL發生組234(17.39)87.65±12.5313.56±4.18396.75±42.18107.35±12.33CAL未發生組1034(3.88)83.26±10.7611.87±4.02351.02±32.46105.82±12.68χ2/t5.7691.7161.8103.6910.526P0.0160.0890.0730.0030.600

組別nALB(g/L)Mb(μg/L)PCT(ng/mL)Treg百分比(%)Th17百分比(%)Treg/Th17CAL發生組2336.57±5.1323.05±5.671.16±0.564.75±1.326.41±1.470.75±0.31 CAL未發生組10335.18±4.9221.83±6.080.68±0.373.85±1.065.28±1.250.59±0.28 χ2/t1.2160.8804.1274.0545.7676.676P0.2260.3800.0010.002<0.001<0.001

2.4影響KD患兒CAL發生的多因素Logistic分析 以KD分期(急性期=1，恢復期=0)、IVIG治療前發熱持續時間(連續變量)、IVIG抵抗(是=1，否=0)、PLT(連續變量)、PCT(連續變量)、Treg百分比(連續變量)、Th17百分比(連續變量)及Treg/Th17(連續變量)作為自變量，是否發生CAL(發生=1，未發生=0)作為因變量，進行多因素Logistic回歸分析，結果顯示,PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均為影響KD患兒CAL發生的危險因素(OR=2.740、2.724、3.340、3.235，P<0.05)，見表4。

表4 影響KD患兒CAL發生的多因素Logistic回歸分析

2.5外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17對KD患兒CAL發生的預測價值 ROC曲線分析結果顯示，外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17預測KD患兒CAL發生的最佳截斷值分別為4.21%、5.74%、0.66，AUC分別為0.746、0.682、0.758，見圖1、表5。

圖1 外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17對KD患兒CAL發生預測的ROC曲線

表5 外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17對KD患兒CAL發生的預測效能

3 討 論

KD病因及發病機制目前尚不明確，其可能會導致系統、臟器損害，其中以CAL最為常見，嚴重者可引發冠狀動脈瘤，致心肌缺血梗死，嚴重威脅患者的生命健康[8-9]。及早發現患兒是否發生CAL并及時進行干預，有利于改善患兒預后[10]。探討外周血Treg百分比、Th17百分比及其比值在不同KD分期患兒中的變化及臨床意義十分重要。

本研究發現，研究組外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于對照組，且急性期KD患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于恢復期，由此提示，與健康兒童比較，KD患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17存在異常偏高現象，本研究結果與徐振宇等[11]研究結果相近。本研究結果顯示，入院治療2周后，KD患兒CAL發生率為18.25%，CAL發生組KD急性期占比、IVIG治療前發熱持續時間、IVIG抵抗占比、PLT、PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于CAL未發生組。多因素Logistic回歸分析結果顯示，PCT、Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均為影響KD患兒CAL發生的危險因素，由此提示KD患兒CAL的發生率較高，需引起患兒家屬及醫護人員的注意，臨床上需逐一控制各項因素對KD患兒的影響，以降低CAL的發生率。PCT是監測機體炎性反應的重要參數之一，可對炎癥性疾病的臨床進程、預后進行評價、預測[12-13]。CHEN等[14]研究指出，若機體存在嚴重感染時，PCT水平會異常升高。Treg主要來源于胸腺，主要通過分泌白細胞介素-10等炎癥因子，直接或間接對抗原特異性免疫應答進行調節，與KD患兒疾病的發生和發展密切相關[15]。Th17的主要功能是促進炎性反應，周玉杰[16]研究表明，白細胞介素-17、白細胞介素-21等炎癥因子可能促進KD患兒疾病的發生和發展。Treg/Th17發生變化，表明外周血Treg/Th17的平衡被打破，T細胞的免疫功能出現異常。ROC曲線分析結果顯示，外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17預測KD患兒CAL發生的最佳截斷值分別為4.21%、5.74%、0.66，AUC分別為0.746、0.682、0.758，由此提示外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17預測KD患兒CAL發生的效能較高，可作為預測KD患兒CAL發生的重要參考指標。

綜上所述，急性期KD患兒外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17均高于恢復期，外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17預測KD患兒CAL發生的效能較高，可作為預測KD患兒CAL發生的重要參考指標，建議在臨床上對KD患兒進行外周血Treg百分比、Th17百分比及Treg/Th17監測，若出現明顯異常，應及時進行調控，以降低KD患兒CAL發生率。